血清異常凝血酶原在肝細胞癌診斷中的療效分析

劉宓，鐘銀雪，王偉，劉翛

（貴州省腫瘤醫院 檢驗科，貴州 貴陽 550004）

血清異常凝血酶原在肝細胞癌診斷中的療效分析

劉宓，鐘銀雪，王偉，劉翛

（貴州省腫瘤醫院 檢驗科，貴州 貴陽 550004）

目的探討異常凝血酶原（PIVKA-Ⅱ）在肝細胞癌（HCC）診斷中的療效分析。方法收集2014年9月-2015年1月于貴州省腫瘤醫院收治的HCC患者84例、其他惡性腫瘤患者54例、慢性乙肝患者88例及乙肝表面抗原陰性和肝功能正常者39例，采用化學發光/酶聯免疫技術檢測血清PIVKA-Ⅱ和甲胎蛋白（AFP）。結果HCC組血清PIVKA-Ⅱ和AFP水平高于其余各組，PIVKA-Ⅱ與AFP聯合檢測用于疾病診斷的敏感性為90.50%，優于單獨診斷。結論血清PIVKA-Ⅱ的檢測在HCC的診斷中具有較高的臨床價值，該項目可以作為AFP檢測的補充，兩者聯合檢測可提高HCC的診斷效率。

癌；肝細胞；異常凝血酶原；甲胎蛋白

肝癌以肝細胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）為主。在中國，HCC患者人數占全世界HCC患者總數的55%，在城市最常見腫瘤中排第2位，在農村最常見腫瘤中排第1位[1-2]。HCC起病較隱匿，死亡率高（26.26/10萬人）[3]。早期確診HCC，可有效提高患者的生存期。

1984年LIEBMAN等[4]在HCC患者血漿中發現凝血酶原（prothrombin induced by vitamin K absence or antagonist-Ⅱ，PIVKA-Ⅱ）水平升高，提出該種蛋白質可能作為HCC診斷的標志物。研究表明，PIVKA-Ⅱ可作為HCC診斷的補充，與甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）聯合檢測可提高診斷的敏感性和特異性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年9月-2015年1月于貴州省腫瘤醫院收治的HCC患者84例做為HCC癌組。其中，男性56例，女性28例，年齡中位數51歲（41.3～61.8歲）。選取同期本院收治的其它惡性腫瘤患者（包括結腸癌、直腸癌、子宮內膜癌及闌尾粘液性腺癌等）54例作為其它惡性腫瘤組。其中，男性25例，女性29例，年齡中位數47歲（39.8～58.3歲）。選取同期本院收治的乙肝表面抗原（hepatitis b surface antigen，HBsAg）陽性患者88例作為慢性乙肝組。其中，男性51例，女性37例年齡中位數49歲（40～59.8歲）。選取同期本院收治的HBsAg陰性同時肝功能正常者39例作為正常對照組。其中，男性17例，女性22例，年齡中位數46歲（38～61歲）。各組間年齡比較，差異無統計學意義（P＞0.05），所有腫瘤均由本院病理科確診。

1.2 實驗材料

血清PIVKA-Ⅱ和AFP采用日本富士瑞必歐公司的LUMIPULSE G1200W全自動化學發光/酶聯免疫分析及配套PIVKA-Ⅱ和AFP試劑盒進行檢測。標準品和質控品也為該公司生產的配套產品。

1.3 標本收集與保存

采集各組受試者的靜脈血，分離血清，進行檢測。如不能立即檢測，則將患者血清收集于離心管中置于-20℃冰箱保存備用。

1.4 統計學方法

數據分析采用SPSS17.0統計軟件，計量資料用中位數（四分位間距）M（P25，P75）表示，組間比較用H檢驗；兩兩比較用Mann-WhitneyU檢驗，相關分析用Spearman法。計數資料以率表示，用χ2檢驗。采用受試者工作特征曲線（receiver operator characteristic curve，ROC）計算曲線下面積（area under curve，RUC）反應敏感性及特異性。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組血清PIVKA-Ⅱ和AFP水平比較

各組間PIVKA-Ⅱ和AFP比較，采用Kruskal-WallisH檢驗，差異有統計學意義（P＜0.05）；HCC組與其他惡性腫瘤組、慢性乙肝組及正常對照組的血清PIVKA-Ⅱ水平比較，采用Mann-Whitney U檢驗，差異有統計學意義（U=302.5、478.5和160.5，均P=0.000），HCC組與其他惡性腫瘤組、慢性乙肝組及正常對照組的血清AFP水平比較，采用Mann-WhitneyU檢驗，差異有統計學意義（U=326.5、536.0和 215.5，均P=0.000），HCC組血清 PIVKA-Ⅱ和AFP水平高于其余各組，且乙肝陽性與否不影響HCC組和其他惡性腫瘤組PIVKA-Ⅱ和AFP的水平；對其他惡性腫瘤組、慢性乙肝組及正常對照組進行兩兩比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。Spearman等級相關分析血清PIVKA-Ⅱ和AFP的呈正相關（r=0.598，P=0.000）。見表 1。

2.2 各組血清PIVKA-Ⅱ和AFP診斷HCC的ROC-AUC值比較

繪制PIVKA-Ⅱ和AFP單獨或聯合診斷HCC的ROC曲線結果顯示，無論是PIVKA-Ⅱ還是AFP都具有較好的診斷價值，各組PIVKA-Ⅱ的AUC均高于AFP，兩者聯合檢測的AUC最高。見表2和附圖。

2.3 各組PIVKA-Ⅱ和AFP診斷HCC的敏感性與特異性比較

以所有組為對照，40 mAU/ml和20 ng/ml分別做為PIVKA-Ⅱ和AFP的診斷切點，統計血清PIVKA-Ⅱ、AFP單獨和聯合用于診斷HCC的敏感性與特異性。單獨PIVKA-Ⅱ與PIVKA-Ⅱ＋AFP的敏感性比較，差異無統計學意義（χ2=0.649，P=0.546），單獨AFP與PIVKA-Ⅱ＋AFP的敏感性比較，差異有統計學意義（χ2=5.340，P=0.034），兩者聯合診斷的診斷敏感性高于AFP。各指標單獨診斷與聯合診斷的特異性比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。見表 3、4。

表1 各組血清PIVKA-Ⅱ和AFP的水平比較 M（P25，P75）

表2 血清PIVKA-Ⅱ和AFP單獨或聯合診斷HCC的ROC-AUC值

表3 血清PIVKA-Ⅱ和AFP的診斷敏感性和特異性

表4 血清PIVKA-Ⅱ和AFP診斷HCC的敏感性和特異性比較

附圖 血清PIVKA-Ⅱ、AFP及兩者聯合診斷HCC的ROC曲線

3 討論

早期確診HCC，對患者進行及時治療，可有效提高患者的生存期。目前臨床用于診斷HCC的方法主要是AFP，約35%的HCC患者血清AFP水平正常，因此單一依靠AFP作為HCC篩查的標志物是不夠的[5]。

PIVKA-Ⅱ又稱維生素K缺乏或拮抗劑誘導蛋白，是凝血酶原的一種前體蛋白，由肝臟合成，依賴維生素K的凝血因子。它的生物學特性及理化性質與凝血酶原大致相同，但不具備凝血酶原的生物學活性。袁聯文等[6]研究表明，73.9%的肝癌組織PIVKA-Ⅱ染色陽性，該研究從組織學角度證實血清PIVKA-Ⅱ主要來源于肝癌組織。本研究結果顯示，無論與其他惡性腫瘤患者還是慢性乙肝患者相比，HCC組的PIVKA-Ⅱ的水平增高（P＜0.05），而其他各組之間PIVKA-Ⅱ的水平則變化不大，這表明PIVKA-Ⅱ主要在HCC中表達。與PIVKA-Ⅱ相同，HCC組的AFP水平高于其余各組（P＜0.05）。PIVKA-Ⅱ和AFP雖有相關性，但程度不高。這可能是由于AFP和PIVKA-Ⅱ產生的機制不同。AFP主要來源于胎兒肝細胞，當成人肝細胞發生癌變后，部分肝細胞恢復產生AFP的功能，使得血液中該種蛋白增多。而PIVKA-Ⅱ主要是由于肝細胞變性壞死、線粒體腫脹、功能減退及維生素K利用發生障礙而影響維生素K循環，凝血酶原前體谷氨酸殘基的r-羧化障礙而產生。HCC會大量產生抑制羧化反應的因子，導致與r羧化及維生素K循環有關的酶系異常，維生素K攝取產生障礙，進而使得PIVKA-Ⅱ水平升高。由于兩者的來源不同，相關性不高，因此聯合運用于HCC的診斷具有較好的臨床意義。

分析血清PIVKA-Ⅱ用于HCC診斷的ROC顯示，血清PIVKA-Ⅱ和AFP均具有較高的診斷價值。JONG等[7]以40 mAU/L為切點時，PIVKA-Ⅱ的診斷敏感性和特異性分別為60%和95%。濮玨彪等[8]對原發性肝癌患者血清中AFP和PIVKA-Ⅱ進行單獨檢測，血清AFP的敏感性為63.00%，特異性為84.91%；血清PIVKA-Ⅱ的敏感性為84.6%，特異性為90.6%；席強等[9]以40 mAU/L為切點時，PIVKA-Ⅱ診斷HCC的敏感性為87.16%，高于AFP的68.92%，兩者聯合檢測的敏感性為93.24%。相較與其他研究，本研究中AFP的敏感性（77.4%）高于其他研究。這可能與本研究中HCC組巴塞羅那分期B和C期患者人數較多，因而導致結果偏高。

綜上所述，PIVKA-Ⅱ用于HCC的診斷具有較高的敏感性和特異性，是較好地用于檢測AFP的補充指標。

[1]Asia-Pacific Working Party on Prevention of Hepatocellular Carcinoma. Prevention of hepatocellular carcinoma in the Asia-Pacifi region: consements[J]. Gastroenterol Hepatol, 2010, 25(4):657-663.

[2]TANAKA M, KAYAYAMA F, KATO H, et al. Hepatitis B and C virus infection and hepatocellular carcinoma in China: A review of epidemiology and control measures[J]. Epidemiol, 2011, 21(6):401-416.

[3]SONG P P, FENG X B, ZHANG K M, et al. Sceening for and surveillance of high-risk patients with HBV-related chronic liver disease: Promoting the early detection of hepatocellular carcinoma in China[J]. BioScience Trends, 2013, 7(1): 1-6.

[4]LIEBMAN H, FURIC B C, TONG M J, et al. Des-gamma-carboxy prothrombin (abnormal) prothrombin as a serum marker of primary hepatocellular careinoma[J]. N Engl J Med, 1984, 310(22): 1427-1431.

[5]SU J Y. A concise review of updated guidelines regarding the management of hepatocellular carcinoma around the world: 2010-2016[J]. Clinical and Molecular Hepatology, 2016, 22(1): 7-17.

[6]袁聯文, 唐偉, 李永國, 等. 肝癌中脫-C-羧基凝血酶原的表達及意義[J]. 世界華人消化雜志, 2004, 12(7): 1543-1545.

[7]JONG Y C, SEUNG W J, HEE Y, et al. Diagnostic value of AFP-L3 and PIVKA-Ⅱ in hepatocellular carcinoma according to total-AFP[J]. World Journal of Gastroenterology, 2013, 19(2): 339-346.

[8]濮玨彪, 王學鋒, 彭奕冰, 等. 血清異常凝血酶原檢測在原發性肝癌臨床診斷中的應用[J]. 檢驗醫學, 2014, 29(3): 270-273.

[9]席強, 孫桂榮, 叢培珊. 血清異常凝血酶原和甲胎蛋白聯合檢測對原發性肝癌的臨床價值[J]. 中華檢驗醫學雜志, 2014, 37(12):928-932.

（李科 編輯）

Clinical value of serum abnormal prothrombin in diagnosis of hepatocellular carcinoma

Mi Liu, Yin-xue Zhong, Wei Wang, Xiao Liu
(Clinical Laboratory, Tumor Hospital of Guizhou Province, Guiyang, Guizhou 550004, China)

ObjectiveTo discuss the clinical value of serum prothrombin induced by vitamin K absence or antagonist-II (PIVKA-II) in diagnosing hepatocellular carcinoma (HCC).MethodsThis study recruited 84 patients with HCC, 54 patients with other malignant tumors (including lung cancer, endometrial cancer, appendix mucous adenocarcinoma, etc), 88 chronic hepatitis patients, and 39 patients with negative hepatitis B surface antigen(HBsAg) and normal liver function in Tumor Hospital of Guizhou Province from September 2014 to January 2015.The serum levels of PIVKA-II and alpha-fetoprotein (AFP) were measured by chemiluminescence enzyme technique.Their data were analyzed by SPSS17.0.ResultsThe serum levels of PIVKA-II and AFP in the HCC group were higher than those in other groups. The combination of PIVKA-II and AFP was better than single use, the sensitivity of combination of PIVKA-II and AFP was 90.50%.ConclusionsSerum PIVKA-II detection has higher clinical value for diagnosis of HCC. It can be used as a supplement to AFP detection. Joint PIVKA-II and AFP detection can improve the diagnosis efficiency of HCC.

hepatocellular carcinoma; abnormal prothrombin; alpha-fetoprotein

R446.62

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2017.29.019

1005-8982（2017）29-0090-04

2016-02-24

王偉，E-mail：13985020972@139.com；Tel：13985020972