91株惡臭假單胞菌流行病學特征及耐藥性

謝朝云, 熊 蕓, 孫 靜, 楊忠玲, 胡 陽, 楊 懷

(1 貴州醫科大學第三附屬醫院, 貴州 都勻 558000; 2 貴州省人民醫院, 貴州 貴陽 550002)

·論著·

91株惡臭假單胞菌流行病學特征及耐藥性

謝朝云1, 熊 蕓1, 孫 靜1, 楊忠玲1, 胡 陽1, 楊 懷2

(1 貴州醫科大學第三附屬醫院, 貴州 都勻 558000; 2 貴州省人民醫院, 貴州 貴陽 550002)

目的分析臨床分離惡臭假單胞菌的流行病學與耐藥特點，為臨床合理防治其感染提供依據。方法收集2010年1月—2015年12月臨床分離的惡臭假單胞菌及其感染者臨床資料，以美國臨床實驗室標準化協會中的K-B紙片擴散法、藥敏判斷標準進行藥物敏感性試驗及其結果判斷，以WHONET 5.5軟件對分離菌株藥敏結果進行統計分析。結果臨床標本共分離出91株惡臭假單胞菌，以60歲以上老年患者為主(占70.33%)；基礎疾病以社區獲得性肺炎檢出最多(占23.08%)，其次慢性肺原性心臟病(占15.38%)；標本主要來源于深部痰(占57.14%)，其次為中段尿(占27.47%)；主要分布于呼吸內科(占28.57%)，其次為心血管內科(占13.19%)。除對氨曲南耐藥率(52.75%)較高外，對慶大霉素、亞胺培南、左氧氟沙星、頭孢他啶、美羅培南、環丙沙星等耐藥率較低，分別為7.78%、9.89%、2.20 %、9.89%、7.69%、2.22 %，對阿米卡星和多粘菌素的耐藥率均為0。結論惡臭假單胞菌感染主要發生于伴有基礎疾病的老年患者，以呼吸道感染為主，對多數抗菌藥物的耐藥率<10%。

惡臭假單胞菌; 流行病學; 抗菌藥物; 抗藥性, 微生物; 耐藥性

惡臭假單胞菌(Pseudomonasputida)為人類和魚類共患病原菌，是一種常見的環境污染菌，也是人類咽部的正常菌群。偶可從人類感染標本中分離出，是人類少見的條件致病菌，不為臨床所重視。因此，對其臨床流行病學與耐藥性研究較少，但人體感染后該菌自溶可釋放內毒素而使人體出現中毒癥狀，可造成多器官感染、敗血癥、感染性休克，甚至危及生命。隨著近年來廣譜抗菌藥物和免疫抑制劑的廣泛應用，惡臭假單胞菌的感染和耐藥率均有上升趨勢，且以耐藥菌株感染多見。因此，對惡臭假單胞菌進行流行病學與耐藥特征分析，對其防控具有重要指導意義。

1 對象與方法

1.1 研究對象 2010年1月—2015年12月某院臨床送檢標本分離出的惡臭假單胞菌及其感染患者的臨床資料。

1.2 菌株鑒定與藥敏試驗 細菌的培養鑒定按照《全國臨床檢驗操作規程》進行，抗菌藥物敏感試驗及藥敏結果判斷按美國臨床實驗室標準化協會(CLSI)中的K-B藥敏紙片法及其判斷標準，并結合藥敏紙片說明書進行藥敏結果判定。質控菌株為銅綠假單胞菌(ATCC 27853)、大腸埃希菌(ATCC 25922)，標準株均購自衛生部臨床檢驗中心。

1.3 統計分析 應用WHONET 5.5軟件包對分離株的藥敏結果進行統計分析。

2 結 果

2.1 一般資料 2010年1月一2015年12月臨床標本共分離出惡臭假單胞菌91株，91例患者感染，其中男性63例，女性28例，年齡6～94歲，平均年齡(64.97±17.42)歲。同期檢出假單胞菌屬細菌2 376株，惡臭假單胞菌占同期檢出假單胞菌屬細菌3.83%，其中91～100歲占同期同年齡檢出的假單胞菌屬細菌百分率(4/38，10.53%)，占比最高；其次為81～90歲(5/53，9.43%)、71～80歲(34/388，8.76%)、61～70歲(21/502，4.18%)、0～10歲(2/73，2.74%)、51～60歲(13/511，2.54%)、41～50歲(6/319，1.88%)、31～40歲(5/311，1.61%)、11～20歲(1/109，0.92%)，21～30歲組未檢出(0/72，0.00%)。基礎疾病以社區獲得性肺炎檢出最多(占23.08%)，其次為慢性肺原性心臟病(占15.38%)。以終未期腎病檢出惡臭假單胞菌占同期同類基礎疾病檢出的假單胞菌屬細菌百分率最高(8.26%)，其次為嚴重軟組織損傷(7.89%)。見表1。

表1惡臭假單胞菌在不同基礎疾病中構成及其在假單胞菌屬細菌中所占比率

Table1Constituent ofP.putidain different underlying diseases and its proportion inPseudomonasspp.strains

基礎疾病假單胞菌屬株數構成比(%)惡臭假單胞菌株數構成比(%)惡臭假單胞菌/假單胞菌屬(%)終未期腎病1215．091010．998．26嚴重軟組織損傷763．2066．597．89慢性肺原性心臟病1958．211415．387．18感染性休克281．1822．207．14肺纖維化863．6266．596．98慢性阻塞性肺疾病461．9433．306．52再生障礙性貧血351．4722．205．71慢性支氣管哮喘582．4433．305．17肺癌933．9144．394．30肺結核1988．3366．593．03慢性支氣管炎37015．571112．092．97社區獲得性肺炎70829．802123．082．97其他基礎疾病36215．2433．300．83合計2376100．0091100．003．83

2.2 標本來源分布 惡臭假單胞菌標本主要來源于深部痰(占57.14%)，其次為中段尿(占27.47%)；中段尿標本檢出惡臭假單胞菌占同期同類標本檢出的假單胞菌屬細菌的6.39%，占比最高，其次為深部痰(占4.12%)。見表2。

2.3 科室分布 惡臭假單胞菌主要來源于呼吸內科(26株，占28.57%)，其次為心血管內科(12株，占13.19%)、腎內科(10株，占10.99%)；以重癥監護病房(ICU)檢出惡臭假單胞菌占同期同科室檢出的假單胞菌屬細菌百分率最高(9/130，6.92%)、其次為骨科(5/79，6.33%)、腎內科(10/161，占6.21%)、老年病科(7/142，4.93%)、呼吸內科(26/578，占4.50%)、泌尿外科(7/182，3.85%)、心血管內科(12/413，占2.91%)、感染科(10/361，占2.77%)、其他科室(5/330，1.52%)。

表2惡臭假單胞菌在不同標本中的構成及其在假單胞菌屬細菌中所占比率

Table2Constituent ofP.putidain different specimens and its proportion inPseudomonasspp.strains

標本假單胞菌屬株數構成比(%)惡臭假單胞菌株數構成比(%)惡臭假單胞菌/假單胞菌屬(%)深部痰126353．165257．144．12中段尿39116．462527．476．39血24510．3188．793．27傷口分泌物1596．6944．402．52其他標本31813．3822．200．63合計2376100．0091100．003．83

2.4 藥敏試驗結果 2010年1月—2015年12月臨床送檢標本中分離出惡臭假單胞菌對常用抗菌藥物的敏感率和耐藥率，見表3。

表3惡臭假單胞菌對常用抗菌藥物的藥敏結果[株，(% )]

Table3Antimicrobial susceptibility testing result ofP.putida(No. of isolates[%])

抗菌藥物耐藥中介敏感哌拉西林23(25．27)0(0．00)68(74．73)哌拉西林/他唑巴坦22(24．18)0(0．00)69(75．82)頭孢他啶9(9．89)0(0．00)82(90．11)氨曲南48(52．75)7(7．69)36(39．56)亞胺培南9(9．89)0(0．00)82(90．11)美羅培南7(7．69)0(0．00)84(92．31)慶大霉素7(7．78)2(2．22)81(90．00)阿米卡星0(0．00)2(2．20)89(97．80)左氧氟沙星2(2．20)0(0．00)89(97．80)環丙沙星2(2．22)2(2．22)86(95．56)多粘菌素0(0．00)4(4．40)87(95．60)

3 討論

惡臭假單胞菌為無芽胞革蘭陰性需氧細長桿菌，屬假單胞菌屬，一般認為是魚類的一種病原菌及環境污染菌，對人體是一種少見的機會致病菌，未引起臨床重視。但隨著抗菌藥物的廣泛應用，此菌耐藥性上升，當患者出現菌群失調、宿主免疫力低下或創傷后等情況時，導致其感染率上升。王偉等[1]在233株非發酵菌中，惡臭假單胞菌檢出48株，達20.60%，Yang CH等[2]報道尿中檢出率也較高，常因表現為難治性感染時被臨床發現。

本研究顯示，從患者年齡看，2010年1月—2015年12月臨床標本分離出惡臭假單胞菌的 91例患者中，年齡6～94歲，平均年齡(64.97±17.42)歲，以老年患者占同期檢出假單胞菌屬細菌百分率較高，基礎疾病以終未期腎病檢出惡臭假單胞菌占同期同類基礎疾病檢出的假單胞菌屬細菌百分率最高，其次為嚴重軟組織損傷、呼吸道慢性疾病伴有呼吸功能受損和再生障礙性貧血等免疫機能受損的患者，提示惡臭假單胞菌作為條伴致病菌，致病力弱，其感染多見于老年患者，主要是有侵入性操作伴有基礎疾病的免疫機能低下患者[3]，應引起臨床注意。

從標本來源看，主要來源于深部痰(占57.14%)，其次為中段尿(占27.47%)；中段尿標本檢出惡臭假單胞菌占同期同類標本檢出的假單胞菌屬細菌的6.39%，占比最高，其次為深部痰、血和傷口標本，分別占4.12%、3.27%、2.52%。從科室分布看，主要來源于呼吸內科(占28.57%)，其次為心血管內科(占13.19%)、腎內科(占10.99%)；以ICU檢出惡臭假單胞菌占同期同科室檢出的假單胞菌屬細菌百分率(6.92%)最高、其次為骨科(6.33%)、腎內科(6.21%)；提示該菌感染以伴有嚴重基礎疾病患者引起呼吸道感染為主[4]，其次為泌尿道、血流和傷口感染。彭石龍等[5]報道從108例醫院獲得性肺部感染中分離出77株病原菌，其中惡臭假單胞菌檢出16株，占20.78%，檢出率占第三位，僅次于銅綠假單胞菌；余鑫之等[6]對61例非銅綠假單菌敗血癥中檢出惡臭假單胞菌6例，占9.84%，表現為嚴重感染和多重耐藥；此外手術切口感染和骨髓炎等也有報道[7]。

本研究顯示，惡臭假單胞菌除對氨曲南耐藥率>50%，不應作為治療首選抗菌藥物。對慶大霉素、亞胺培南、左氧氟沙星、頭孢他啶、美羅培南、環丙沙星的耐藥率分別均<10%，對阿米卡星、多粘菌素的耐藥率為0，上述藥物可作為臨床治療惡臭假單胞菌感染的可選抗菌藥物。多粘菌素雖然耐藥率低，但副作用較大，臨床上大多僅用于對碳青霉烯類抗生素耐藥的菌株。因此，應加以分級管理，限制濫用；而慶大霉素、阿米卡星、左氧氟沙星、頭孢他啶、環丙沙星等可作為臨床治療惡臭假單胞菌優選抗菌藥物。隨著抗菌藥物的廣泛應用，惡臭假單胞菌的耐藥性也明顯上升，對亞胺培南和美羅培南等碳青霉烯類抗生素的耐藥率分別為9.89%和7.69%，耐藥率顯現上升趨勢，應引起臨床重視，不應作為臨床首選抗菌藥物；臨床也已有報道耐藥株感染形成難治性疾病[8]，是危險信號，與其產生氨基糖苷類修飾酶基因(aminoglyc oside modifying enzymes，AMEs)[9]、β-內酰胺酶[尤其是金屬酶(VIM、IMP)][10]、消毒劑/磺胺耐藥基因(chlorhexidine-sulfadiazine resistant gene，CSRE，又稱為qacEA1-sul1)[11]、整合子(integron，int)1、2、3[10，12]、外膜蛋白缺失和外排泵[14]等有關。

綜上所述，一般認為惡臭假單胞菌致病力弱，未引起重視，但隨著抗菌藥物的廣泛應用，此菌耐藥性和感染率有上升趨勢。當患者出現菌群失調、宿主免疫力低下或創傷后等免疫功能下降情況時，極易引起呼吸道、泌尿道、切口、傷口、骨髓、血流等部位惡臭假單胞菌感染，甚至形成難治感染性疾病、敗血癥和食品污染食物中毒等[15]，且多認為與醫院感染有關。因此，廣大醫務人員應引起高度重視，嚴防漏診及誤診，同時注意手衛生，防止該菌通過醫護人員手傳播給患者，加強環境消毒和隔離，避免交叉感染。

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Epidemiologicalcharacteristicsandantimicrobialresistanceof91strainsofPseudomonasputida

XIEZhao-yun1,XIONGYun1,SUNJing1,YANGZhong-ling1,HUYang1,YANGHuai2

(1ThirdAffiliatedHospitalofGuizhouMedicalUniversity,Douyun558000,China; 2GuizhouProvincialPeople’sHospital,Guiyang550002,China)

ObjectiveTo analyze the epidemiological characteristics and antimicrobial resistance of clinically isolatedPseudomonasputida(P.putida), and provide basis for rational prevention and treatment ofP.putidainfection.MethodsP.putidaisolated between January 2010 and December 2015, as well as clinical data of patients infected withP.putidawere collected, antimicrobial susceptibility of isolates was determined by Kirby-Bauer disk diffusion susceptibility testing of Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) of America, susceptibility testing results of isolated strains were analyzed by WHONET 5.5 software.ResultsA total of 91 strains ofP.putidawere isolated from clinical specimens, most were from elderly patients aged >60 years(70.33%); the major underlying disease was community-acquired pneumonia (23.08%)，followed by chronic pulmonary heart disease(15.38%); the main specimen was sputum(57.14%), followed by urine(27.47%);P.putidamainly distributed in department of respiratory medicine (28.57%), followed by department of cardiovascular medicine (13.19%).P.putidahad high resistance rate to aztreonam (52.75%), while resistance rates to gentamicin, imipenem, levofloxacin, ceftazidime, meropenem, and ciprofloxacin were 7.78%, 9.89%, 2.20%, 9.89%, 7.69%, and 2.22% respectively, resistance rates to amikacin and polymyxin were both 0.ConclusionP.putidainfection mainly occurs in elderly patients with underlying diseases, mainly respiratory tract infection, resistance rates to most antimicrobial agents were <10%.

Pseudomonasputida; epidemiology; antimicrobial agent; drug resistance; microbial

[Chin J Infect Control，2017，16(12)：1185-1188]

2017-03-20

貴州省黔南州社會發展科技項目(黔南科合社字[2013]20號)

謝朝云(1968-)，男(水族)，貴州省三都縣人，主任醫師，主要從事醫院感染防控、骨科感染性疾病防治及細菌耐藥性監測研究。

楊懷 E-mail:syygkhy@126.com

10.3969/j.issn.1671-9638.2017.12.018

R378.99+1

A

1671-9638(2017)12-1185-04

文細毛、陳玉華)