自體骨髓干細(xì)胞移植治療肝衰竭患者臨床療效及安全性的隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)研究*

郭 銳，鄧 宇,郭玲

自體骨髓干細(xì)胞移植治療肝衰竭患者臨床療效及安全性的隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)研究*

郭 銳，鄧 宇,郭玲

目的評(píng)價(jià)自體骨髓干細(xì)胞移植治療肝衰竭患者的療效和安全性。方法采用隨機(jī)平行對(duì)照試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案，將72例肝衰竭受試者隨機(jī)分為試驗(yàn)組和對(duì)照組，每組36例。給予對(duì)照組受試者綜合治療，試驗(yàn)組受試者在此基礎(chǔ)上接受自體骨髓干細(xì)胞移植治療。給予患者集落細(xì)胞刺激因子 4μg·kg-1皮下注射，行碘過(guò)敏試驗(yàn)，以右側(cè)髂后上棘為穿刺點(diǎn)，利多卡因逐層麻醉后，抽取骨髓血50～100 ml，加入肝素4000 U抗凝。送我院干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室，采用負(fù)篩選法進(jìn)行骨髓干細(xì)胞體外分離及純化。在DSA監(jiān)視下,將分離的骨髓干細(xì)胞（5×107～108）通過(guò)導(dǎo)管經(jīng)肝動(dòng)脈緩慢注入肝內(nèi)。常規(guī)加測(cè)肝功能指標(biāo)，記錄不良反應(yīng)發(fā)生情況和隨訪患者短期預(yù)后。結(jié)果在治療4周末，試驗(yàn)組受試者血清TBIL、ALT和ALB分別為（135.53±31.66）μmol/L、（71.87±21.35）U/L和（36.42±6.17）g/L，而對(duì)照組分別為（182.84±30.57） μmol/L、（92.57±19.55） U/L 和（30.58±5.31）g/L 兩組差異顯著（P＜0.01）；在治療4周末，試驗(yàn)組受試者INR為（1.63±0.42），顯著低于對(duì)照組的（2.01±0.58）（P＜0.01）；在接下來(lái)的隨訪中，試驗(yàn)組受試者死亡2例，1例死于消化道出血，1例死于肺部感染，對(duì)照組受試者死亡3例，且均死于消化道出血。結(jié)論自體骨髓干細(xì)胞移植治療肝衰竭患者療效顯著，術(shù)后并發(fā)癥較少。

肝衰竭；自體骨髓干細(xì)胞移植；療效；安全性

肝衰竭是由多種致病因素導(dǎo)致肝細(xì)胞的合成、代謝、解毒等功能嚴(yán)重障礙，其臨床表現(xiàn)為黃疸、腹腔積液、凝血功能障礙和肝性腦病等一系列臨床綜合征[1，2]。在我國(guó)，該病最常見的病因?yàn)楦窝撞《靖腥尽ＥR床治療多以藥物、人工肝支持療法以及肝移植等[3]。研究發(fā)現(xiàn)，自體骨髓干細(xì)胞移植可以明顯地改善肝衰竭患者的臨床癥狀，提高生存率[4-10]。但到目前為止，仍然缺乏設(shè)計(jì)嚴(yán)謹(jǐn)、高質(zhì)量的隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)。本研究采用隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案對(duì)自體骨髓干細(xì)胞移植治療肝衰竭患者的臨床療效和安全性進(jìn)行了進(jìn)一步評(píng)價(jià)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2011年1月～2016年2月期間延安市人民醫(yī)院收治的肝衰竭患者72例，男性49例，女性23例，年齡33～70歲，平均年齡（44.58±13.62）歲。符合《肝衰竭診治指南》的診斷標(biāo)準(zhǔn)[11]。乙型肝炎引起的肝功能衰竭者61例，酒精性肝硬化引起的肝功能衰竭者11例。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并上消化道出血、肝腎綜合征、合并肝癌及其他惡性腫瘤、合并HIV感染、合并心、腎等重要臟器嚴(yán)重疾病、孕婦及哺乳期婦女、有藥物過(guò)敏史和過(guò)敏體質(zhì)者。剔除標(biāo)準(zhǔn)：患者依從性差、在治療過(guò)程中自行退出者、或因發(fā)生嚴(yán)重不良反應(yīng)而終止試驗(yàn)者。受試者簽署知情同意書。本臨床試驗(yàn)獲得延安市人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

作者單位：716000 陜西省延安市人民醫(yī)院消化內(nèi)科

1.2 隨機(jī)、隱藏和盲法 由統(tǒng)計(jì)人員應(yīng)用SAS軟件產(chǎn)生隨機(jī)數(shù)字，然后將其置于密閉、不透光的信封中。將隨機(jī)試驗(yàn)資料寄到研究中心，研究中心根據(jù)受試者入組時(shí)間，隨機(jī)將患者分為試驗(yàn)組36例和對(duì)照組36例。兩組受試者病程、年齡、性別、肝衰竭原發(fā)病等一般資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究對(duì)統(tǒng)計(jì)人員實(shí)施盲法。

1.3 治療方法 給予對(duì)照組受試者綜合治療和給予乙型肝炎患者恩替卡韋（中美上海施貴寶制藥有限公司，批號(hào)：0808665）500 mg口服，1次/d；試驗(yàn)組受試者在對(duì)照組治療基礎(chǔ)上再給予自體骨髓干細(xì)胞移植治療[12-14]。術(shù)前準(zhǔn)備：給予患者集落細(xì)胞刺激因子 4 μg·kg-1皮下注射，1次/d，連續(xù)2 d。行碘過(guò)敏試驗(yàn)，患者進(jìn)入隔離病房。取患者右側(cè)髂后上棘為穿刺點(diǎn)，局部常規(guī)消毒后，鋪無(wú)菌洞巾，給予利多卡因逐層麻醉后，以18號(hào)骨髓穿刺針穿刺，抽取骨髓血50～100 ml，加入肝素4000 U抗凝。送我院干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室，采用負(fù)篩選法進(jìn)行骨髓干細(xì)胞體外分離及純化。在DSA監(jiān)視下,將分離的骨髓干細(xì)胞（5×107～108）通過(guò)導(dǎo)管經(jīng)肝動(dòng)脈緩慢注入肝內(nèi)。術(shù)畢，拔管。穿刺點(diǎn)按壓后加壓包扎。返回病房，穿刺側(cè)下肢制動(dòng)6 h。

1.4 檢測(cè) 使用日本OlympusAU640型全自動(dòng)生化儀和上海科華生物工程股份有限公司提供的試劑檢測(cè)血生化指標(biāo)，常規(guī)檢測(cè)凝血功能指標(biāo)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行處理。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用意向性（intent-to-treat，ITT）分析。計(jì)量資料以（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料的比較采用x2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組受試者治療前后肝功能指標(biāo)變化的比較 在治療前，兩組受試者肝功能指標(biāo)和INR無(wú)顯著性相差（P＞0.05）；在治療4 w末，試驗(yàn)組肝功能指標(biāo)顯著改善，明顯優(yōu)于對(duì)照組（P＜0.01，表 1）。

表1 兩組治療前后肝功能指標(biāo)(±s)變化的比較

表1 兩組治療前后肝功能指標(biāo)(±s)變化的比較

與對(duì)照組比，①P＜0.01

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2.2 兩組受試者不良反應(yīng)發(fā)生情況比較 見表2。

表2 兩組不良反應(yīng)(%)比較

2.3 兩組受試者脫落情況比較 在接下來(lái)的隨訪中，試驗(yàn)組受試者死亡2例，1例死于消化道出血，1例死于肺部感染；對(duì)照組受試者死亡3例，且均死于消化道出血。兩組受試者脫落情況比較，差異無(wú)顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

3 討論

肝衰竭是指肝細(xì)胞受到廣泛、嚴(yán)重?fù)p害后，細(xì)胞壞死，導(dǎo)致機(jī)體代謝功能發(fā)生嚴(yán)重紊亂而產(chǎn)生的臨床危重綜合征，并且預(yù)后多不良[15]。目前，臨床上尚無(wú)治療本病的特效療法。常規(guī)治療多以保肝、抗病毒、抗肝纖維化等藥物治療為主，但這些療法的療效還不甚滿意[2-5]。

本研究采用自體骨髓干細(xì)胞移植方法,直接將骨髓干細(xì)胞移植到患者肝臟內(nèi)，使移植后的骨髓干細(xì)胞在肝臟的內(nèi)環(huán)境下分化為肝樣細(xì)胞，并進(jìn)一步代替損傷的肝細(xì)胞，從而可以促進(jìn)細(xì)胞再生和肝臟功能修復(fù)。另外，本研究選用患者自體骨髓干細(xì)胞移植，也可以避免免疫排斥反應(yīng),并且不需要考慮組織相容性抗原的配型問(wèn)題。

本研究結(jié)果顯示，與治療前比較，治療后試驗(yàn)組受試者血清TBIL、ALT、INR均顯著改善，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。與對(duì)照組比較，試驗(yàn)組血清 TBIL、ALT、ALB、INR 改善更顯著，兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。由此可見，自體骨髓干細(xì)胞移植可以改善肝衰竭受試者的肝功能，并且該療法的并發(fā)癥少，具有良好的安全性。

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（收稿：2016-11-28）

（本文編輯：陳宗炳）

A randomized controlled trial of clinical efficacy and safety of autologous bone marrow stem cell transportation for treating patients with liver failure

Guo Rui，Deng Yu.Department of Gastroenterology，People's Hospital，Yanan 716000，Shaanxi Province，China

Liver failure；Autologous bone marrow stem cell transportation；Efficacy；Safety

10.3969/j.issn.1672-5069.2017.05.030

陜西省自然科學(xué)基金項(xiàng)目（編號(hào)：2012CM6108）

郭銳，男，35歲，大學(xué)本科，主治醫(yī)師。主要從事肝病防治研究。E-mail:3429365175@qq.com

郭玲，E-mail:3133635472@qq.com