慢性丙型肝炎患者外周血I L-28B基因型多態性及其對持續病毒學應答的影響

娜 麗

慢性丙型肝炎患者外周血I L-28B基因型多態性及其對持續病毒學應答的影響

娜 麗

目的探討慢性丙型肝炎（CHC）患者白細胞介素28B（IL-28B）基因型位點多態性及其對持續病毒學應答（SVR）的影響。方法2011年3月～2016年3月收治的CHC患者285例，接受24～48周利巴林韋聯合聚乙二醇干擾素治療。采用雙色熒光TaqMan技術檢測患者外周血IL-28B rs12979860基因型位點多態性，常規檢測HCV基因型。結果在285例CHC患者中，發現HCV 1b型169例（59.29%），2a型 99例（34.74%），非1b/2a亞型 17例（5.96%）；IL-28B rs12979860基因型為CC基因型208例（72.98%），CT基因型64例（22.46%），TT基因型13例（4.56%）；CC型和CT/TT型感染患者血清HCV RNA水平無顯著相差（Z=0.260，P＞0.05）；獲得 SVR 183例（64.21%），其中 169例 HCV 1b型獲得 SVR 23例（13.61%），99例 2a亞型獲得 SVR 76例（76.77%），17例非1b/2a亞型獲得 SVR 7例（41.18%），組間比較差異有統計學意義（x2=20.415，P＜0.05）；208例 IL-28B CC 基因型獲得SVR 192例（92.31%），64例CT基因型獲得SVR 12例（18.75%），13例TT基因型中獲得SVR 4例（30.77%），組間比較差異有統計學意義（（x2=15.294，P＜0.05）。結論CHC患者獲得SVR與IL-28B rs12979860基因位點多態性密切相關，CC基因型感染者可能更容易獲得更高的SVR。

慢性丙型肝炎；聚乙二醇干擾素；白細胞介素-28B；持續病毒學應答

近年研究表明，慢性丙型肝炎（CHC）抗病毒治療CHC患者的效果受宿主IL-28B基因多態性的影響[1-3],IL-28B基因rs8099917位點和rs12979860位點與抗病毒的療效關系密切[4，5]。在不同種族，應用利巴韋林聯合干擾素治療rs129798 60 C基因CHC患者容易獲得更高的持續病毒學應答（SVR）[6，7]，歐洲裔和西班牙裔患者獲得SVR居東亞裔和非洲裔之間，而非洲裔遠低于東亞裔患者[8，9]。本文旨在探討并分析中國CHC患者IL-28B基因型位點多態性及其對SVR的影響。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2011年3月～2016年3月我科收治的CHC患者285例，男165例，女120例；平均年齡（42.1±8.7）歲。均接受24～28周利巴林韋聯合聚乙二醇干擾素-α治療。所有患者均符合《慢性丙型肝炎抗病毒治療專家共識》診斷標準[10]，納入標準:①年齡≥18歲；②至少兩次血清抗HCV和HCV RNA陽性。排除標準：①妊娠及哺乳期婦女；②酒精性肝病、自身免疫性肝病、代謝性肝病；③合并甲狀腺疾病、糖尿病及精神疾病；④惡性腫瘤、失代償期肝病及器官移植術后；⑤合并甲、乙、丁、戊型肝炎。

作者單位：010050內蒙古自治區呼倫貝爾市內蒙古醫科大學附屬醫院

1.2 療效評價根據 《丙型肝炎防治指南》（2015更新版）[11]，達到治療結束時病毒學應答（ETVR），停藥隨訪24周仍維持HCV RNA水平低于檢測下限者為SVR。

1.3 外周血IL-28B rs12979860基因型和HCV基因型檢測參照GenBank中IL-28Brs129860基因序列，應用Vector NTI 11.0軟件設計rs12979860 CT位點雙色（VIC和FAM）引物和特異性熒光探針，并構造單管等位基因雙色熒光PCR體系。探針（T）為 5’-FAM-TGGTTCACGCCT-MGB-3’，探針（C） 為 5’-VIC-GGTTCGCGCCT-MGB-3’；上游引物（IL28 F）為 5’-GGGCGGAAGGAGCAG-3’，下游引物（IL28 R）為5’-GGGCGGAAGGAGCAGTTG-3’。取外周 EDTA 抗凝血，按照基因組DNA提取試劑盒（北京凱杰公司）要求進行基因組DNA提取，PCR反應體系由反應液40μl和模板10μl構成，使用SLAN96實時熒光定量PCR儀（上海宏石公司）。常規檢測HCV基因型。

1.4 血清HCV RNA檢測采用實時熒光定量PCR法（COBAS TaqMan 48）檢測。

1.5 統計學方法應用SPSS 19.0軟件進行統計分析，采用x2檢驗或Fisher精確概率計算法檢驗定性資料，采用Wilcoxon秩和檢驗對計量資料進行分析，計量資料因呈偏態分布，故以M（IQR）表示，以P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 HCV基因型分型和IL-28B rs12979860基因型情況對285例患者進行了HCV基因分型，結果HCV 1b型169例（59.29%），2a型 99例（34.74%），非 1b/2a亞型 17例（5.96%）；IL-28B rs12979860基因型為 CC基因型 208例（72.98%），CT基因型 64例（22.46%），TT基因型 13例（4.56%）。

2.2 不同IL-28B基因型患者臨床特征比較不同IL-28B基因型患者性別、年齡、病毒載量、AST、ALT水平無統計學差異（P＞0.05，表 1）。

表1 不同IL-28B基因型患者臨床資料[n,M(IQR）]比較

2.3 不同HCV基因型感染患者抗病毒療效的比較在285例患者中，獲得SVR 183例（64.21%），其中169例 HCV 1b型感染者獲得SVR 23例（13.61%），99例2a亞型感染者獲得SVR 76例（76.77%），17例非1b/2a亞型感染者獲得SVR 7例（41.18%），組間比較差異有統計學意義（x2=20.415，P＜0.05），2a亞型感染患者獲得SVR最高。

2.4 不同IL-28B基因型患者SVR比較 在208例IL-28B CC基因型患者中，獲得SVR 192例（92.31%），64例CT基因型獲得SVR 12例（18.75%），13例TT基因型患者獲得SVR 4例（30.77%），組間比較差異有統計學意義（x2=15.294，P＜0.05），CC基因型患者獲得SVR最高。

3 討論

聚乙二醇干擾素被作為標準的抗病毒治療應用于CHC患者[12-15]。為探討IL-28B基因型位點多態性對SVR的影響，我們在接受24～48周利巴林韋聯合聚乙二醇干擾素治療的285例CHC患者，采用雙色熒光TaqMan技術對該基因型進行了研究。

本研究發現，CT基因型與TT基因型感染患者性別、年齡、病毒載量、AST、ALT水平比較無統計學差異（P＞0.05）。HCV 1b型獲得SVR為13.61%，2a亞型為76.77%，非1b/2a亞型為41.18%。IL-28B rs12979860基因CC基因型感染患者獲得SVR最高，表明對CHC患者抗病毒治療的效果受IL-28B rs12979860基因型的影響，與既往報道相似[16-18]。

由于本研究病例數量少于既往類似報道，所得數據與之亦有所偏差。對于IL-28B rs12979860基因型位點多態性測定，其特點在于結果可信，操作相對簡便。

CHC患者接受利巴林韋聯合聚乙二醇干擾素治療，其持續病毒學應答與IL-28B rs12979860多態性位點基因型密切相關。由于TT基因型和CT基因型分布頻率顯著低于CC基因型，而CC基因型常見，也更容易獲得SVR。因此，在決定抗病毒治療前檢測該指標可以預估療效。

[1]霍雪平，謝琴秀，江曉平，等.486例慢性乙型肝炎患者肝組織病理學變化與肝功能指標的相關性研究.實用肝臟病雜志，2015，18（4）:360-363.

[2]熊陶，胡愛榮，蔣素文，等.丙型病毒性肝炎病毒基因型與病毒載量及疾病進展的相關性分析.疾病監測，2015，30（1）:19-22.

[3]謝俊強，郭小燕，李新華，等.白細胞介素-28B基因多態性與丙型肝炎病毒感染自然清除的相關性.中華傳染病雜志，2012，30（9）:538-541.

[4]聶紅明，陳建杰，汪蓉，等.中國漢族人群慢性丙型肝炎病毒基因型分布規律研究.中華流行病學雜志，2012，33（5）:501-504.

[5]趙璐，馮悅，夏雪山，等.HCV基因型的差異性流行與進化.遺傳，2012，34（6）:666-672.

[6]Parda N，Stpień M，Zakrzewska K，et al.What affects response rates in primary healthcare-based programmes An analysis of individual and unit-related factorsassociated with increased odds of non-response based on HCV screening in the general population in Poland.BMJ Open，2016，6（12）:e013359.

[7]王劍，楊瑞鋒，魏來，等.丙型肝炎病毒基因型及其宿主基因型的檢測及臨床意義.中華檢驗醫學雜志，2012，35（2）:97-100.

[8]Oudshoorn D，van der Hoeven B，Limpens RW，et al.Antiviral innate immune response interferes with the formation of replication-associated membrane structures induced by a positive-strand RNA virus.MBJO，2016，7（6）:213-216.

[9]Li X，Xu H，Ding Z，et al.Association between ABO blood group and HCV-related hepatocellular carcinoma risk in China.Medicine（Baltimore），2016，95（49）:e5587.

[10]慢性丙型肝炎抗病毒治療專家委員會.慢性丙型肝炎抗病毒治療專家共識.中華實驗和臨床感染病雜志（電子版），2009，3（3）:343-352.

[11]中華醫學會肝病學分會和感染病學分會.《丙型肝炎防治指南》2015 年更新版. 實用肝臟病雜志，2016，19（4）：ⅠⅩ-ⅩⅩⅤⅠ.

[12]苗雅嬌，趙守松.40例慢性乙型肝炎輕度患者肝組織病理學變化研究. 實用肝臟病雜志，2012，15（1）:7-9.

[13]Liu H，Zhang T，Yan Y.Sofosbuvirand ribavirin in acute hepatitis C-infected patient with decompensated cirrhosis.Medicine（Baltimore），2016，95（49）:e5555.

[14]楊建軍，李朝霞，田淑菊，等.慢性丙型肝炎患者自身抗體動態變化與HCV-RNA基因型關系研究.國際檢驗醫學雜志，2012，33（24）:2960-2962.

[15]Johnston SL，Hollingsworth R.Immunoglobulin therapy.Clin Med（Lond），2016，16（6）:576-579.

[16]蘇迎盈，劉慧鑫，汪寧，等.中國丙型肝炎病毒基因型分布.中華流行病學雜志，2013，34（1）:80-84.

[17]劉立明，王海濱，陳霖，等.白介素28B基因多態性與慢性丙型肝炎患者抗病毒療效的相關性研究.中華檢驗醫學雜志，2015，21（3）:155-158.

[18]胡燕梅，孫燕燕，丁榮華，等.慢性丙型肝炎患者病毒基因型與 IL-28B 基因型分布. 實用肝臟病雜志，2013，16（6）:513-516.

（收稿：2016-12-22）

（本文編輯：陳宗炳）

IL-28B genotype polymorphism and its impact on sustained viral response in patients with chronic hepatitis C receiving standardized antiviral therapy

Na Li.Affiliated Hospital，Inner Mongolia Medical University，Hulunbeier 010050，Inner Mongolia Autonomous Region，China

Hepatitis C；Interferon-α；Interleukin-28B；Sustained viral response

10.3969/j.issn.1672-5069.2017.05.024

娜 麗，女，40歲，大學本科，主治醫師。E-mail:luguangybj85@126.com