試論南五味子有效部位前處理及提取工藝

單鈺毓 李云濤 任瑞濤 王麗娜

摘要：五味子是一種使用較頻繁的中藥，它有南北之分，南五味子色紅，北五味子色黑，目前，南五味子主要指華中五味子的干燥成熟果實。南五味子具有收斂固澀、益氣生津、補腎寧心的作用，用于遺尿尿頻、久瀉不止、自汗、夢遺滑精、津傷口渴、心悸失眠、支氣管哮喘、久嗽虛喘等癥。本文主要對南五味子有效部位前處理及提取工藝進行研究，通過具體的實驗來進行工藝優選，從而實現為南五味子的開發提供科學的、可靠的依據。

關鍵詞：南五味子；有效部位；前處理；提取工藝

引言：

南五味子的各個部位含有六中木脂素類成分，這些成分在藥理上主要表現為益智安神的作用，筆者通過對多方面的文獻進行學習與研究發現對南五味子有效部位前處理工藝的說明較少，很多都是對提取方法進行的介紹與說明，因此筆者結合文獻以及資料，通過實驗來對南五味子有效部位前處理及醇提取工藝進行研究和探討，并對工藝進行優化，目的是為其的工業成產及復方藥物的研制提供實驗依據。

一、主要工藝及實驗材料

1.實驗的材料以及實驗儀器

南五味子（經中醫藥大學中藥鑒定研究所專業鑒定的華中五味子干燥成熟果實）；五味子酯甲、甲素對照表，主要為含量的檢測用，乙腈、甲醇、經過蒸餾的高純水，另外還包括分析純試劑。在該提取優化實驗中所用到的實驗儀器為：選用日本島津LC-10AVP紫外檢測器，Rheodyne7725i進樣閥以及AX205電子分析天平。

2.實驗的主要工藝

（1）色譜條件

色譜柱：YMCODS-AC18（250mm×4.6mm，5μm）；流動相：乙腈一水（36：64）；流速：1.Oml/min，檢測波長：254nm；進樣量：供試液、對照液均勻為20L；柱溫：3O℃。

（2）對照品溶液配制

要精密的對五味子酯甲對照品進行質量的稱取，具體的稱取量為8.25mg，同時加如甲醇進行溶解操作，并且定容于25mL量瓶中，即得五味子醋甲對照品溶液0.33mg/mL；再分別吸取上述對照品溶液0.5、1.0、2.0、4.0mL于5mL容量瓶中加甲醇定容至刻度，配制濃度分別為0.033、0.066、0.132、0.264mg/mL的標準品溶液。

（3）供試品溶液的制備

精密量取各五昧子提取液適量，用80%乙醇稀釋至含生藥0.01g/mL，搖勻，0.45μm微孔濾膜濾過即得。

二、實驗結果分析及說明

1.標準曲線的繪制

精密吸取“1.2.2”項下各濃度對照品溶液20μL注入高效液相色譜儀測定峰面積，以五味子酯甲的進樣量（x）為橫坐標，峰面積的積分值（Y）為縱坐標作圖得到標準曲線。回歸方程為：Y=2939685X+13232（R=0.99994）。

結果表明，五味子酯甲在0.66～6.6μg范圍內呈良好的線性關系。

2.工藝條件考察

（1）水蒸汽蒸餾法除揮發油的工藝條件優選

對影響揮發油提取工藝的主要因素：提取時間A、溶劑量B和油水分離器換水次數C按正交表，以揮發油的提取率指標，并考察五味子酯甲的損失率，進行正交實驗（每組300g藥材粗粉），優選最佳的水蒸汽蒸餾法除揮發油工藝條件。

結果及分析：正交各組五味子酯甲的損失率均1%～2%，其損失可忽略。經方差分析，影響提取的因素大小順序為：A>B>C，其中A（提取時問）影響最大，具有高顯著性，B（溶劑量）的影響也具有顯著性。從正交結果可看出，提取時間4h的效果較好；溶劑量、換水次數影響稍小，為生產成本考慮，選擇8倍量水提取，每2h換1次水。優選的最佳條件與正交實驗第7組的條件相同，提取率為95.95%。

（2）水煎煮除去水溶性雜質工藝條件的選擇

對影響水煎煮提取工藝的兩個主要因素加水量和煎煮時間進行了考察，指標為水煎液固形物量，并考察五昧子酯甲的損失率。將1320g藥材粗粉，加8倍量水，蒸餾4h，水煎液棄去，藥渣分為6份，其中3份分別加水6、8、10倍，煎煮30min；另3份分別加水6倍，煎煮20、30、40min，取濾出的水煎液進行考察。

結果及分析：考察加水量實驗各組水煎液固形物的量為6倍水固形物為16.22g，8倍水固形物為17.06g，12倍水固形物為17.38g，因此這一數值基本相近，而酯甲的損失率分別為6倍水-1.39%、8倍水-2.41、12倍水-2.79。因此基于此結果，發現選擇6倍水進行煎煮可以在收到固形物量基本相同的情況下，實現酯甲的最低損耗，因此選擇6倍水最為適宜；在對煎煮時間進行研究，通過實驗我們可以知道，在水煎的時間為20min時，固形物為16.34g，在水煎的時間為30min時，固形物的質量有微量的增加為16.57g，在水煎的時間達到40分鐘時固形物的質量仍然沒有太多的增加為16.97g。而在三個時間中，酯甲的損失率相差無幾，為20min-0.98%、30min-0.97%、40min-1.29%。基于此我們發現在20min與30min的時間進行煎煮。酯甲的損失幅度率小，達到40min的水煎時間后，酯甲的損失率同比增加較大，因此最終我們確定水煎的時間為20min，不僅可以節省時間，提升提取效率，還可以減少酯甲的損耗。綜上優選的最佳條件為藥渣加6倍藥材量的水煎煮20min。

（3）乙醇提取工藝條件的選擇

藥材經過前兩步除雜工藝，已除去高極性和揮發性雜質，需要提取的有效部位為中小極性成分，故選擇乙醇進行提取。對影響醇回流工藝的主要因素：醇濃度A、醇用量B、提取時間C進行正交試驗（每組250g藥材粗粉，加8倍量水蒸餾4h，殘渣加6倍量水煎20min，殘渣晾干再進行醇提正交實驗）。

結果及分析：影響提取的因素大小順序為：B>C>A。結合因素水平確定的最佳工藝組合為l8倍量80%乙醇分2次提取，每次2h。

結語：

最終經過實驗我們得到優選后的工藝，我們發現除雜醇提取工藝在提取物得率百分比上明顯要小于直接醇提取工藝，而在五味子酯甲含量上去是直接醇提取的4.44倍。因此除雜醇提取具有成分損失少，純度高的特點，并且能為有效部位的進一步純化與開發提供基礎。

參考文獻：

[1]李振，孟憲緯，管延珍，等.南、北五味子提取物的抑菌及抗氧化作用研究[J].中國調味品，2017，42（1）：28-30；

[2]陳靚，楊燕云，單會嬌，等.五味子和南五味子藥材及其各部位的6種木脂素含量測定[C]//世界中醫藥學會聯合會中藥鑒定專業委員會學術年會.2015.