粉塵螨滴劑舌下含服治療成人支氣管哮喘的效果及其機制

鄧潔，湯渝玲，祝戎飛

(1長沙市第一醫院，長沙410005；2華中科技大學附屬同濟醫院)

粉塵螨滴劑舌下含服治療成人支氣管哮喘的效果及其機制

鄧潔1，湯渝玲1，祝戎飛2

(1長沙市第一醫院，長沙410005；2華中科技大學附屬同濟醫院)

目的觀察粉塵螨滴劑舌下含服治療成人支氣管哮喘的療效，并探討其相關機制。方法塵螨致敏的成人支氣管哮喘患者80例，隨機分為觀察組和對照組各40例。觀察組舌下含服粉塵螨滴劑，前3周為遞增量期，3周后每天1次，每次3滴，共用藥2年。對照組給予常規的吸氧、解痙、平喘、抗感染等治療。分別于治療前后對兩組進行哮喘癥狀評分；采用哮喘控制測試(ACT)評估哮喘控制程度；使用Master Screen肺功能儀進行肺功能檢測，測定指標包括第一秒用力呼氣量(FEV1)、FEV1占預計值百分比(FEV1%預計值)、用力肺活量(FVC)、FVC占預計值的百分比(FVC%預計值)；采集外周血，檢測CD4+CD25Foxp3+調節性T細胞、Th3細胞及IL-10、TGF-β。結果觀察組治療后哮喘癥狀評分及ACT評分低于治療前和對照組治療后(P均<0.05)。兩組治療后FEV1、FEV1%預計值、FVC、FVC%預計值均較治療前有所提高，且觀察組治療后FEV1%預計值、FVC、FVC%預計值高于對照組(P<0.05)。觀察組與對照組治療后外周血CD4+CD25Foxp3+調節性T細胞、Th3細胞比例及IL-10水平均升高，TGF-β水平均降低；觀察組治療后外周血Th3細胞水平、IL-10水平高于對照組，TGF-β水平低于對照組(P均<0.05)。結論粉塵螨滴劑舌下含服治療成年支氣管哮喘可有效控制哮喘癥狀、改善肺功能，其機制可能與活化CD4+CD25Foxp3+調節性T細胞、Th3細胞及調節IL-10、TGF-β水平有關。

支氣管哮喘；特異性免疫治療；粉塵螨滴劑；調節性T細胞；輔助性T細胞；白細胞介素10；轉化生長因子β

自二十世紀九十年代以來支氣管哮喘的發病率和病死率加速增長[1]。支氣管哮喘是由免疫、遺傳、環境等單一因素或多因素相互作用引起的呼吸道慢性炎癥性和變態反應性疾病[2]，治療方法包括糖皮質激素、β2受體激動劑、茶堿、抗膽堿類、他汀類、白三烯、心理療法、中藥治療、特異性免疫治療(SIT)等[3]。SIT是目前惟一的針對支氣管哮喘病因的治療方式，主要包括兩種治療手段，一種是皮下注射特異性免疫治療，另一種是舌下SIT(SLIT)。SLIT具有方便、安全、易于管理等優點，是近年來的首選方案。目前關于SIT的作用機制已有一些研究，但主要集中在對兒童患者的有效性、安全性及嚴重不良事件等相關問題[4]，關于SIT對成人患者的臨床效果及機制的研究較少。粉塵螨滴劑主要運用于粉塵螨過敏引起的過敏性鼻炎、過敏性哮喘的脫敏治療。本研究觀察了粉塵螨滴劑舌下含服治療成人支氣管哮喘的療效，并探討其相關機制。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集同濟醫院過敏反應科2014年3月～2015年1月就診的大于18周歲的支氣管哮喘患者。納入標準：①戶塵螨粉塵螨致敏者，均進行皮膚點刺試驗(SPT)結果為++及以上；②患者處于無癥狀期；③第一秒用力呼氣量(FEV1)在預計值的70%以上；④接受并簽署知情同意書者且能配合治療和管理者。排除依從性較差者，呼吸道感染伴或不伴炎癥的患者，哮喘未控制或不可逆者，合并嚴重免疫功能低下的患者，嚴重精神疾病不能配合治療和管理者，使用N型膽堿受體阻斷劑者，合并其他嚴重心腦血管等系統疾病者。共納入患者80例，男50例、女30例，年齡為(29.0±8.5)歲。本研究通過了醫院倫理委員會批準，患者對研究方案知情同意。將80例患者隨機分為觀察組和對照組各40例。兩組一般資料具有可比性。

1.2 粉塵螨滴劑使用方法 觀察組采用SIT，即舌下含服粉塵螨滴劑(浙江我武生物科技股份有限公司)，每日早飯前滴于舌下含服，時間1～3 min。前3周為遞增量期，第1周使用粉塵螨滴劑1號，第1天1滴，依次遞增，第7天7滴；第2周給予粉塵螨滴劑2號，第1天1滴，依次遞增，第7天7滴；第3周給予粉塵螨滴劑3號，第1天1滴，依次遞增，第7天7滴。3周后維持劑量，給予粉塵螨滴劑4號，每天1次，每次3滴。共用藥2年。對照組給予常規的吸氧、解痙、平喘、抗感染等治療。

1.3 哮喘癥狀評分及哮喘控制程度評分 分別于治療前及治療2年后進行哮喘癥狀評分，分為白天癥狀評分及夜間癥狀評分。白天癥狀評分標準：無任何癥狀如咳嗽、喘息、胸悶、呼吸困難等計0分；有輕微上訴癥狀計1分；有中度上述癥狀或出現頻率較高計2分；癥狀較重，或影響日常生活計3分。夜間癥狀評分標準：無癥狀計0分；睡眠時憋醒次數為1次計1分；憋醒次數2次及以上計2分；多次憋醒、嚴重影響睡眠計3分。哮喘癥狀控制程度評估采用哮喘控制測試(ACT)評分：根據4周內哮喘妨礙日常生活時間的多少評分，沒有計0分、極少時候計1分、有時計2分、多數時間計3分、所有時間計4分；根據4周內呼吸困難的次數評分，沒有計0分、1～2次計1分、1次/周計2分、2～3次/周計3分、4次/周及以上計4分；根據4周內使用急救藥物的次數評分，沒有計0分、<1次/周計1分、2～3次/周計2分、1～2次/d計3分、3次/d及以上計4分；根據4周內哮喘控制情況評分，完全控制計0分、很好控制計1分、控制可計2分、控制較差計3分、未控制計4分。

1.4 肺功能檢測 兩組治療前后使用Master Screen肺功能儀進行肺功能檢測，測定指標包括第一秒用力呼氣量(FEV1)、FEV1占預計值百分比(FEV1%預計值)、用力肺活量(FVC)、FVC占預計值的百分比(FVC%預計值)等。

1.5 CD4+CD25Foxp3+調節性T細胞、Th3細胞水平及IL-10、TGF-β檢測 兩組在治療前及治療后采集外周靜脈血，采用流式細胞儀檢測外周靜脈血中的CD4+CD25Foxp3+調節性T細胞、Th3細胞，采用雙抗夾心ELISA法檢測IL-10、TGF-β[5]。

1.6 統計學方法 采用SPSS17.0軟件進行統計處理。符合正態分布的計量資料比較采用兩獨立樣本t檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組治療前后哮喘癥狀評分及ACT評分比較 觀察組治療前后哮喘癥狀評分分別為(1.80±0.63)、(0.22±0.51)分，對照組分別為(1.79±0.48)、(1.21±0.63)分。觀察組治療前后ACT評分分別為(1.96±0.65)、(0.83±0.59)分，對照組分別為(1.86±0.73)、(1.67±0.57)分。觀察組治療后哮喘癥狀評分及ACT評分低于治療前和對照組治療后(P均<0.05)。

2.2 兩組治療前后肺功能指標比較 兩組治療后FEV1、FEV1%預計值、FVC、FVC%預計值均較治療前有所提高，且觀察組治療后FEV1%預計值、FVC、FVC%預計值高于對照組(P<0.05)。詳見表1。

表1 兩組治療前后肺功能指標比較

注：與同組治療前相比，*P<0.05；與對照組治療后相比，#P<0.05。

2.3 兩組治療前后外周血CD4+CD25Foxp3+調節性T細胞、Th3細胞比例及IL-10、TGF-β水平比較 觀察組治療后外周血CD4+CD25Foxp3+調節性T細胞、Th3細胞比例及IL-10水平升高，TGF-β水平降低(P均<0.05)；對照組治療后外周血CD4+CD25Foxp3+調節性T細胞水平升高(P<0.05)。治療后觀察組較對照組外周血Th3細胞比例、IL-10水平升高(P<0.05)，TGF-β水平降低(P均<0.05)。見表2。

表2 兩組治療前后外周血CD4+CD25Foxp3+調節性T細胞、Th3細胞比例及IL-10、TGF-β水平比較

注：與同組治療前相比，*P<0.05；與對照組治療后相比，#P<0.05。

3 討論

上世紀已提出應用特異性免疫的治療手段治療支氣管哮喘，但由于其作用機制的復雜性及效果的有限性，大多數研究處于臨床試驗的階段。SIT主要是通過增加患者過敏原的劑量，進而來誘導患者產生免疫耐受，使患者的發病次數及發病嚴重程度減輕[6]。對于SIT目前的研究主要集中于兒童[7～9]。Djuric-Filipovic等[9]研究結果表明SIT可緩解兒童哮喘患者的癥狀并改善肺功能。但目前尚缺乏對成年支氣管哮喘免疫治療的相關研究。

粉塵螨是具有強的致敏性過敏原，其在自然界中廣泛存在，過敏體質者吸入微量過敏原即可引起哮喘或其他過敏性疾病。粉塵螨滴劑可使對塵螨過敏患者產生特異性的阻斷抗體和免疫耐受，減輕患者對塵螨產生的過敏反應，從而達到治療目的，該滴劑是針對病因進行治療。本研究對支氣管哮喘患者采用SIT，觀察治療效果并探討其具體機制，結果顯示，成年支氣管哮喘患者采用SIT后哮喘癥狀得到有效控制，哮喘控制程度明顯提高，肺功能明顯改善，效果優于采用常規治療手段的對照組，表明SIT對成人支氣管哮喘有效，且效果優于常規療法。

調節性T細胞在哮喘的免疫應答中起到關鍵作用，可抑制免疫應答和炎癥反應，促進免疫耐受。Choi等[10]研究發現調節性T細胞減少后小鼠氣道高反應的發生率明顯增加。Maazi等[11]研究表明SIT可誘導調節性T細胞的產生。調節性T細胞可分泌IL-10及TGF-β，此外可減少特異性變應原分泌的IgE，使嗜酸性粒細胞凋亡增加，還可調節Th1/Th2平衡，使機體對抗原不產生反應或低過敏狀態，有助于減少支氣管哮喘的復發率。IL-10在哮喘的免疫應答過程中起著重要作用[12]，TNF、IL-4、IL-5等細胞因子被IL-10抑制后可減少特異性變應原IgE的分泌，通過這種機制來減輕哮喘患者的炎癥反應[13]。

關于Th3細胞在哮喘發病中的作用目前報道較少。研究者[14,15]發現Th3細胞可起到抑制免疫效應細胞增殖、分化等功能，抑制過敏反應。TGF-β由調節性T細胞及Th3細胞等產生[18]，可調節細胞生長、分化，被認為具有促進哮喘患者肺纖維化的作用及抗炎作用，高水平TGF-β可代償性抑制炎癥細胞的活化和氣道高反應，以此來發揮抵抗哮喘的作用。李敏等[17]研究發現哮喘緩解期較急性發作期TGF-β水平低。Fukushima等[18]也認為TGF-β有益于氣道平滑肌的重塑。

本研究結果顯示，經粉塵螨滴劑治療后CD4+CD25Foxp3+調節性T細胞、Th3細胞比例及IL-10水平升高，TGF-β水平降低。上述結果提示粉塵螨滴劑治療支氣管哮喘的機制可能與活化調節性T細胞、Th3細胞功能及調節IL-10、TGF-β水平有關。但是對于SIT在不同年齡階段患者中的使用效果及差異性目前尚無大數據的臨床研究，本研究結論仍需進一步證實。

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