乙肝肝硬化對外周血T細胞亞群、免疫球蛋白及補體水平的影響

梁志軍，李瑞娟，王素娜，連建奇

第四軍醫大學唐都醫院感染科 (西安 710038)

乙肝肝硬化對外周血T細胞亞群、免疫球蛋白及補體水平的影響

梁志軍，李瑞娟，王素娜，連建奇

第四軍醫大學唐都醫院感染科 (西安 710038)

目的：檢測乙型肝炎肝硬化患者外周血中T淋巴細胞亞群、免疫球蛋白及補體水平的變化并探討其臨床意義。方法：選取67例乙肝肝硬化患者和20例健康對照者，采用流式細胞術檢測其外周血中T淋巴細胞亞群(CD4+、CD8+)，采用免疫比濁法測定其血清中免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA)及補體(C3、C4)水平。結果：乙肝肝硬化患者外周血中CD4+T、CD8+T淋巴細胞計數低于對照組(P<0.05)，免疫球蛋白IgG、IgM、IgA均高于對照組(P<0.05)，而補體C3、C4低于對照組(P<0.05)。結論：乙肝病毒可以影響T細胞亞群和免疫球蛋白水平，從而導致機體細胞和體液免疫功能紊亂，免疫功能的檢測對評估乙肝肝硬化患者病情及判斷預后有一定臨床意義。

乙型肝炎病毒(HBV)感染人體后可有不同的發展，長期慢性感染可引起乙型肝炎肝硬化。乙肝肝硬化發病機制復雜，現主要認為機體免疫調節功能紊亂是其產生病理損害的主要原因[1-2]。我們選擇了67例乙肝肝硬化患者和20例健康對照者，分別檢測其外周血T淋巴細胞亞群(CD4+、CD8+)、血清免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA)及補體(C3、C4)的水平，探討它們在乙肝病毒導致的肝硬化發病中的作用及臨床意義。

資料和方法

1 一般資料 收集2012年5月至2013年10月期間在本科就診的乙肝肝硬化患者67例，依據2010年中華醫學會制定的《病毒性肝炎防治方案》中的臨床診斷與分期標準進行診斷，且患者在3個月內未經免疫調節劑及抗病毒治療。對照組為20例健康獻血者，均無肝炎病史、乙肝血清學標志呈陰性且肝功能正常。兩組一般資料差異無統計學意義(P>0.05),具有可比性。

2 方 法 ①標本采集：抽取靜脈血10 ml，分為2份：一份EDTA抗凝用于淋巴細胞檢測，一份離心分離血清，置-80℃待檢。②儀器和試劑：檢測由本科室檢測中心專人負責，T淋巴細胞亞群采用流式細胞儀(美國BD公司)及BD公司配套試劑，血清免疫球蛋白和補體水平的檢測采用免疫比濁法。

結 果

1 外周血T淋巴細胞計數分析 乙肝肝硬化組患者外周血T淋巴細胞計數明顯低于對照組，且CD8+淋巴細胞降低程度較CD4+要高，差異具有統計學意義(P<0.05),見表1。

表1 各組外周血T淋巴細胞計數比較

注：與對照組比較*P<0.05

2 血清免疫球蛋白水平分析 乙肝肝硬化組患者的血清免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA)水平明顯高于對照組，差異具有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 各組血清免疫球蛋白比較(lg/L)

注：與對照組比較*P<0.05

3 血清補體水平分析 乙肝肝硬化組患者的血清補體(C3、C4)水平明顯低于對照組，差別具有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 各組血清補體水平比較(g/L)

注：與對照組比較*P<0.05

討 論

乙型肝炎病毒的致病機制復雜，至今尚不完全清楚，目前普遍認為感染乙型肝炎病毒后致病的嚴重程度及預后差異與機體的免疫狀態密切相關[3]。細胞免疫應答主要表現為單個核細胞在肝組織內的浸潤，從而引起不同程度的肝組織損傷，而組織損傷也與體液免疫相關，體液免疫應答主要表現在抗體和補體或免疫復合物形成及在肝組織內沉積。乙肝病毒誘導的機體免疫應答是導致肝細胞損傷的主要機制[3]。乙肝病毒長期慢性感染可以導致肝臟纖維化。

T淋巴細胞是細胞免疫應答的主要執行者。張艷等[4]研究發現非活動性HBsAg攜帶者淋巴細胞低于健康對照者，他們認為慢性HBV攜帶者的免疫功能強于非活動性HBsAg攜帶者。本實驗結果顯示慢性乙型肝炎肝硬化患者CD4+、CD8+T細胞數量較對照組減少，提示機體參加免疫反應的免疫活性細胞已經發生改變，T細胞的減少可能導致機體細胞免疫功能下降。乙肝肝硬化組患者CD8+T細胞下降程度比CD4+T細胞程度多，從而導致CD4+/CD8+比值增高，可能與乙型肝炎病情進展致CD8+細胞耗竭有關，細胞免疫功能低下可能是慢性乙型肝炎發展為乙肝肝硬化的重要因素。

B細胞是機體體液免疫的主導者。周臣敏[5]發現乙肝肝硬化患者的血清IgG、IgE、IgA顯著增高。實驗結果顯示乙肝肝硬化組血清IgG、IgM、IgA明顯高于健康對照組，與其結果基本一致。血清中免疫球蛋白水平升高可能與肝功能損害有關，一方面機體為了清除病毒產生大量的抗體，另一方面乙型肝炎病毒導致的肝硬化致使肝臟細胞功能障礙，清除抗體能力下降，從而使得機體免疫球蛋白升高。由此，免疫球蛋白的水平升高可提示體液免疫功能亢進，且與乙肝肝硬化的病情程度相關。

補體系統也是機體免疫系統的重要組成部分。C3、C4是連接經典途徑和旁路途徑的樞紐。本實驗結果顯示乙肝肝硬化組血清C3、C4水平低于健康對照組，乙肝肝硬化C3、C4水平下降可能是由于乙肝病毒感染導致機體免疫功能紊亂，免疫復合物的形成促使補體過度激活，體內補體消耗增多；也可能與肝細胞受損，導致補體合成減少有關，提示補體水平的變化可能與肝臟損傷的程度及機體免疫狀態有關。

本實驗結果顯示乙型肝炎肝硬化患者細胞免疫及體液免疫功能失調。T淋巴細胞亞群(CD4+、CD8+)、血清免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA)、補體(C3、C4)的變化，可作為動態指標來反應機體細胞免疫和體液免疫功能，為乙型肝炎肝硬化患者的病情判斷、臨床治療及預后評估提供依據。同時提示我們采用免疫制劑可以提高乙肝肝硬化患者的免疫功能，從而達到延緩乙肝肝硬化的病情進展的目的。

[1] Liaw YF,Chu CM. Hepatitis B virus infection [J]. Lancet,2009, 373(9663):582-592.

[2] 王 萍，胥 冰， 張麗君，等. 不同類型HBV感染者外周血Treg/Th17細胞的變化及意義[J]. 陜西醫學雜志, 2013，42(11): 1456-1459.

[3] 王 姣，鄧 洪，謝冬英，等. HBV特異性CTLs表面CD244和PD-1共表達與慢性乙型肝炎嚴重程度的相關性[J]. 中華病理生理雜志，2012， 28(12): 2254-2260.

[4] 張 艷，孫繼紅，刺 梅，等. IL-12、單核細胞、淋巴細胞在HBeAb陽性HBV攜帶者中的相關性研究[J]. 臨床醫學與檢驗, 2016，13(2): 244-246.

[5] 周臣敏. 免疫球蛋白檢測在乙型肝炎患者病情及預后判斷的臨床意義[J]. 國際檢驗醫學雜志, 2013，34(3): 376-377.

InfluenceofhepatitisBcirrhosisonperipheralbloodTlymphocytesubsets,immunoglobulinandcomplementlevels

Liang Zhijun，Li Ruijuqn,Wang Suna,et al.

Department of Infectious Diseases， Tangdu Hospital，The Fourth Military Medical University(Xi’an 710038)

Objective ：To study the changes of T-lymphocyte subsets, serum immunoglobulin and complement in patients with chronic hepatitis B (CHB)-related cirrhosis. Methods:The various T-lymphocyte subsets were detected by flow cytometry, serum immunoglobulin and complement by immune nephelometry in 67 patients with CHB-related cirrhosis and 20casesof healthycontrols. Results：Compared to the healthycontrol group, the CHB-related cirrhosis groups showed significantly less peripheral blood T cells percentages of CD4+(P<0.05) and CD8+(P<0.05). The levels of serum IgG、IgM and IgAin the patientswith CHB-related cirrhosis were significantly higher than those in healthy group (P<0.05).The levels of C3 and C4 in the patients with CHB-related cirrhosis were significantly higher than those in healthy group (P<0.05). Conclution：The immune function was disturbed in the patients with CHB-related cirrhosis. The detection of immune function has clinical significance in the diagnosis, treatment and predict prognosis of CHB-related cirrhosis.

Hepatitis B/complications Liver cirrhosis @T-lymphocyte subsets ImmunoglobulinComplement C3 Complement C4

乙型肝炎/并發癥 肝硬化 @T淋巴細胞亞群 免疫球蛋白 補體C3 補體C4

R575.1

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2017.12.013

(收稿：2017-07-07)