妊娠期高血壓疾病患者胎盤組織中LXRα和Endoglin基因的表達

王則緋,姜 鋒，暴 蕾

1.陜西省第四人民醫院 (西安 710043)，2.空軍軍醫大學唐都醫院產科(西安 710000)，3.西安市第四醫院(西安 710004)

妊娠期高血壓疾病患者胎盤組織中LXRα和Endoglin基因的表達

王則緋1,姜 鋒2，暴 蕾3

1.陜西省第四人民醫院 (西安 710043)，2.空軍軍醫大學唐都醫院產科(西安 710000)，3.西安市第四醫院(西安 710004)

目的：探討妊娠期高血壓疾病患者胎盤組織中肝X受體α(LXRα)和Endoglin基因的表達及其臨床意義。方法：收集婦產科64例妊娠期高血壓疾病患者及28例用作對照的正常妊娠婦女，胎盤娩出后即刻取胎盤組織處理后用RT-PCR法檢測LXRα mRNA和Endoglin mRNA的表達水平。結果：妊娠期高血壓疾病患者胎盤組織LXRα mRNA和Endoglin mRNA表達水平明顯高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，輕度子癇前期患者明顯高于妊娠期高血壓患者差異有統計學意義(P<0.05)，重度子癇前期患者明顯高于輕度子癇前期患者(P<0.05)。LXRα mRNA和Endoglin mRNA在妊娠期高血壓疾病患者胎盤組織中的表達呈正相關(r=0.473)。結論：研究表明LXRα和Endoglin基因的過度表達均能促進妊娠期高血壓疾病的發病及發展，且二者可能共同參與疾病的發生發展過程。

妊娠期高血壓疾病包括妊娠期高血壓、子癇前期、子癇、慢性高血壓并發子癇前期、妊娠合并慢性高血壓5種類型。目前認為子癇前期滋養細胞缺血缺氧對妊娠期高血壓疾病的發生有重要影響。醫學研究發現，肝X受體α(LXR-α)和Endoglin均被認為與滋養細胞的增殖或侵蝕有一定關系[1-2]。本研究探討了妊娠期高血壓疾病患者胎盤組織中LXRα和Endoglin基因的表達情況，以期提高對妊娠期高血壓疾病發病機制的認識。

資料與方法

1 一般資料 收集我院婦產科自2014年1月至2017年1月間收治的妊娠期高血壓疾病患者64例，年齡20～36歲，平均年齡29.62±3.19歲；孕齡250～292 d，平均(265.62±13.91) d，其中有妊娠期高血壓23例，輕度子癇前期21例，重度子癇前期20例。選擇同期產檢正常的妊娠婦女28例作為對照，年齡21～38歲，平均年齡(29.21±2.98)歲；孕齡249～291 d，平均(265.48±13.22) d；所有孕婦均為單胎，并將孕前患有原發性高血壓、糖尿病、肝腎功能不全等慢性病的患者排除在外，患者知情同意。

2 標本采集及方法 胎盤娩出后即刻取臍帶對側胎盤組織300 mg，不含羊膜層，剪成1 cm×1 cm×1 cm大小，吸干水分，后用凍存管盛裝，投入液氮過夜后凍存。RNA提取與反轉錄：按總RNA提取試劑盒說明書提取RNA，將組織總RNA逆轉錄為cDNA，條件：30 ℃5 min，42 ℃ 60 min，99 ℃ 5 min，5 ℃ 5 min，建立20μLPCR反應體系。RT-PCR法：LXRα上游引物為5'-TGGAG-ACATCTCGGAGGTAC-3'，下游引物為5'-GCAATGAGCAAGGCAAACT-3'；Endoglin上游引物為5'-TAGCCCTGCGTCCCAAGA-3'，下游引物為5'-CGATGAGGAAGGCACCAAA-3'。以葡萄糖磷酸脫氫酶(GAPDH)作為內參照，上游引物為:5′-TCATGGGTGTGAACCATGAGAA-3′，下游引物為5′-GGCATGGACTGTGGTCATGAG-3′。采用SYBRGreen熒光染料法進行RT-PCR擴增，條件：94 ℃預變性5 min；94 ℃30 s，52 ℃30 s，72 ℃30 s，30個循環；72 ℃延伸10 min。經2%瓊脂糖凝膠電泳檢測擴增產物，用計算機掃描分析，用基于??Ct的方法進行相對定量分析。

3 統計學方法 應用SPSS 13.0統計軟件進行，計量資料以均值±標準差表示，采用t檢驗，相關性檢驗采用pearson線性相關分析，取P<0.05時差異具有統計學意義。

結 果

1 各組胎盤組織中LXRα mRNA和Endoglin mRNA表達水平比較 妊娠期高血壓疾病患者LXRα mRNA和Endoglin mRNA表達水平明顯高于對照組(P<0.05)，輕度子癇前期患者明顯高于妊娠期高血壓患者(t=3.550，P<0.05)，重度子癇前期患者明顯高于妊娠期高血壓患者(t=5.767，P<0.05)，重度子癇前期患者明顯高于輕度子癇前期患者(t=3.432，P<0.05),見表1。

2 相關性分析 LXRα mRNA和Endoglin mRNA在妊娠期高血壓疾病患者胎盤組織中的表達呈正相關(r=0.473，P<0.05),見圖1。

表1 各組胎盤組織中LXRα mRNA和Endoglin mRNA表達水平比較

圖1 LXRαmRNA和EndoglinmRNA相關性分析

討 論

妊娠期高血壓疾病對母嬰的危害大，如何預防及治療該病一直以來都是臨床醫生十分關心的問題。目前妊娠期高血壓疾病的發病是多因素共同作用的結果，近年研究發現它與子宮胎盤滋養細胞缺血、缺氧有關[3]。本研究發現，妊娠期高血壓疾病患者LXRα mRNA的表達水平明顯高于對照組，且從妊娠期高血壓到重度子癇前期，LXRα mRNA的表達呈遞增趨勢，與既往研究相符，提示LXRα基因與娠期高血壓疾病的發病、進展密切相關，可能是LXRα參與體內多種生理活動的調節，過度表達時通過細胞轉導信號途徑，引起一些因子水平變化，影響滋養細胞對子宮血管的浸潤，影響螺旋動脈重塑，甚至出現粥樣硬化[4-5]，從而降低胎盤血流灌注，出現妊娠期高血壓疾病并加重。

此外研究也發現，妊娠期高血壓疾病患者Endoglin mRNA的表達水平明顯高于對照組，且從妊娠期高血壓到重度子癇前期，Endoglin mRNA的表達呈遞增趨勢，與既往研究相符，提示Endoglin不僅參與了妊娠期高血壓疾病的病理生理過程，而且還加速了疾病的進展。Endoglin參與妊娠期高血壓疾病作用機制還不清楚。動物實驗及臨床研究均有發現，低氧可誘導Endoglin表達。故而推測可能為低氧環境下，Endoglin表達上調，從而進一步使具有誘導促血管形成作用的TGF-β信號途徑受到阻斷，減少胎盤血管生成，降低胎盤血流灌注，并且還可通過復雜的途徑使具有舒張血管功能的NO減少，導致外周血管阻力增加，最終引起高血壓、蛋白尿等臨床癥狀[6-7]。

相關性分析結果表明，LXRα mRNA和Endoglin mRNA在妊娠期高血壓疾病患者胎盤組織中的表達呈正相關，提示二者可能存在一定的相互作用共同促進了妊娠期高血壓病的發生發展。國外的研究也表明，用LXRα的激活劑T0901317處理絨癌細胞系JAR細胞，可提高Endoglin啟動子的活性，上調Endoglin基因和蛋白的表達[8]。但二者相互作用的具體機制還需進一步研究。

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高血壓, 妊娠 胎盤 @肝X受體α @Endoglin

R714.2

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2017.12.053

(收稿：2017-10-18)