GnRH拮抗劑對子宮內膜異位癥模型大鼠的實驗研究

魏 來，朱國智，夏志軍

GnRH拮抗劑對子宮內膜異位癥模型大鼠的實驗研究

魏 來1，朱國智1，夏志軍2

目的 觀察促性腺激素釋放激素(GnRH)拮抗劑阿巴瑞克(Abarelix)對大鼠移植性異位子宮內膜的抑制作用及其對子宮內膜異位癥模型大鼠血清CA125、E2、FSH、LH水平的影響。方法 用外科自體移植術建立大鼠子宮內膜異位癥動物模型，分為4組：對照組、去勢組、GnRH激動劑丙氨瑞林組和阿巴瑞克組。分別測定給藥前及給藥4周后，各組模型大鼠異位子宮內膜體積及血清CA125、E2、FSH、LH水平，觀察給藥前后各組模型大鼠異位子宮內膜體積及血清CA125、E2、FSH、LH水平變化。結果 給藥4周后，阿巴瑞克組模型大鼠異位子宮內膜體積明顯縮小，血清CA125、E2、FSH、LH水平明顯降低。結論 阿巴瑞克對異位子宮內膜有抑制作用，對子宮內膜異位癥有治療作用，具有良好的臨床應用前景。

GnRH拮抗劑；子宮內膜異位癥；大鼠模型；CA125；E2；FSH；LH

0 引言

子宮內膜異位癥(Endometriosis，EMS)是子宮內膜腺體和間質組織在子宮腔以外組織器官內慢性侵襲性生長的異質性疾病。臨床癥狀可表現為盆腔痛、月經失調、不孕、自然流產、盆腔包塊和泌尿生殖道畸形等。在育齡婦女中發病率為7%～10%，發病高峰年齡組為30～45歲[1]。不孕婦女中發病率為25%～40%[2]。子宮內膜異位癥雖為良性疾病，但具有良性腫瘤生物學特征和向惡性腫瘤轉化的惡性變傾向[3]，手術治療后復發率高，治療效果不理想，因此常輔助藥物治療來減緩其復發[4]。本研究用大鼠子宮內膜異位癥動物模型觀察促性腺激素釋放激素(Gonadotropin-releasing hormone antagonist，GnRH)拮抗劑阿巴瑞克對大鼠異位子宮內膜的抑制作用及其對血清CA125、E2、FSH、LH水平的影響，期望為臨床用藥提供依據。

1 資料與方法

1.1 材料 雌性清潔級SD大鼠，鼠齡80 d左右，體重300～350 g。在恒濕恒溫環境下飼養。醋酸阿巴瑞克、丙氨瑞林(沈陽凱捷生物醫藥公司)。CA125、E2、FSH、LH ELISA試劑盒(沈陽藍基生物科技有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 模型制備 參照 Jones等[5]方法，動情周期規則，用外科自體移植術建立子宮內膜異位癥的動物模型。4周后，打開腹腔，腹壁種植處異位內膜生長且有黃色液體內容物，鏡下見子宮內膜腺體或上皮、間質細胞，提示模型建立成功。

1.2.2 實驗動物分組及給藥 對模型建立成功大鼠，測量子宮內膜的長、寬、高，計算其體積(V1)。將實驗動物隨機分為4組(每組20只)。①對照組：僅給予相同體積生理鹽水皮下注射；②去勢組：造模成功后切除雙側卵巢；③丙氨瑞林組：醋酸丙氨瑞林粉針100 μg/(kg·d)，生理鹽水溶解后皮下注射；④阿巴瑞克組：醋酸阿巴瑞克粉針100 μg/(kg·d)，生理鹽水溶解后皮下注射。

1.2.3 觀察指標 ①異位子宮內膜體積：給藥4周后，麻醉處死動物，測量異位內膜體積(V2)，計算各組藥物對異位內膜的控制率[(1-V2/V1)×l00%]。②血清CA125水平：分別于給藥前及給藥4周后取動物模型尾靜脈血，ELISA法測定血清CA125水平。③血清E2、FSH、LH水平：分別于給藥前及給藥1周、4周后取動物模型尾靜脈血，ELISA法測定血清E2、FSH、LH水平。

2 結果

2.1 異位子宮內膜體積變化 給藥前，各組大鼠異位子宮內膜體積比較差異無統計學意義(P>0.05)，給藥后，阿巴瑞克組大鼠異位內膜體積明顯縮小，與對照組比較差異有統計學意義(P<0.01)，抑制作用可達去勢水平(P>0.05)，與丙氨瑞林組的抑制率相比差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

注：*與對照組比較，P<0.01

2.2 血清CA125水平 給藥前各組大鼠血清CA125水平差異無統計學意義，給藥后阿巴瑞克組血清CA125水平明顯下降，與對照組比較差異有統計學意義(P<0.05)，與去勢組及丙氨瑞林組比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

2.3 血清E2、FSH、LH水平 給藥前各組大鼠血清激素水平比較差異無統計學意義(P>0.05)。給藥1周后，丙氨瑞林組血清E2、FSH、LH水平均有不同程度升高，與對照組比較差異有統計學意義(P<0.05)；阿巴瑞克組血清E2、FSH、LH水平均有不同程度下降，與對照組比較差異有統計學意義(P<0.05)。給藥4周后，丙氨瑞林組及阿巴瑞克組血清E2、FSH、LH水平均顯著下降，與對照組比較差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表2 四組大鼠血清CA125水平比較

注：*與對照組比較，P<0.01

表3 四組大鼠血清E2、FSH、LH水平比較

注：*與對照組比較，P<0.01

3 討論

EMS雖為良性疾病，但其病灶可向外播散，種植生長[6]。其根治性手術可以徹底清除EMS異位病灶，但不能保留患者生育能力。為保留患者生育能力，常采用保守性治療方法，但術后復發率較高，因此，探討輔助治療方式，改善患者預后及控制復發率成為另一個重點[7-8]。研究提示，EMS病灶能隨卵巢功能衰退而萎縮退化，再發病者極少，提示病變的發生及消長可能與卵巢功能密切相關[9]。GnRH激動劑可以緩解EMS患者臨床癥狀，降低EMS患者血清E2、FSH、LH水平，是近年來臨床中廣泛認可的能有效改善EMS術后患者治療效果的藥物[10-11]。但GnRH激動劑在用藥初期可出現“點火效應”[12]，即一過性促性腺激素升高，需持續用藥2～3周，才能產生“藥物性去卵巢”作用，可能使某些疾病癥狀加重。

CA125是一種源于體腔上皮細胞的高分子量糖蛋白抗原，可作為腫瘤標記物。子宮內膜有較強的分泌CA125的功能，并且內膜異位癥病灶中CA125濃度高于正常子宮內膜。因此，CA125測定可用于監測子宮內膜異位癥病變活動情況。藥物或手術治療有效時，CA125下降，復發時升高[13]。

本研究結果表明，GnRH拮抗劑阿巴瑞克可有效抑制模型大鼠異位子宮內膜生長，降低血清CA125水平，提示阿巴瑞克對EMS有治療作用。且阿巴瑞克與受體結合后，能立即發揮較強的抑制性腺軸和性激素釋放的效應，占據受體位點后不產生受體脫敏效應[14]，沒有GnRH激動劑的“點火效應”，用藥劑量及不良反應均較小、用藥時間較短。此外，GnRH激動劑易被胃腸道消化破壞[15]，使用時需注射，而GnRH拮抗劑不易被胃腸道消化，可通過口服吸收發揮作用，這將大大提高患者的依從性，因此，有很好的臨床應用前景。

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Research on the effect of gonadotropin-releasing hormone antagonist in endometriosis rat models

WEI Lai1,ZHU Guo-zhi1,XIA Zhi-jun2

(1.Department of Obstetrics and Gynecology,the Central Hospital of Changtu County,Tieling 112599,China;2.Department of Obstetrics and Gynecology,Shengjing Hospital of China Medical University,Shenyang 110004,China)

Objective To observe the inhibitive effect of GnRH antagonist on ectopic endometrium,and the effects of GnRH antagonist on serum CA125,E2,FSH and LH levels in endometriosis rat models.Methods The endometriosis model was established in rats and the model rats were divided into 4 groups:control group,non-ovary group,alarelin group and abarelix group,20 rats in each group.Changes in the volume of ectopic endometrium and the levels of serum CA125,E2,FSH and LH in endometriosis rat models before and after treatment were observed.Results After 4 weeks,the volume of ectopic endometrium and the serum levels of CA125,E2,FSH and LH reduced significantly in abarelix group.Conclusion Abarelix has inhibitive effect on ectopic endometrium,which can be used for the treatment of endometriosis.It is worthy of using clinically.

GnRH antagonist;Endometriosis;Rat model;CA125;E2;FSH;LH

2017-03-23

1.遼寧省昌圖縣中心醫院婦產科，遼寧 鐵嶺 112599；2.中國醫科大學附屬盛京醫院婦產科，沈陽 110004

國家科技部十二五“重大新藥創制”科技重大專項課題(2012ZX09401004)；2.中華預防醫學會科研資金支持項目(20130606)

10.14053/j.cnki.ppcr.201708004