肥胖伴牙周炎患者齦溝液及血清中脂聯素與內脂素的表達

胥丹妮，靳贏，王越，宋利明，林曉萍

（中國醫科大學附屬盛京醫院口腔科，沈陽 110004）

肥胖伴牙周炎患者齦溝液及血清中脂聯素與內脂素的表達

胥丹妮，靳贏，王越，宋利明，林曉萍

（中國醫科大學附屬盛京醫院口腔科，沈陽 110004）

目的檢測肥胖伴牙周炎患者齦溝液及血清中脂聯素與內脂素的表達水平。方法本研究共納入80例我科就診患者，分為4組。其中對照組20例 （H組） 、牙周炎組20例 （CP組） 、肥胖組20例 （OB組） 、肥胖伴牙周炎組20例 （OB+CP組） ；記錄患者的一般信息和臨床指標；收集齦溝液及靜脈血清樣本，采用ELISA法測定齦溝液及血清中脂聯素與內脂素的表達水平；利用SPSS 17.0軟件包對數據進行統計學分析。結果CP組、OB組及OB+CP組血清中脂聯素的濃度低于H組 （P ＜ 0.05） 。OB+CP組血清中脂聯素的濃度低于CP組及OB組 （P ＜ 0.05） 。CP組、OB組及H組齦溝液中脂聯素的濃度高于OB+CP組 （P ＜ 0.05） 。CP組、OB組及H組血清中內脂素的濃度低于OB+CP組 （P ＜ 0.05） 。結論肥胖可能通過抑制脂聯素表達、促進內脂素的表達加重牙周組織的破壞。

肥胖； 牙周炎； 脂聯素； 內脂素

牙周炎是由多種因素引起的牙周組織的慢性炎癥反應，它主要侵犯牙齦和牙槽骨等牙周支持組織，是牙齒缺失的重要原因之一［1］。肥胖作為全球范圍內的流行病，與某些系統性疾病密切相關［2］。近年來，大量的研究［3］表明，肥胖和牙周炎具有相關性。脂聯素是所有脂肪因子中唯一呈負性調節的激素，具有抗炎、促進葡萄糖的吸收、增加胰島素的敏感性等作用。內脂素具有促炎、調節胰島素的敏感性等作用［4］，但有關脂聯素和內脂素對牙周炎的影響報道較少。本研究通過檢測脂聯素與內脂素在患者齦溝液及血清中的表達，探討肥胖作為危險因素對牙周炎的影響，進而為牙周炎的防治提供更多的客觀理論依據。

1 材料與方法

1.1 研究對象

選取2016年1月至12月就診于中國醫科大學附屬盛京醫院口腔科的患者80例，將其分為4組。對照組20例 （H組，即未患牙周及肥胖疾病且符合納入及排除標準者） ，其中男8例，女12例，年齡 （44.50±7.8）歲；牙周炎組20例（ CP組） ， 其中男10例，女10例，年齡（ 49.25±10.59） 歲；肥胖組20例（ OB組，即未患牙周疾病且符合納入及排除標準的肥胖患者） ，其中男13例，女7例，年齡（ 47.75±9.01） 歲，肥胖伴牙周炎組20例（ OB+CP組），其中男11例，女9例，年齡（49.50±8.57） 歲。納入標準：年齡18～60 周歲有能力理解并簽訂知情同意書的成年人；每位患者口腔內牙齒≥15顆，每個象限至少有2顆磨牙牙周探診深度（ probing depth，PD） ≥4 mm，臨床附著喪失（ clinical attachment loss，CAL） ≥2 mm；正常體質量指數（ body mass index，BMI） 為＞18.5 ～＜23.9 kg/m2，肥胖者BMI≥28 kg/ m2。排除標準：懷孕及哺乳期婦女，配戴正畸矯治器的患者；近半年內接受過牙周治療及降脂治療者，近3個月內應用免疫抑制劑、非激素類抗炎藥物、抗生素者；心臟病患者、甲狀腺功能亢進及減退患者和糖尿病患者。

1.2 牙周臨床指標的檢測

牙周檢查6顆指數牙 （16、11、26、36、31、46） ，指數牙檢查6個位點 （近頰、正中頰、遠頰、近舌、正中舌、遠舌） 的PD、CAL、牙齦指數 （gingival index，GI）和齦溝出血指數 （sulcular bleeding indx，SBI） 。

1.3 齦溝液及血清樣本的收集

1.3.1 齦溝液收集：選擇1、2象限第一磨牙頰舌正中2個位點 （個別第一磨牙不符合納入標準者用相鄰的第二磨牙或第二前磨牙代替） 。去除受試牙的大塊齦上牙石，用尖探針側面刮除齦上菌斑，受試牙以棉卷隔濕，氣槍吹干，將25號吸潮紙尖輕輕插入牙周袋底，遇阻力即止，停留1 min取出，如被血或唾液污染，則棄除。將所取紙尖放入EP管中，加入300 μ L PBS緩沖液，放置于-80 ℃冰箱保存備用。

1.3.2 血清收集：采集2 mL外周血，充分凝血后，2 000 r/min 離心20 min、收集上清，-80 ℃保存待檢。

1.4 脂聯素與內脂素的檢測

將待測樣本于室溫下解凍20 min，4 ℃、3 000 r /min離心10 min，離心后取上清液待查，采用人脂聯素、內脂素ELISA試劑盒，檢測血清及齦溝液中脂聯素與內脂素的水平，嚴格按照試劑盒說明書檢測，測定吸光度值，并根據標準曲線計算出脂聯素與內脂素的濃度。

1.5 統計學分析

采用SPSS 17.0進行統計學分析，數據用x-±s表示，若每組資料完全符合正態分布且方差齊，采用單因素方差分析 （One-way ANOVA） ；不符合則采用秩和檢驗，檢測水準為雙側α=0.05；組間采用LSD檢驗，P ＜ 0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 研究對象一般資料的比較

各組患者在年齡、性別方面差異無統計學意義（P ＞ 0.05） ，見表1。

表1 各組一般情況的比較 （±s）Tab.1 Comparison of basic information in each group （±s）

表1 各組一般情況的比較 （±s）Tab.1 Comparison of basic information in each group （±s）

Item H group CP group OB group OB+CP group Age （year）44.50±7.8049.25±10.5947.75±9.0149.50±8.57 Sex ［n （%）］Male 8（40） 10（50） 13（65） 11（55）Female 12（60） 10（50） 7（35） 9（45）

2.2 研究對象的臨床指標

本研究中CP組患者與OB+CP組患者PD、CAL、GI、SBI均顯著高于H組及OB組 （P ＜ 0.05） ，OB+CP組患者牙周臨床指數高于CP組患者 （P ＜ 0.05） ，OB+CP 組及 OB組BMI高于CP組及H組 （P ＜ 0.05） ，OB組與H組患者牙周臨床指數差異無統計學意義（P ＞ 0.05） ，OB+CP組與OB組患者BMI差異無統計學意義 （P ＞ 0.05），CP組與H組患者BMI差異無統計學意義 （P ＞ 0.05） ，見表2。

2.3 脂聯素和內脂素在血清及齦溝液中的表達水平

CP組、OB組及H組齦溝液中脂聯素的濃度高于OB+CP組 （P ＜ 0.05） 。CP組、OB組及OB+CP組血清中脂聯素的濃度低于健康對照組 （P ＜ 0.05） ，OB+CP組血清中脂聯素的濃度低于CP組及OB組 （P ＜0.05）。CP組、OB組及H組齦溝液中內脂素的濃度低于OB+CP組，組間比較差異無統計學意義 （P ＞0.05） 。CP組、OB組及H組血清中內脂素的濃度低于OB+CP組 （P ＜ 0.05） 。H組血清中內脂素的濃度低于CP組及OB組，3組間比較差異無統計學意義 （P ＞0.05） 。

表2 各組臨床指標的比較Tab.2 Comparison of clinical indicators in each group

圖1 脂聯素和內脂素在齦溝液及血清中的表達Fig.1 The expression of adiponectin and visfatin in the GCF and serum

3 討論

牙周炎不僅僅是口腔的局部炎癥，同時也與全身的疾病和健康狀況相關。肥胖作為牙周炎的危險因素，主要通過促進氧化應激的發生和炎性細胞因子的分泌來破壞牙周組織的健康［5-6］。脂聯素是由脂肪細胞特異性分泌的一種蛋白質，在肥胖患者體內含量較低［7］。同時脂聯素作為一種保護性因子，在促進抗炎介質排放的同時也能抑制促炎細胞因子的刺激［8］。有研究［9-10］發現，脂聯素在促進白細胞介素 （interleukin，IL） 10分泌的同時能夠抑制活性氧的表達，從而對牙周組織起到一定的保護作用。

內脂素是由內臟脂肪細胞分泌的蛋白質細胞因子，是某些炎癥相關疾病的重要介質［11］。近年來，有學者［12］發現，內脂素在牙周組織中有較高的表達，并且在牙周炎的發病機制中發揮重要的作用。體外實驗的研究［13-16］表明，內脂素能夠促進炎癥細胞分泌腫瘤壞死因子α （tumor necrosis factor α，TNF-α）、IL-6、IL-1β，反之，TNF-α、IL-6、IL-1β也能上調內脂素的表達。 肥胖和牙周炎均與某些炎性細胞因子的分泌有關，故二者的相關性可能通過中間的炎癥機制聯系起來。

本研究結果顯示，OB+CP組血清中脂聯素的降低幅度最大。提示脂聯素作為抑炎性細胞因子，在肥胖伴牙周炎患者體內的表達水平呈降低趨勢，與齦溝液中脂聯素的表達水平具有一致性。因此，推測肥胖和牙周炎對患者齦溝液及血清中脂聯素的降低具有協同效應，肥胖可能通過抑制某些抑炎性因子的分泌而影響牙周炎的發生發展。SUPANEE等［17］研究發現肥胖以及重度牙周炎患者血漿中脂聯素的濃度低于體質量正常以及輕、中度牙周炎者，而C反應蛋白、瘦素以及細胞間黏附分子等促炎因子的含量較高。伴放線放線桿菌是牙周炎的主要致病菌之一，能產生多種毒力因子，脂聯素能夠抑制伴放線放線桿菌的活性，本研究中肥胖伴牙周炎患者血清中脂聯素濃度的降低，可能改變了機體對伴放線放線桿菌的免疫應答，同時也降低了免疫球蛋白抗體對牙周組織的保護性作用，使肥胖患者更容易罹患牙周炎。脂聯素在OB+CP組的表達低于OB組及CP組患者，OB組脂聯素的濃度與CP組相比，無統計學差異，提示肥胖與牙周炎雖分別為全身和口腔局部的炎癥性疾病，但局部炎癥反應與全身炎癥反應相互促進，從而造成OB+CP組患者脂聯素的表達水平最低，使肥胖作為危險因素加快了牙周炎的發展進程。

TABARI等［18］研究發現牙周炎患者唾液中內脂素的濃度高于牙周健康者，且唾液中內脂素的濃度與患者CAL的水平呈正相關。本研究檢測內脂素其在肥胖及牙周炎患者血清及齦溝液中的表達，發現內脂素在H組、OB組、CP組、OB+CP組患者齦溝液中濃度較小，而在各組患者的血清中含量較高。結果顯示，OB+CP組患者血清中內脂素的濃度較OB組、CP組以及H組高，OB組與CP組血清中內脂素的表達水平較H組有所升高，但無統計學差異。提示影響因素的疊加，使肥胖伴牙周炎患者的固有免疫機制受到影響，從而使全身對炎癥的反應水平升高。OB組、CP組較H組血清中內脂素的含量高，這可能是由于牙周袋內牙周致病菌及其毒性產物刺激牙周組織產生高濃度的促炎因子，這些促炎因子可通過牙周袋內上皮進入血液循環，從而上調血清中內脂素的表達。肥胖患者的脂肪組織除產生內脂素、TNF-α、IL-6外，還產生瘦素、抵抗素、C反應蛋白等促炎因子，這些促炎因子與內脂素相互作用，使相應的炎癥反應增強，這可能是肥胖患者易患牙周炎的另一因素。此結論仍需其他方面的研究進一步證實，增強研究結果的可靠性。

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Expression of Adiponectin and Visfatin in the Gingival Crevicular Fluid and Serum of Patients with Obesity and Chronic Periodontitis

XU Danni，JIN Ying，WANG Yue，SONG Liming，LIN Xiaoping
（Department of Stomatology，Shengjing Hospital，China Medical University，Shenyang 110004，China）

ObjectiveTo investigate the expression levels of adiponectin and visfatin in the gingival crevicular fluid （GCF） and serum of patients with obesity and chronic periodontitis.MethodsThe study included 80 patients. Among them，20 were healthy controls （H group） ，20 had periodontitis （CP group） ，20 had obesity （OB group） ，and 20 had both obesity and periodontitis （OB+CP group） . The patients’ baseline information and clinical parameters were recorded，and the GCF and serum were collected. The concentration of adiponectin and visfatin in the GCF and serum were then assayed using ELISA. Use the SPSS 17.0 software package for statistical analysis.ResultsThe concentration of adiponectin in the serum of the CP group，the OB group，and the OB+CP group were significantly lower than that of the H group （P ＜ 0.05） . The concentration of adiponectin in the serum of the OB+CP group was lower than that of both the CP and OB groups （P ＜ 0.05） . The concentration of adiponectin in the GCF of the CP group，the OB group，and the H group were higher than that of the OB+CP group （P ＜ 0.05） . The concentration of adiponectin in the GCF of the CP group，the OB group，and the H group were lower than that of the OB+CP group （P ＜ 0.05） .ConclusionObesity may aggravate the destruction of periodontal tissue by inhibiting the expression of adiponectin and promoting the expression of visfatin.

obesity； periodontitis； adiponectin； visfatin

R781.4

A

0258-4646 （2017） 12-1129-04

http://kns.cnki.net/kcms/detail/21.1227.R.20171130.1814.028.html

10.12007/j.issn.0258-4646.2017.12.015

胥丹妮 （1991-） ，女，醫師，碩士研究生.

林曉萍，E-mail：xiaoping_ba@126.com

2017-06-02

網絡出版時間：2017-11-30 18:14

（編輯 于 溪）