6種殺菌劑對山蒼子組培污染控制效果研究

張立　李濤　吳嬌

摘要 山蒼子是我國的能源樹種，具有很高的經濟價值。在山蒼子組培中，染菌比較嚴重，導致繼代培養無法進行。為解決生產中的實際問題，在配制培養基時，分別添加了6種殺菌劑進行對比試驗。結果表明，防止山蒼子組培苗染菌效果較好的藥劑為80%多福鋅可濕性粉劑，其防治效果為85.71%，抑菌效果為89.39%，山蒼子存活率為61.90%。

關鍵詞 山蒼子；組織培養；殺菌劑；染菌率

中圖分類號 S482.2 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739（2017）13-0108-01

Abstract Litsea cubeba is our country′s energy tree species with high economic value.In the tissue culture of Litsea cubeba，contamination is serious，resulting in the subculture can not be done.To solve the actual problems in the production，in the preparation of culture medium，6 kinds of fungicides were used respectively.The results showed that the better fungicide to control contamination of Litsea cubeba plantlets was the 80% of Christopher zinc wettable powder.The controlling effect was 85.71% and the inhibitory effect was about 89.39%.At the same time，the survival rate of Litsea cubeba plantlets was 61.90%.

Key words Litsea cubeba；tissue culture；fungicide；pollution rate

山蒼子是我國的特有資源，其果實含有豐富的檸檬醛、脂肪醇，具有較高的經濟開發價值。目前，山蒼子主要為種子繁殖，成活率低，但利用組培快繁技術，山蒼子外植體又易褐化[1]，雜菌污染現象嚴重。游 玲等從山蒼子植株中分離出25株內生真菌[2]，魏練平等從山蒼子葉中分離出2株內生真菌[3]。采用殺菌劑防治外植體污染在植物組織培養中已有研究[4-6]。本試驗在培養基中添加6種農用殺菌劑，研究控制山蒼子組培內源菌污染的有效方法，可為以后組培快繁提供參考和依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

組織培養材料為當年生山蒼子枝條。選取的殺菌劑多數為復配劑，分別為50%氯溴異氰尿酸可溶粉劑、31%綠亨氮苷·嗎啉胍可溶粉劑、80%多福鋅可濕性粉劑、70%惡霉靈可溶性粉劑、80%惡霉·福可濕性粉劑、80%多菌靈可濕性粉劑。所用培養基為MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L。

1.2 試驗設計與實施

試驗根據所用藥劑及濃度不同，共設7個處理，分別為50%氯溴異氰尿酸可溶粉劑800倍液（A）、31%綠亨氮苷·嗎啉胍可溶粉劑1 000倍液（B）、80%多福鋅可濕性粉劑800 倍液（C）、70%惡霉靈可溶性粉劑1 000倍液（D）、80%惡霉·福可濕性粉劑800倍液（E）、80%多菌靈可濕性粉劑800倍液（F），以空白為對照（CK）。按使用濃度計算殺菌劑用量，直接加入培養基中，高溫常規滅菌。3次重復。每組7瓶，每瓶接種3株山蒼子外植體（山蒼子枝條洗凈后，無菌條件下，75%酒精浸泡30 s，0.1%升汞浸泡8 min，無菌水沖洗4～5次）。在光照培養箱中培養，1周后調查結果。

1.3 調查統計

用直尺測量每一個培養瓶中的菌落直徑，菌落不規則的測量其長徑和短徑，并以其平均值表示直徑，然后計算凈生長量和抑菌效果[7]。

2 結果與分析

由表1可知，山蒼子組培苗存活率從高到低依次是處理C（61.90%）>處理F（42.86%）>處理A（33.33%）>處理B（19.05%）>處理E（4.76%）>處理D（0），抑菌效果由高到低依次是處理C（89.39%）>處理F（75.73%）>處理E（73.36%）>處理B（54.17%）>處理A（52.66%）>處理D（6.28%）。從防治效果看，最好的是處理C（85.71%），其他處理均<50%。同時，也觀察到處理E的抑菌效果為73.36%，但防治效果卻為4.76%，說明80%惡霉·福可濕性粉劑對抑制病原菌生長有效，但對植物內源菌無效。

3 結論與討論

試驗結果表明，80%多福鋅可濕性粉劑的防治效果為85.71%，抑菌效果為89.39%，山蒼子組培苗存活率為61.90%；80%多菌靈可濕性粉劑的抑菌效果為75.73%，但防治效果只有42.86%。植物組織培養在固定的空間環境里，包括操作環境和培養環境，常見的優劣病原菌應是相對固定和特定的，因而研究時主要是比較植物組織培養的培養基和殺菌劑的效果，其中利用殺菌劑防止植物組織培養污染可大大降低污染率，也可以降低成本，不過也可能對植物產生負面影響。有針對性地使用殺菌劑或是殺菌劑組合，既可防止污染又不會影響培養物生長。根據殺菌劑的作用機理，若能篩選出能抑制菌種又不會影響或少影響培養物生長的殺菌劑，在組織培養中省略培養基滅菌環節，將大大節約人工和能源。

如果利用殺菌劑解決了這2方面的問題，那么就有可能改變傳統的封閉式植物組織培養模式，實現開放式的植物組織培養模式。在組培環境中，例如光照、濕度、氣體、培養基固化物、組培容器和儀器設備等因素對植物組織培養的局限性將有極大地改善，從而帶來組培技術的重大突破。

4 參考文獻

[1] 劉友銀.山蒼子繁殖材料外植體防褐變技術研究[J].中國園藝文摘，2014（2）：41-42.

[2] 游玲，林娜，郭華，等.山蒼子內生真菌多樣性研究[J].西南師范大學學報（自然科學版），2012，38（1）：121-126.

[3] 魏練平，魏洪璇，吳丹，等.山蒼子葉內生真菌的純化與鑒定[J].中國微生態學雜志，2013，25（10）：1131-1133.

[4] 王志成，劉明稀，易自力.殺菌劑防治植物組織培養污染的初步研究[J].長沙電力學院學報（自然科學版），2004，19（1）：82-84.

[5] 劉靜，孫海偉，段祖安，等.混合殺菌劑對植物組培污染防治實驗[J].山東林業科技，2004（5）：10-12.

[6] 李曉鶯，羅青，張曦燕，等.殺菌劑對枸杞組織培養中真菌污染的控制[J].安徽農業科學，2008，36（36）：15804.

[7] 李濤，張圣喜，曾維軍.魚腥草白絹病室內藥效試驗[J].湖南農業科學，2007（6）：128-130.