宮頸癌組織miR- 218、Stat3表達變化及其臨床意義

崔英

(青海紅十字醫院，西寧810000)

宮頸癌組織miR- 218、Stat3表達變化及其臨床意義

崔英

(青海紅十字醫院，西寧810000)

目的探討宮頸癌組織微小RNA- 218(miR- 218)和信號轉導及轉錄活化因子3(Stat3)表達變化及其臨床意義。方法選擇宮頸癌患者96例(觀察組)，疑似宮頸癌但組織病理檢查宮頸正常者58例(對照組)，取兩組宮頸組織，采用RT- PCR法檢測miR- 218、Stat3 mRNA表達。分析宮頸癌組織miR- 218、Stat3 mRNA表達與患者臨床病理參數的關系。結果觀察組、對照組miR- 218 mRNA相對表達量分別為0.57±0.12、1.09±0.51，Stat3 mRNA相對表達量分別為0.56±0.15、0.21±0.06，兩組比較P均<0.05。宮頸癌組織miR- 218 mRNA表達與Stat3 mRNA表達呈負相關關系(r=-0.719，P<0.05)。宮頸癌組織miR- 218 mRNA表達與臨床分期、組織分化程度、淋巴結轉移有關(P均<0.05)，與患者年齡、病理類型、腫瘤直徑、絕經狀況及宮旁浸潤無關(P均>0.05)。宮頸癌組織Stat3 mRNA表達與組織分化程度、淋巴結轉移有關(P均<0.05)，與患者年齡、病理類型、臨床分期、腫瘤直徑、絕經狀況及宮旁浸潤無關(P均>0.05)。結論宮頸癌組織miR- 218 mRNA表達下調，Stat3 mRNA表達上調；二者表達變化與宮頸癌的發生、發展有關。

宮頸癌；微小RNA- 218；信號轉導及轉錄活化因子3；分化程度；淋巴結轉移

宮頸癌是婦科常見的惡性腫瘤之一，近年來其發病率逐漸升高且有年輕化趨勢[1,2]。宮頸癌的病程一般經歷宮頸增生、原位癌、早期浸潤癌和宮頸癌，超過50%的患者確診時已進展為早期浸潤癌，一旦發生浸潤和轉移，患者的生存率大大降低[3,4]。有研究發現，微小RNA- 218(miR- 218)在多種腫瘤組織中表達下降[5,6]，但其在宮頸癌組織中的表達文獻報道并不一致。信號轉導及轉錄活化因子3(Stat3)在多種腫瘤組織中表達升高，主要參與腫瘤細胞的增殖、分化和凋亡[7]，但Stat3在宮頸癌組織中的表達變化及其與患者臨床病理參數的關系仍不明確。關于宮頸癌組織miR- 218、Stat3表達關系的研究甚少。2015年2月～2017年1月，本研究觀察了宮頸癌組織miR- 218、Stat3 mRNA表達變化，并探討其與患者臨床病理參數的關系，旨在為宮頸癌的診治提供思路。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇同期青海紅十字醫院收治的宮頸癌患者96例(觀察組)，均經術后組織病理檢查明確診斷。排除合并其他類型腫瘤者，合并心、肝、腎等重要臟器病變者，術前接受任何抗腫瘤治療者。患者年齡40～68(54.06±6.12)歲，病程1～3(2.02±0.36)年；絕經42例，未絕經54例；病理類型：鱗癌70例，腺癌26例；臨床分期[8]：Ⅰ期32例，Ⅱ期40例，Ⅲ期24例；組織分化程度：低分化50例，中高分化46例；浸潤深度≤1/2者56例，>1/2者40例；有淋巴結轉移49例，無淋巴結轉移47例；腫瘤直徑≥4 cm者36例，<4 cm者60例；有宮旁浸潤37例，無宮旁浸潤59例。另選同期疑似宮頸癌，經組織病理檢查宮頸正常者58例(對照組)，年齡40～65(53.87±5.26)歲。兩組年齡具有可比性。本研究經青海紅十字醫院醫學倫理委員會批準，患者或其家屬知情同意。

1.2 宮頸組織miR- 218、Stat3 mRNA表達檢測 采用RT- PCR法[9，10]。嚴格按照TRIzol試劑說明書提取各組織總RNA。取宮頸癌組織和正常宮頸組織總RNA各1 μg，根據逆轉錄試劑盒說明進行逆轉錄。miR- 218莖環結構逆轉錄引物序列：5′- CTCAACTGGTGTCGTGGAGTCGGCAATTCAGTTGAGA-CATGGTT- 3′；逆轉錄條件：16 ℃、30 min，42 ℃、30 min、75 ℃、15 min。逆轉錄完后進行PCR擴增。引物設計：miR- 218上游引物：5′- ACACTCCAGCTGGGTTGTGCTTGATCTAACCA- 3′，下游引物：5′- TGGTGTCGTGGAGTCG- 3′；Stat3上游引物：5′- AAGAGGCGGCAACAGATT- 3′，下游引物：5′- CGGTCTTGATGCCGAGGG- 3′；內參U6上游引物：5′- CTCGCTTCGGCAGCACA- 3′，下游引物：5′- AACGCTTCACGAATT-TGCGT- 3′。PCR反應體系按試劑盒說明配制。PCR反應條件：95 ℃預變性10 min，95 ℃ 15 s、60 ℃ 1 min共40個循環。以U6為內參，采用2-ΔΔCt法計算miR- 218、Stat3 mRNA相對表達量。比較兩種組織miR- 218、Stat3 mRNA相對表達量，并分析二者與宮頸癌患者臨床病理參數的關系。

2 結果

2.1 兩組miR- 218、Stat3 mRNA表達比較 觀察組、對照組miR- 218 mRNA相對表達量分別為0.57±0.12、1.09±0.51，Stat3 mRNA相對表達量分別為0.56±0.15、0.21±0.06，兩組比較P均<0.05。

2.2 宮頸癌組織miR- 218、Stat3 mRNA表達的關系 Pearson相關分析顯示，宮頸癌組織miR- 218 mRNA表達與Stat3 mRNA表達呈負相關關系(r=-0.719，P<0.05)。

2.3 宮頸癌組織miR- 218、Stat3 mRNA表達與患者臨床病理參數的關系 宮頸癌組織miR- 218 mRNA表達與臨床分期、組織分化程度、淋巴結轉移有關(P均<0.05)，與患者年齡、病理類型、腫瘤直徑、絕經狀況及宮旁浸潤無關(P均>0.05)。宮頸癌組織Stat3 mRNA表達與組織分化程度、淋巴結轉移有關(P均<0.05)，與患者年齡、病理類型、臨床分期、腫瘤直徑、絕經狀況及宮旁浸潤無關(P均>0.05)。見表1。

表1 宮頸癌組織miR- 218、Stat3 mRNA表達 與患者臨床病理參數的關系

3 討論

宮頸癌的誘發病因眾多，其發生與染色體突變、人類乳頭瘤病毒感染及單核苷酸多態性等關系甚為密切，特別是miRNA表達異常[11～13]，如在乳腺癌、結腸癌、神經膠質瘤及肝癌等多種惡性腫瘤組織miR- 218表達降低[4,14]。

miRNA家族成員作為一類內源性非編碼小分子RNA，由21～25個核苷酸組成[15]。單獨miRNA可調控多個靶基因，而且單個靶基因受多個miRNA調節[16，17]。miR- 218是由STIL2和STIL3分別編碼miR- 218- 1和miR- 218- 2而形成的成熟分子，兩個編碼基因分別位于4p15.31和6q35.1上[5]。本研究觀察組宮頸癌組織miR- 218 mRNA表達明顯低于對照組，提示miR- 218在宮頸癌的發生、發展過程中可能發揮抑癌基因作用，這與湯貝貝等[4]研究結論基本一致。本研究結果顯示，宮頸癌組織miR- 218 mRNA表達與臨床分期、組織分化程度、淋巴結轉移具有相關性，提示miR- 218 mRNA表達降低可促進宮頸癌的發生、發展及轉移，其機制可能為miR- 218能抑制靶基因翻譯和(或)降解靶基因，與靶基因mRNA結合成相互關聯的調控網絡，從而調控mRNA表達[15]。

Stat家族由Stat1、Stat2、Stat3、Stat4、Stat5α、Stat5β和Stat6共7個轉錄因子組成，主要以失活形式存在于細胞質中，僅在正常組織中短暫表達，而在惡性腫瘤組織中多持續高表達[7,10]。Stat家族的主要功能是將細胞外的信號傳送至細胞內。Stat3為Stat家族中的一員，被激活的Stat3可調控腫瘤細胞的生長、增殖及凋亡，是被公認的致癌基因[18，19]。Stat3作為受體信號的下游效應分子，還可調節胚胎發育及免疫反應等[11]。Stat3受多種外界因素的影響，可激活酪氨酸蛋白激酶1并形成二聚體，進入細胞核，增強其與Stat3 DNA靶基因的結合，從而激活靶基因的轉錄過程，最終完成信號轉導途徑[10,18]。本研究觀察組宮頸癌組織Stat3 mRNA表達顯著高于對照組，說明Stat3在宮頸癌組織中表達升高，同時宮頸癌組織Stat3 mRNA表達與組織分化程度及淋巴結轉移具有相關性，提示Stat3可能參與腫瘤的發生、發展，分析原因可能是Stat3下游基因被激活后，細胞增殖周期發生變化，加速細胞上皮間質轉化并阻滯細胞發生凋亡，逐漸誘導細胞發生癌變，腫瘤細胞通過躲避機制而抑制細胞凋亡[7,11]。相關分析發現，宮頸癌組織miR- 218 mRNA表達與Stat3 mRNA表達呈負相關關系，說明二者表達具有一定聯系，但其具體機制尚需進一步研究。

綜上所述，宮頸癌組織miR- 218 mRNA表達下調，Stat3 mRNA表達上調；二者表達變化與宮頸癌的發生、發展有關，但其具體機制尚需深入研究。

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