COX-2、VEGF及TGF-β1在慢性粒細胞白血病中的表達及臨床意義

王曉軍，茹甫毅，吳雙有，朱衛民，田培軍

COX-2、VEGF及TGF-β1在慢性粒細胞白血病中的表達及臨床意義

王曉軍，茹甫毅，吳雙有，朱衛民，田培軍

目的 觀察慢性粒細胞白血病(chronic myeloid leukemia, CML)患者血清環氧合酶-2(COX-2)、血管內皮生長因子(VEGF)及轉化生長因子β1(TGF-β1)的水平變化，探討各指標在臨床中的指導意義。方法 選取我院2014年1月—2015年8月確診的CML 50例(白血病組)，予甲磺酸伊馬替尼治療3個月；同時選擇在我院體檢健康的40例(對照組)。比較兩組血清COX-2、VEGF及TGF-β1的水平變化，并觀察白血病組治療前后血清COX-2、VEGF及TGF-β1的變化。結果 與對照組比較，白血病組治療前后血清COX-2及VEGF水平顯著升高，TGF-β1水平顯著降低，差異有統計學意義(P<0.01)；與治療前比較，白血病組治療后血清COX-2、VEGF水平顯著降低，TGF-β1水平顯著升高，差異有統計學意義(P<0.01)。白血病組治療前急變期、加速期血清VEGF及COX-2水平均較慢性期顯著升高，TGF-β1水平則降低，差異有統計學意義(P<0.01)；治療后完全緩解(CR)者血清COX-2、VEGF及TGF-β1水平逐漸恢復正常，與未緩解(NR)者比較差異有統計學意義(P<0.01)。白血病組血清COX-2、VEGF水平與TGF-β1水平呈負相關(R=-0.632，P<0.01；R=-0.315，P=0.026)。結論 COX-2、VEGF及TGF-β1與CML患者病情密切相關，可作為CML病情評估的重要參考依據。

粒細胞白血病，慢性；環氧合酶-2；血管內皮生長因子；轉化生長因子-β1

慢性粒細胞白血病(chronic myeloid leukemia, CML)是造血干細胞異常轉化而產生的髓系惡性克隆性疾病，約占成人白血病的20%[1]。在腫瘤形成過程中，異常的血管生成發揮關鍵作用，且腫瘤細胞具有誘導血管生成的潛能，其在生長因子的刺激下轉化為發揮作用的表型。血管內皮生長因子(VEGF)是一種特異性作用于血管內皮細胞的多功能細胞因子，能促進血管生成。環氧合酶-2(COX-2)可促進實體腫瘤的發生、發展，其在白血病患者中表達增加。轉化生長因子β1(TGF-β1)是目前已知的作用最強的造血負性調控因子，不僅能刺激成纖維細胞的生長，修復創傷，還能調節造血功能，抑制腫瘤細胞的增殖。本研究觀察CML患者血清COX-2、VEGF及TGF-β1的水平變化及其相關性，分析各指標的臨床意義，現將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取我院2014年1月—2015年8月確診的CML 50例(白血病組)，其中男26例，女24例；中位年齡36歲；處于慢性期30例，加速期、急變期各10例，均符合《血液病的診斷及療效標準》[2]制定的CML診斷標準，經外周血、骨髓和Ph染色體檢查確診，且bcr/abl融合基因或Ph染色體顯示基因陽性，心、肝、腎等臟器功能均無明顯異常。選擇同期在我院體檢健康的40例(對照組)，其中男20例，女20例；中位年齡38歲，均無血液系統異常，無腫瘤、感染性及自身免疫性疾病，無心、肝、腎等臟器損傷，近1個月無藥物使用史。

1.2 治療方法 白血病組均服用甲磺酸伊馬替尼400～800 mg/d,治療3個月。開始服藥的1個月內每周檢查血常規1次，以后每個月檢查血常規1次，同時查肝腎功能、心肌酶等生化指標。患者每個月來院復診時均行常規體格檢查，每3個月做一次骨髓形態學及融合基因檢測，每位患者至少回訪3個月，直到觀察終止或死亡。

1.3 檢測方法 白血病組分別于治療前后抽取空腹靜脈血2 ml，對照組隨機抽取空腹靜脈血2 ml，均分離血清凍存待測。COX-2、VEGF及TGF-β1檢測均按照酶聯免疫吸附(ELISA)試劑盒(購自美國Adlitteranl Diagnostic Laboratories)的操作說明進行。

2 結果

2.1 兩組血清COX-2、VEGF及TGF-β1的水平變化 與對照組比較，白血病組治療前后血清COX-2及VEGF水平顯著升高，TGF-β1水平顯著降低，差異有統計學意義(P<0.01);與治療前比較，白血病組治療后血清COX-2及VEGF水平顯著降低，TGF-β1水平顯著升高，差異有統計學意義(P<0.01)，見表1。

表1 慢性粒細胞白血病組與健康對照組血清COX-2、VEGF及TGF-β1的水平變化

注：與對照組比較，bP<0.01；與治療前比較，dP<0.01；COX-2為環氧合酶-2，VEGF為血管內皮生長因子，TGF-β1為轉化生長因子β1

2.2 白血病組治療前不同病變期血清COX-2、VEGF及TGF-β1水平比較 與慢性期比較，加速期和急變期血清COX-2及VEGF水平明顯升高，TGF-β1水平明顯降低，差異有統計學意義(P<0.01)；與加速期比較，急變期血清COX-2、VEGF及TGF-β1水平差異無統計學意義(P>0.05)，見表2。

表2 慢性粒細胞白血病組治療前不同病變期血清COX-2、VEGF及TGF-β1水平比較

注：與慢性期比較，bP<0.01；COX-2為環氧合酶-2，VEGF為血管內皮生長因子，TGF-β1為轉化生長因子β1

2.3 白血病組治療后血清COX-2、VEGF及TGF-β1的水平變化 白血病組治療后達完全緩解(CR)者(包括完全血液學緩解、完全遺傳學緩解及完全分子學緩解)血清COX-2、VEGF及TGF-β1水平逐漸恢復正常，與治療后未緩解(NR)者(包括部分緩解、血液學復發和耐藥)比較差異有統計學意義(P<0.01)，見表3。

表3 慢性粒細胞白血病組治療后完全緩解與未緩解血清COX-2、VEGF及TGF-β1水平比較

注：COX-2為環氧合酶-2，VEGF為血管內皮生長因子，TGF-β1為轉化生長因子β1

2.4 白血病組血清COX-2、VEGF及TGF-β1的相關性分析 白血病組血清COX-2、VEGF與TGF-β1呈負相關(R=-0.632，P<0.01；R=-0.315，P=0.026),見圖1、2。

圖1 白血病組血清環氧合酶-2與轉化生長因子β1的相關性分析

圖2 白血病組血管內皮生長因子與轉化生長因子β1的相關性分析

3 討論

CML患者原始及幼稚細胞的惡性增生、積聚，逐漸取代和抑制正常骨髓造血功能，引發貧血、出血、感染及多組織器官浸潤等癥狀，同時新生的異常血管增多，使骨髓微小血管密度明顯高于正常人，且在腫瘤的生長、浸潤和轉移過程中發揮重要作用，與腫瘤的生長、擴散、轉移及預后密切相關。VEGF作為一種特異性作用于血管內皮細胞的多功能細胞因子，可促進血管內皮細胞的增生，進而促進血管生成[3]。近年研究發現，新生血管亦參與白血病的病理、生理過程[4]。Bellamy等[5]研究發現，在急性白血病、CML和慢性淋巴細胞白血病患者的骨髓和外周血中均可發現VEGF及其受體的表達。

本研究表明，白血病組血清VEGF水平明顯高于對照組，且治療前加速期和急變期的表達亦明顯高于慢性期，差異均有統計學意義；予甲磺酸伊馬替尼治療后達CR者，血清VEGF水平基本恢復正常，而NR者VEGF表達增加，分析甲磺酸伊馬替尼可抑制CML患者細胞分泌VEGF，從而阻斷新生血管形成，與Legros等[6]報道結果一致。

近年研究顯示，COX-2在多種腫瘤組織中過度表達，參與腫瘤的發生、發展，作用機制可能與COX-2抑制細胞凋亡有關[7]。有研究證實COX-2可促進VEGF、堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)等血管新生因子的表達，直接刺激內皮細胞遷移，產生花生四烯酸，誘導血管生成和Bcl-2的表達，從而抑制內皮細胞的凋亡，提示COX-2抑制細胞凋亡的機制可能與Bcl-2的調節性表達有關[8]。Sappayatosok等[9]研究發現，COX-2在CML組的表達率和積分均高于正常對照組，提示COX-2與CML的發病有關。

本研究顯示，白血病組血清COX-2水平明顯升高，且治療前加速期和急變期的水平亦明顯高于慢性期，差異有統計學意義；治療后NR者血清COX-2水平升高。推斷COX-2與CML發病有關，隨著病情進展，血清COX-2水平逐漸升高，提示COX-2可作為判斷CML預后和臨床分期的一個重要指標。

CML是造血系統的惡性腫瘤，其白血病干細胞多表達Ph+染色體及Bcr/Abl融合基因，而造血微環境中的骨髓間充質干細胞是調控造血功能的主要成分之一，通過與造血細胞直接接觸和表達多種細胞因子以調節造血細胞的增殖和分化。TGF-β1作為最強的血細胞抑制因子之一，在維持造血干細胞持續處于靜息狀態、抑制過度增殖、誘導分化及促進細胞凋亡方面起重要作用[10]。

本研究顯示，白血病組血清TGF-β1水平明顯低于對照組，且治療前加速期和急變期的水平亦明顯低于慢性期，差異均有統計學意義；予甲磺酸伊馬替尼治療后，達CR者血清TGF-β1水平基本恢復正常，而NR者TGF-β1表達明顯減低。說明CML患者血清TGF-β1水平越低，其對造血負調控的作用越弱，從而加速白血病細胞的大量增殖。

相關性分析顯示，白血病組血清COX-2、VEGF與TGF-β1呈負相關，提示TGF-β1作為造血負性調控因子，抑制COX-2及VEGF的表達，表明血清COX-2、VEGF及TGF-β1水平與白血病細胞的表達和病情演變密切相關。

綜上，隨著CML的病情演變，血清COX-2、VEGF與TGF-β1的表達亦發生改變，動態監測血清COX-2、VEGF與TGF-β1的水平變化可作為判斷患者病情及指導臨床用藥的參考依據。

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Expression and Clinical Significance of Serum Cyclooxygenase-2, Vascular Endothelial Growth Factor and Transforming Growth Factor-β1 in Chronic Myelogenous Leukemia

WANG Xiao-jun, RU Fu-yi, WU Shuang-you, ZHU Wei-min, TIAN Pei-jun
(Department of Hematology， Central Hospital of Ankang City， Ankang, Shaanxi 725000, China)

Objective To observe changes of serum cyclooxygenase-2 (COX-2), vascular endothelial growth factor (VEGF) and transforming growth factor-β1 (TGF-β1) levels in patients with chronic myelogenous leukemia (CML) and to discuss guidance significance of indexes. Methods A total of 50 patients with CML confirmed during January 2014 and Augest 2015 (leukemia group) were treated with Imatinib Mesylate for 3 months, and other 40 healthy people taking medical examination were selected as control group. Changes of serum COX-2, VEGF and TGF-β1 levels were compared in two groups, and changes of the levels before and after treatment in leukemia group were observed. Results Compared with those in control group， before and after treatment, serum COX-2 and VEGF levels were significantly increased, while TGF-β1 level was significantly decreases in leukemia group (P<0.01); compared with those before treatment, in leukemia group, serum COX-2 and VEGF levels were significantly decreased; while TGF-β1 level was significantly increased after treatment (P<0.01). In leukemia group, before treatment serum VEGF and COX-2 levels were significantly increased, while TGF-β1 levels were significantly decreased in acute transformation phase and accelerated-phase compared with those in chronic-phase (P<0.01); after treatment, COX-2, VEGF and TGF-β1 levels of complete remission (CR) patients returned to normal, and the differences in the levels compared with those in non-remission (NR) patients were statistically significant (P<0.01). Serum COX-2 and VEGF levels were negatively correlated with TGF-β1 level in leukemia group (R=-0.632，P<0.01；R=-0.315，P=0.026). Conclusion COX-2, VEGF and TGF-β1 levels are closely related to conditions of patients with CML, and therefore they can be used as important revidence of disease for evaluating CML condition.

Granulocytic leukemia, chronic; Cyclooxygenase-2; Vascular endothelial growth factor; Transforming growth factor beta 1

陜西省衛生科研項目(D80)

725000 陜西 安康，安康市中心醫院血液內科

R733.72

A

1002-3429(2017)06-0099-04

10.3969/j.issn.1002-3429.2017.06.035

2017-02-27 修回時間：2017-03-30)