不同劑量蛋白質飲食對Ⅱ期壓瘡愈合及血清白蛋白、血紅蛋白影響的實驗研究

張亞楠，李 賢,王 瑤,趙志紅，高文娟，鄭美潔，吳曉嬌

·科研論著·

不同劑量蛋白質飲食對Ⅱ期壓瘡愈合及血清白蛋白、血紅蛋白影響的實驗研究

張亞楠，李 賢,王 瑤,趙志紅，高文娟，鄭美潔，吳曉嬌

[目的]研究不同劑量的蛋白質飲食對大鼠Ⅱ期壓瘡模型創面愈合時間、血紅蛋白和血清白蛋白的影響。[方法]將100只大鼠完全隨機分為對照組(含4 g蛋白質的標準鼠糧)、實驗1組(2 g蛋白質)、實驗2組(3 g蛋白質)、實驗3組(5 g蛋白質)，采用磁鐵壓迫持續缺血損傷復制大鼠Ⅱ期壓瘡模型，造模成功后每組每天分別給予4種蛋白含量的飲食干預，在造模后第1天、第3天、第7天、第14天測量大鼠的壓瘡面積、體重，并在每個時間段從每組隨機抽取3只大鼠腹主動脈取血測量血紅蛋白和血清白蛋白的含量。[結果]對照組壓瘡愈合時間最短，實驗1組愈合時間最長，4組都在壓瘡發生后的前一個星期愈合最快，實驗1組、實驗2組血紅蛋白和血清白蛋白持續下降。 [結論]蛋白質対壓瘡愈合時間有影響，基礎飲食最利于Ⅱ期壓瘡創面愈合，且不會引起體內蛋白質含量的變化。

壓瘡;不同劑量;蛋白質;飲食干預；愈合時間；血紅蛋白；白蛋白；實驗研究

壓瘡是長期臥床病人嚴重并發癥之一，據文獻統計，美國院外壓瘡發生率為5.0%，院內壓瘡發生率為1.4%[1-5]。Eberlein-Gonska等[6]研究顯示：德國院外壓瘡發生率為1.21%，院內發生率為0.78%。蔣琪霞等[7]研究發現我國院內壓瘡發生率為0.628%,壓瘡的發生不僅增加病人的痛苦和經濟負擔，延長住院時間，嚴重者會發生感染甚至死亡,故尋求快速有效的壓瘡治療方法是臨床醫務人員亟待解決的問題。長期以來壓瘡的治療以創面治療為重點，蛋白質治療未得到足夠的重視，強化蛋白質支持可以加速壓瘡創面的愈合，對減少創面大小有直接作用。營養支持是一項經濟有效的預防措施，但由于基礎研究和臨床研究較少，國際上至今尚未制定基于循證醫學證據的壓瘡營養支持治療指南[8]。本研究從蛋白質支持治療出發探討不同劑量蛋白質飲食對大鼠壓瘡愈合時間、愈合率、血清白蛋白(HB)、血紅蛋白(Alb)的影響，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 自河北醫科大學實驗動物中心購買雄性健康SD大鼠100只，體重(280±20)g，動物合格證編號:1607209。

1.2 實驗器材 圓片形鐵片(直徑15.0 mm,厚0.3 mm,重0.6 g，高壓滅菌消毒)， 圓形磁鐵(直徑15.0 mm,厚2.5 mm,重2.6 g，磁通量高達1 500高斯)購自河北超強磁業技術有限公司。扭力天平(精確到0.001，型號TN-100F，購自上海皓莊儀器有限公司)、臺式離心機(型號：400C，購自北京白洋醫療器械有限公司)、血紅蛋白試劑盒和血清白蛋白試劑盒(購自南京生物工程研究所)、吸頭(10 μL～200 μL)、EP管(0.6 mL)、硫酸紙、卡紙等。

1.3 飲食配制 4組蛋白質水平飲食的設定是參考1992年國家衛生部頒布的醫學實驗動物標準中規定的每100 g大鼠鼠糧中含蛋白質18%～25%[9]。計算得出100 g鼠糧中含蛋白質18 g～25 g。見表1。

表1 不同食物中蛋白質水平的飼料配方(每100 g中蛋白質含量) g

1.4 實驗方法

1.4.1 動物分組 將大鼠適應性飼養(飼養溫度控制在20 ℃～25 ℃,飼養濕度40%～60%)采用標準飼料進行喂養(飼料購買于河北醫科大學實驗動物中心)1周后,根據體重大小編號按隨機數字表將100只大鼠隨機分為4組：對照組(含4 g蛋白質的標準鼠糧)、實驗1組(2 g蛋白質)、實驗2組(3 g蛋白質)、實驗3組(5 g蛋白質)，每組25只，4組體重差異無統計學意義(P>0.05)。排除標準：受壓處失去全層皮膚組織而且損傷深達肌肉組織或露出鐵片。整個造模過程除去死亡和排除不符合標準，最終實驗1組、實驗2組、對照組各22只，實驗 3組23只。

1.4.2 大鼠Ⅱ期壓瘡模型的復制 動物模型的制作參照Peirce Wassermann等埋置鐵片加外用磁鐵加壓的造模方法[10-11]將健康SD大鼠適應性飼養1周后，4組大鼠實驗前禁食、禁水8 h，大鼠經10%水合氯醛0.3 mL(100 g)腹腔注射麻醉后,在其背部正中線兩側臀部進行脫毛處理，備皮區域為4 cm×4 cm，用5%聚維酮碘消毒手術區域，在大鼠左臀部靠近頭端切一2 cm的切口，用鑷子鈍性分離筋膜和組織，將無菌鐵片置于肌肉下，用4-0的Dexon聚羥基乙酸線縫合切口，再用5%聚維酮碘消毒縫合處以防感染，大鼠帶鐵片適應性生活3 d后無感染反應，在體外放置圓形磁鐵從而對肌肉和皮膚產生壓力，造成局部組織缺血，每次加壓2 h后將磁鐵取下灌注0.5 h，如此循環，每天大鼠連續進行5個循環后將磁鐵取下，第2天早上重復以上步驟。判斷標準:創面出現暗紅色，創面周圍皮膚紅腫，不伴有滲血滲液，實驗大鼠有明顯疼痛表現[12]。

1.4.3 干預方法 在Ⅱ期壓瘡形成之前4組大鼠都給予相同的標準鼠糧，即20 g鼠糧中含蛋白質4 g的飼料，Ⅱ期壓瘡形成后每天每只大鼠飲食量相同，都是20 g左右，但攝入蛋白質的量不同，即對照組給予含4 g蛋白質的標準鼠糧，實驗1組給予含2 g蛋白質的鼠糧，實驗2組3 g、實驗3組5 g，自由飲水。

1.4.4 觀測指標和方法 觀察大鼠壓瘡形成后第1天、第3天、第7天、第14天4個時間點壓瘡面積和每只大鼠最后壓瘡愈合時間。①血紅蛋白、血清白蛋白的測量方法，壓瘡形成后第1天、第3天、第7天、第14天每個時間點每組隨機抽取3只大鼠腹主動脈采血測量血清白蛋白、血紅蛋白含量，分別用文齊氏液和溴甲酚綠將其稀釋后，再用分光光度計法測量含量。②大鼠創面的測量及計算方法：將透明尿酸紙放在大鼠創面上畫出創面的大小，然后將畫有創面面積的透明尿酸紙放到質地均勻的卡紙上，再將創面面積畫到卡紙上后沿著面積大小剪下卡紙并稱重量。從這張卡紙上不同部位剪下3個2 cm×2 cm的正方形稱其重量，計算卡紙每平方厘米的重量。最后用創面卡紙的重量除以卡紙每平方厘米的重量計算出創面的面積。③創面愈合時間的計算方法：每組剩下的大鼠一直觀察到創面完全愈合，并記錄每組每只大鼠的創面愈合時間。④壓瘡面積愈合率的計算方法：原始壓瘡面積-剩余未愈合壓瘡面積)/原始壓瘡面積。

2 結果

2.1 不同劑量的蛋白質飲食對大鼠壓瘡愈合時間的影響(見表1)

d

2.2 不同劑量蛋白質飲食對4組大鼠壓瘡愈合率的影響(見表2)

%

2.3 不同劑量蛋白質飲食對大鼠血清白蛋白的影響(見表3)

g/L

2.4 不同劑量蛋白質飲食對4組大鼠血紅蛋白的影響(見表4)

g/L

3 討論

3.1 不同劑量的蛋白質飲食對大鼠壓瘡愈合時間的影響 本研究結果顯示：對照組壓瘡愈合時間最短(16.36 d±1.57 d)，實驗1組(給予2 g蛋白質)壓瘡愈合時間最長(21.63 d±1.12 d)，實驗3組(5 g蛋白質)壓瘡愈合時間(17.58 d±1.31 d)長于對照組,說明壓瘡愈合過程中對蛋白質的需要并不是多多益善，而是有一最適蛋白量。此與國春花[13]對不同劑量蛋白質對下肢開放性骨折病人營養狀況及臨床結局的研究結果一致。超過最適蛋白量對壓瘡的愈合并不能起到最佳效果，但會因為營養過剩對機體代謝器官有著不良影響，這就提示臨床在為壓瘡病人制定飲食干預時應具體情況、具體分析，不能盲目地認為壓瘡病人蛋白供給愈多越好，應根據病人的情況制定個體化蛋白質飲食干預，既能保證病人營養的需要，又可減少病人的花費，同時也縮短了壓瘡愈合時間，減輕病人痛苦。

3.2 不同劑量蛋白質飲食對大鼠壓瘡愈合面積的影響 本研究結果顯示：壓瘡形成后第7天和第14天時組間壓瘡愈合率較高，說明營養干預對于壓瘡長期療效明顯。壓瘡是慢性創傷，蛋白質攝入不足是導致壓瘡發生和發展的一個重要因素，也是直接影響壓瘡愈合的一個關鍵因素，動物實驗研究證實，僅供給50%的熱量時，肉芽組織的生成與基質蛋白的合成明顯降低，從而影響了膠原蛋白的合成。由于傷口分泌物損失，炎癥修復過程和新生組織形成，使蛋白質的攝入尤為重要，因為蛋白質是傷口愈合所必須的，蛋白質供應不足會影響壓瘡愈合。4組大鼠自身比較，4種不同劑量的蛋白質飲食都可以使創面愈合，雖然4組蛋白質水平不同但4組大鼠都可以攝入足夠的能量，因此沒有導致壓瘡進一步發展，且4組瘡面都是在前一個星期愈合速度最快，這可能是因為組織損傷的前一個星期內肉芽組織增長最快，對于蛋白質需要量最多，因此在肉芽快速增長的關鍵時期補充最適蛋白量對于壓瘡愈合起著至關重要的作用。這也提示臨床為壓瘡病人制定飲食干預時，應在壓瘡形成前期肉芽組織生長最快時補充最適蛋白量對于壓瘡的愈合效果最好。

3.3 不同劑量蛋白質飲食對大鼠血紅蛋白和血清白蛋白的影響 本研究結果顯示：與實驗前相比，實驗后實驗1組和實驗2組大鼠的血紅蛋白和血清白蛋白持續下降，說明大鼠的血紅蛋白和血清白蛋白是動態變化的，即使給予一定的營養支持，如果蛋白質供應不足，大鼠仍會發生營養不良和低蛋白血癥，延長壓瘡愈合時間。這與馮曉慧等[14-15]研究發現低蛋白血癥是影響創傷病人預后的獨立危險因素相一致。在飲食干預3d時血清白蛋白含量差異有統計學意義(P<0.05)，而在飲食干預第7天時血紅蛋白含量差異有統計學意義(P<0.05)，說明在低蛋白飲食過程中血清白蛋白變化比血紅蛋白變化靈敏度高，雖然臨床上將血紅蛋白和血清白蛋白作為監測壓瘡病人的營養指標，但是從本實驗來看血清白蛋白的變化能更早地反映壓瘡病人的營養狀態變化。所以，對于臨床壓瘡病人應密切觀察血紅蛋白含量的變化并作為判斷壓瘡預后的一個觀測指標。

4 小結

壓瘡是臨床護理中常見的并發癥，壓瘡的管理重在預防、難在治療,治療壓瘡的關鍵之一是營養支持，臨床對于壓瘡病人蛋白質的可耐受最高攝入量并沒有明確實驗依據，國內尚缺乏多中心的隨機對照試驗證實營養支持在壓瘡預防和治療方面的療效，也缺乏大樣本以國人體質和營養攝入數據為基礎的壓瘡病人營養評價指標[1]。對于壓瘡病人營養支持的認識雖然有所提高，但如何根據病人的營養狀況結合病情制定合理個體化營養支持，尤其是蛋白質的用量如何調整，研究較少。鑒于此狀況，本研究通過隨機、對照基礎研究為臨床壓瘡病人的飲食指導提供可參考依據，為了能盡快制定出壓瘡病人個體化營養支持方案提供醫學循證依據。由于限于研究時間和大鼠例數，本研究僅觀察4個水平的蛋白質對于大鼠Ⅱ期壓瘡愈合的影響，其他水平的蛋白質對于Ⅱ期以上壓瘡愈合的影響還需要今后進行更深入的觀察和研究。

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(本文編輯李亞琴)

Experimental study on different doses of protein diet on stage Ⅱ pressure ulcer healing，serum albumin and hemoglobin

Zhang Yanan，Li Xian，Wang Yao,etal

(Chengde Medical University，Hebei 067000 China)

Objective:To explore the effects of different doses of protein diet on wound healing time of stage Ⅱ pressure ulcer，hemoglobin and serum albumin in rats.Methods:A total of 100 rats were randomly divided into control group (standard rat food containing 4 g protein)，experimental group one (2 g protein)，experiment group two (3 g protein)，and experiment group three (5 g protein).The rats were treated with magnetic compression and continuous ischemic injury to copy the model of stage Ⅱ pressure ulcer.When the model finished，the rats were treated with four kinds of protein contents in each group every day.On the first day，the third day，the seventh day，and fourteenth day when the model finished，the pressure sores area and body weight of rats were measured，and the contents of hemoglobin and serum albumin at abdominal aorta were measured from 3 random rats’ from each group at each time.Results:The healing time was the shortest in control group and the longest in experimental group 1.The four groups had the fastest healing at the first week after the occurrence of pressure ulcer.The hemoglobin and serum albumin were continually decreasing in experimental group one and the experimental group two.Conclusions:The healing time was affected by protein.The basic diet was the most beneficial to the stage Ⅱ pressure ulcer healing and did not cause the change of the protein content in the body.

pressure ulcers;different doses;protein;diet intervention;healing time;hemoglobin;albumin;experimental study

河北省衛生衛計委醫學科學研究重點課題,編號：20160463。

張亞楠，碩士研究生在讀，單位：067000，承德醫學院；李賢(通訊作者)、王瑤、趙志紅、高文娟、鄭美潔、吳曉嬌單位：051000，河北省人民醫院。

信息 張亞楠，李賢,王瑤,等.不同劑量蛋白質飲食對Ⅱ期壓瘡愈合及血清白蛋白、血紅蛋白影響的實驗研究[J].護理研究，2017，31(25)：3102-3105.

R472

A

10.3969/j.issn.1009-6493.2017.25.008

1009-6493(2017)25-3102-04

2016-11-28；

2017-08-18)