胃癌患者外周血MDA、CK-18及CA72-4水平變化及臨床意義

史加寧 耿小平 汪 泳

(安徽醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院普外科，安徽 合肥 230601)

胃癌患者外周血MDA、CK-18及CA72-4水平變化及臨床意義

史加寧 耿小平 汪 泳

(安徽醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院普外科，安徽 合肥 230601)

目的探討胃癌患者外周血丙二醛(MDA)、角蛋白(CK)-18及CA72-4水平變化及臨床意義。方法選取原發(fā)性胃癌患者76例為實驗組，對照組46例為正常健康體檢者。入院后晨起空腹抽取肘靜脈血4 ml，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測兩組血清中MDA、CK-18及CA72-4水平，不同分期MDA、CK-18及CA72-4水平之間的相關(guān)性及與胃癌臨床病理特點的關(guān)系。結(jié)果實驗組血清中MDA與CK-18水平明顯高于對照組(P<0.01)。胃癌患者血清中MDA、CK-18及CA72-4水平隨著TNM分期的增高而升高(P<0.01)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤突破漿膜的胃癌患者血清中MDA、CA72-4水平明顯高于沒有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和腫瘤未突破漿膜層的胃癌患者(P<0.05)，MDA、CA72-4水平在是否有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及病理分化程度之間無明顯差異(P>0.05)；有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的胃癌患者血清中CK-18水平較沒有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者明顯升高(P<0.01)；但CK-18水平在是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、是否突破漿膜層、病理分化程度之間無明顯差異(P>0.05)。結(jié)論MDA、CK-18及CA72-4水平能夠作為胃癌診斷的生化指標(biāo)，作為判斷胃癌預(yù)后和術(shù)后復(fù)發(fā)的參考指標(biāo)。

胃癌；丙二醛；角蛋白(CK)-18；CA72-4

胃癌是發(fā)生于胃竇、賁門、胃體、全胃甚至大部分胃的惡性腫瘤，胃黏膜上皮細(xì)胞增殖/凋亡系統(tǒng)動態(tài)失衡，凋亡因子被抑制，胃上皮細(xì)胞不受控制的增殖、分化而形成胃癌〔1,2〕。目前臨床上胃癌的治療方法是以手術(shù)為主，放化療為輔，早期胃癌5年生存率在90%以上，但早期胃癌無明顯癥狀，待發(fā)現(xiàn)時多已是胃癌晚期〔3〕。因此，早期診斷、早期治療是延長胃癌患者生存期的關(guān)鍵。腫瘤標(biāo)志物是早期診斷胃癌的重要指標(biāo)，但是目前胃癌腫瘤標(biāo)志物特異性及敏感性較差〔4〕。研究發(fā)現(xiàn)〔5〕，丙二醛(MDA)與角蛋白CK-18及CA72-4在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、浸潤和轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮重要的作用。本文探究血清中MDA、CK-18及CA72-4水平診斷胃癌的價值及機(jī)制。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取安徽醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院普外科2014年3月至2015年2月診斷為原發(fā)性胃癌的患者76例為實驗組，男57例，女19例，年齡44～80歲，采用國際抗癌聯(lián)盟(UICC)TNM分期標(biāo)準(zhǔn)，Ⅰ期12例，Ⅱ期20例，Ⅲ期30例，Ⅳ期14例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移48例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移28例；腫瘤突破漿膜層57例，沒有突破漿膜層19例；遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移10例，沒有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移66例；病理高分化7例，中分化34例，低分化35例。對照組46例，為正常健康體檢者，男25例，女21例，年齡〔平均(51.2±7.7)〕歲。實驗組均經(jīng)影像學(xué)、病理等確定診斷。兩組的年齡、性別、文化程度、家庭背景等一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1.2診斷標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)胃癌臨床治療指南確定診斷標(biāo)準(zhǔn)〔6〕：①早期患者有惡心、嘔吐或類似于消化性潰瘍的上消化道癥狀；②食欲減退、消瘦、乏力、貧血；③胃部疼痛及體重減輕；④X線鋇餐檢查有充盈缺損；⑤螺旋CT、MRI等影像學(xué)檢查能夠輔助診斷和臨床分期；⑥纖維胃鏡病理活檢是診斷胃癌的金標(biāo)準(zhǔn)。

1.3納入標(biāo)準(zhǔn) 符合原發(fā)性胃癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)；患者年齡40～80歲，能為自己做主；患者及家屬對本研究了解知情并自愿參與和簽署知情同意書。

1.4排除標(biāo)準(zhǔn) ①精神、神志異常不能配合者；②患有嚴(yán)重心、肝、腎、肺、腦疾病者；③患有肺癌、肝癌、腎癌、腦癌等其他惡性腫瘤者；④患有獲得性免疫缺陷綜合征、梅毒、病毒性肝炎、結(jié)核等傳染病者；⑤患有再障、白血病等血液性疾病者；⑥近3個月服用抗幽門螺桿菌及腫瘤治療患者。

1.5方法

1.5.1血液采集 所有患者在未進(jìn)行任何介入、藥物和手術(shù)治療前，于晨起空腹抽取肘靜脈血4 ml，加入含乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝劑的真空管中混勻，并立即將樣本置于4℃的冰箱中2 h，3 000 r/min離心20 min后分離血清，將血清置于EP管中并放于-80℃冰箱中保存待檢。

1.5.2外周血MDA、CK-18及CA72-4水平檢測 標(biāo)本解凍后，采用ELISA方法檢測標(biāo)本中MDA、CK-18及CA72-4水平。試劑盒由武漢優(yōu)爾生科技股份有限公司提供，并且嚴(yán)格按照說明書操作。

1.6統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0軟件，正態(tài)計量資料用組間比較采用t檢驗，兩組之間相關(guān)性采用Spearman相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組血清MDA、CK-18及CA72-4水平比較 實驗組血清MDA、CK-18及CA72-4水平明顯高于對照組(P<0.01)。見表1。

表1 兩組血清MDA、CK-18及CA72-4水平比較

2.2胃癌患者血清中MDA、CK-18、CA72-4與臨床病理參數(shù)關(guān)系比較 胃癌患者血清中MDA、CK-18及CA72-4水平隨著TNM分期的增高而升高(P<0.01)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤突破漿膜的胃癌患者血清中MDA、CA72-4水平明顯高于沒有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和腫瘤未突破漿膜層的胃癌患者(P<0.05)，MDA、CA72-4水平在是否有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及病理分化程度之間無明顯差異(P>0.05)；有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的胃癌患者血清中CK-18水平較沒有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者明顯升高(P<0.01)；但CK-18水平在是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、是否突破漿膜層、病理分化程度之間無明顯差異(P>0.05)。見表2。

表2 胃癌患者血清中MDA、CK-18、CA72-4與臨床病理參數(shù)的關(guān)系

3 討 論

隨著生物分子技術(shù)的發(fā)展，目前腫瘤標(biāo)志物的檢測已成為診斷惡性腫瘤的重要依據(jù)。但是，現(xiàn)有的腫瘤標(biāo)志物對胃癌的敏感性和特異性較差，在臨床上容易被忽略。探索新的胃癌血清學(xué)指標(biāo)和腫瘤標(biāo)志物是提高胃癌診斷率的熱點研究。

MDA是一系列自由基反應(yīng)的最終變性產(chǎn)物，自由基在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起到重要的作用，能夠引起生物膜脂質(zhì)過氧化，MDA的含量可反映脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的程度。本研究結(jié)果中實驗組血清中MDA含量明顯升高，說明胃癌患者機(jī)體內(nèi)自由基活性增強(qiáng)，使過氧化反應(yīng)增強(qiáng)，導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化物明顯增多。氧自由基作用于細(xì)胞膜，使細(xì)胞膜的通透性和流動性改變，新生離子通道，引起Ca2+大量內(nèi)流，破壞細(xì)胞內(nèi)線粒體和溶酶，引起細(xì)胞死亡。本研究結(jié)果也顯示，MDA高水平表達(dá)與胃癌的侵襲力增強(qiáng)、惡性程度增高有關(guān)。

CK-18為一種存在于上皮細(xì)胞分化較特異的蛋白，是細(xì)胞骨架的重要組成成分，當(dāng)上皮細(xì)胞出現(xiàn)惡化增殖時，激活的蛋白酶會降解細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的CK-18，并將降解的CK-18片段釋放入血液中，引起CK-18在組織液、骨髓及尿液中含量增高；當(dāng)腫瘤細(xì)胞向周圍組織浸潤和向遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移時，CK-18被大量降解釋放，導(dǎo)致血清中CK-18成倍增高。本研究結(jié)果顯示，胃癌患者血清中CK-18水平升高對于判斷胃癌的轉(zhuǎn)移具有重要的指導(dǎo)意義。

CA72-4屬黏蛋白類癌胚抗原，主要存在于腺癌組織中，對監(jiān)測胃癌的發(fā)生、發(fā)展和觀察療效具有重要價值。在多種腫瘤標(biāo)志物中，CA72-4對胃癌的特異性最高，而敏感性稍差。血清CA72-4水平與胃癌臨床分期相關(guān)，CA72-4升高可在胃癌復(fù)發(fā)的臨床診斷提前2～8個月或更早即可表現(xiàn)，是有利于早期診斷胃癌復(fù)發(fā)的重要檢測手段。MDA、CK-18及CA72-4在多種腫瘤中異常表達(dá)，臨床上缺乏對胃癌的特異性，但用作篩查早期胃癌時具有一定的參考意義，同時也能作為胃癌預(yù)后及術(shù)后復(fù)發(fā)的重要參考指標(biāo)。

1王旭林，王紅梅，牟永華，等.早期腸內(nèi)營養(yǎng)對老年胃癌病人術(shù)后血清SOD、MDA和T細(xì)胞免疫功能的影響〔J〕.腸外與腸內(nèi)營養(yǎng)，2012；19(2)：74-7.

2鞏 濤，李 勇，范立橋，等.ω-3多不飽和脂肪酸對人胃癌BGC-823細(xì)胞PGE2、SOD和MDA的影響〔J〕.中國腫瘤臨床，2006；33(19)：1102-4.

3陳炳卿，薛英本，楊艷梅，等.苯并(a)芘誘導(dǎo)小鼠前胃癌模型的建立及共軛亞油酸對其預(yù)防作用〔J〕.中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志，2002；16(5)：354-7.

4涂宏蕾，魏永長，孫海兵，等.胃癌患者血漿氧化抗氧化狀態(tài)及組織8-羥基鳥嘌呤糖苷酶mRNA表達(dá)水平〔J〕.細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志，2011；27(7)：793-4，796.

5于穎彥，計 駿，劉炳亞，等.顯微數(shù)字成像組合組織芯片技術(shù)平臺的建立及其在腫瘤標(biāo)志物研究中的應(yīng)用〔J〕.診斷學(xué)理論與實踐，2005；4(3)：188-91.

6呂 志，徐 巖，滿曉輝，等.多重置換擴(kuò)增結(jié)合激光捕獲顯微切割技術(shù)在胃癌基因組學(xué)研究中的應(yīng)用〔J〕.中華實驗外科雜志，2007；24(11)：1350-2

〔2017-02-08修回〕

(編輯 袁左鳴)

R73

A

1005-9202(2017)18-4584-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2017.18.071

安徽省自然科學(xué)基金項目(1708085MH213)

耿小平(1956-)，男，教授，博士生導(dǎo)師，主任醫(yī)師，主要從事肝膽外科研究。

史加寧(1981-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事普外科研究。