鹽水交叉配血法判定紅細胞血型的實驗觀察

王晟宇

【摘 要】目的 通過鹽水交叉配血實驗判定紅細胞血型，認識紅細胞血型的不同分型及其特點。方法 隨機選擇南通市中心血站參加無償獻血的健康獻血者六人，采集外周靜脈血標本，各自分離出血清和血球，利用紅細胞上的抗原與血清中的抗體的特異性反應，運用交叉配血的方法分別進行實驗。 結果 六支標本因血型不同，而發(fā)生凝集和不凝集的現象。相同血型的血清血球結合不發(fā)生凝集；不同血型的血清和血球結合時會發(fā)生凝集或不凝集；O型血球和任何血型血清都不凝集；AB型血清和任何血型血球都不凝集。 結論 鹽水交叉配血法實驗能判斷出O型和AB型血，A型和B型血不能準確區(qū)分。紅細胞血型的鑒定最好使用標準血清和標準血球進行正反定型試驗。

【關鍵詞】鹽水；交叉配血；紅細胞；血型

人類的血型系統(tǒng)是根據人的紅細胞表面同族抗原的差別而進行的一種分類。由于人類紅細胞所含凝集原的不同，而將血液分成若干型，故稱血型。人類血型有很多種型，而每一種血型系統(tǒng)都是由遺傳因子決定的，并具有免疫學特性。最多而常見的血型系統(tǒng)為ABO血型，分為A、B、O、AB四型；其次為Rh血型系統(tǒng)，主要分為Rh陽性和Rh陰性；再次為MN及MNSs血型系統(tǒng)。據目前國內外臨床檢測，發(fā)現人類血型有30余種之多。

不同血型人的紅細胞與另一人的血清混合時，紅細胞則粘聚在一起，發(fā)生凝集反應，致紅細胞受損害發(fā)生溶血。臨床上將受血者的紅細胞與血清分別同供者的血清與紅細胞混合，觀察有無凝集現象稱為交叉配血。根據這一現象，我們可以應用于判定不同的紅細胞血型實驗。

1.材料與方法

1.1標本的選擇。隨機選擇南通市中心血站參加無償獻血的健康獻血者六人，采集外周靜脈血3ml，分別注入干燥潔凈的試管，編號1，2，3，4，5，6。

1.2儀器及試劑。實驗室用800電動離心機、血型檢定卡、0.9%生理鹽水、空白試管、手持式加樣槍、一次性注射器、一次性加樣吸頭、碘伏、棉簽等。

1.3方法。將抽取的6支標本室溫靜置1小時，低速（2000轉/分）離心10分鐘，分離出血清和血球，將6支標本分離出的血球以生理鹽水洗滌并稀釋，在分出的6支血球試管中加入1ml生理鹽水，混勻，離心，移除上清液，重復此過程2次，得到6支標本的標準血球。取6支空白試管，每管加入生理鹽水1ml，分別吸取6支血球標本50ul加于6支生理鹽水試管中，混勻，配成5%的紅細胞生理鹽水懸液待用。血型檢定卡上橫排和豎排都標注序號1-6號，首先在血型檢定卡上第一行六個凹槽中分別加1號標本血清0.2ml，依次在6個凹槽中加入1-6號標本的紅細胞生理鹽水懸液，混勻，觀察凝集現象。在第二行的六個凹槽中分別加入2號標本血清0.2ml，依次加入1-6號標本的紅細胞生理鹽水懸液，混勻，觀察現象。依此類推，直到全部做完6號標本結束。

2.結果

出現凝集用“+”表示，未出現凝集的“-”表示，結果見下表。

3.討論

六支標本因血型不同，而發(fā)生凝集和不凝集的現象。O型血球因其紅細胞表面不含有A或B凝集原，O型血球和任何血型血清都不發(fā)生凝集；AB型血清中因不含有抗A或抗B抗體，AB型血清和任何血型血球都不凝集。結合上表可以看出，3號和4號血球與6例血清都不發(fā)生凝集，可以說明3和4號標本紅細胞上不含有A或B凝集原，即可推斷3號和4號標本管為O型血；6號血清管和6例血球均未出現凝集，說明6號血清中不含有抗A或者抗B抗體，那么6號管為AB型血；相同血型的血清血球結合未發(fā)生凝集，表中1號和2號反應完全相同，1號、2號血型相同，5號的凝集反應和1號、2號相反，說明5號血型和1號、2號必定不同，若1、2號為A型，5號則為B型，若1、2號為B型，5號則為A型。根據這個實驗得出結論，不同血型的血清和血球結合時會發(fā)生凝集或不凝集；凝集反應取決于紅細胞表面的凝集原及血清中的抗體。實驗中O型和AB型可根據凝集反應表結果而判斷出，但A型和B型在未知抗原抗體的情況下無法準確區(qū)分。

交叉配血法臨床用于輸血前檢查，是保證輸血安全的重要措施。在血型鑒定的基礎上，通過交叉配血試驗進一步證實受血者和供血者之間不存在血型不合的抗原一抗體反應，以保證受血者的輸血安全。血型鑒定和交叉配血是利用紅細胞上的抗原與血清上相應的抗體發(fā)生特異性凝集的原理，標本的血清效價低或者存在紅細胞抗原弱或者紅細胞亞型的情況下，試驗結果易出現假陰性。另外，試管不清潔干燥、補體、低滲鹽水等都有可能造成溶血反應，從而導致假陰性反應，影響結果的判定。實驗中對環(huán)境溫濕度進行了控制，對實驗器材都按標準要求進行操作，未發(fā)生溶血現象，但未考慮弱抗原或紅細胞亞型結果假陰性的可能。觀察實驗中的凝集出現時間有早有晚，凝集顆粒有多有少，考慮可能為弱抗原的影響。實驗能準確判定出O型和AB型血，但無法區(qū)分A型和B型血。紅細胞血型的鑒定最好使用標準血清和標準血球進行正反定型試驗。

【參考文獻】

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