8個(gè)省14個(gè)產(chǎn)地的木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量比較與相關(guān)性分析

丁瑜瀟，呂偉旗，沈宏偉（麗水市人民醫(yī)院藥劑科，浙江麗水323000）

8個(gè)省14個(gè)產(chǎn)地的木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量比較與相關(guān)性分析

丁瑜瀟＊，呂偉旗，沈宏偉#（麗水市人民醫(yī)院藥劑科，浙江麗水323000）

目的：為木鱉子良種選育與高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)栽培提供參考。方法：在2015年版《中國(guó)藥典》（一部）等文獻(xiàn)基礎(chǔ)上，優(yōu)化測(cè)定木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量的高效液相色譜（HPLC）法；比較8個(gè)省14個(gè)產(chǎn)地的木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量并進(jìn)行聚類(lèi)分析；采用SPSS 17.0軟件分析海拔、經(jīng)緯度與木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量間的相關(guān)性。結(jié)果：木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯質(zhì)量濃度在0.05～0.5 mg/mL范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系，回歸方程為Y＝4 361.95X+67.380 8（R2＝0.999 7）；定量限為15.62 ng，檢測(cè)限為4.67 ng；平均回收率為99.76%（RSD＝1.36%，n＝9）。8個(gè)省14個(gè)產(chǎn)地的木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量存在極顯著差異（P＜0.01）。根據(jù)聚類(lèi)分析結(jié)果，將8個(gè)省14個(gè)產(chǎn)地的木鱉子劃分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ4個(gè)類(lèi)群，Ⅲ與Ⅳ類(lèi)群木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量較高，包括廣西壯族自治區(qū)平南縣、貴州省江口縣、貴州省德江縣、福建省建陽(yáng)區(qū)與湖南省會(huì)同縣5個(gè)產(chǎn)地，其中廣西壯族自治區(qū)平南縣、貴州省江口縣、貴州省德江縣、湖南省會(huì)同縣屬于高海拔、低經(jīng)緯度地區(qū)，福建省建陽(yáng)區(qū)屬于高海拔地區(qū)。木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量與海拔呈正相關(guān)，與經(jīng)度、緯度呈負(fù)相關(guān)。結(jié)論：測(cè)定木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量的HPLC法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，所測(cè)8個(gè)省14個(gè)產(chǎn)地的木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量均達(dá)到2015年版《中國(guó)藥典》（一部）標(biāo)準(zhǔn)，廣西壯族自治區(qū)平南縣、貴州省江口縣、貴州省德江縣、湖南省會(huì)同縣等低經(jīng)緯度、高海拔地區(qū)栽培有利于積累木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯成分。

木鱉子；絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯；產(chǎn)地；相關(guān)性

木鱉子系葫蘆科多年生蔓性植物木鱉[Momordica cochinchinensis（Lour.）Spreng.]的干燥成熟種子，別名漏苓子、藤桐子、木蟹等。木鱉子去殼取仁入藥，性涼，味苦、微甘，有毒，歸肝、脾胃經(jīng)，具有散結(jié)消腫、攻毒療瘡等功效，臨床用于治療瘡瘍腫毒、乳癰、瘰疬、痔瘺、禿瘡等癥[1-2]。藥理學(xué)研究表明，木鱉子具有抗腫瘤、降壓、抗氧化、抗炎鎮(zhèn)痛、抗病毒、抗菌殺螨等作用[3-9]。木鱉子主要分布在浙江、安徽、湖南、廣西壯族自治區(qū)、江蘇、江西、貴州等地區(qū)，因栽培地生態(tài)環(huán)境各異，不同產(chǎn)地木鱉子在物候期、生態(tài)適應(yīng)性、農(nóng)藝性狀、有效成分含量積累等方面存在差異。絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯是2015年版《中國(guó)藥典》（一部）規(guī)定的木鱉子主要活性成分。據(jù)此，筆者收集了全國(guó)主要產(chǎn)區(qū)8個(gè)省14個(gè)產(chǎn)地的木鱉子樣品，采用高效液相色譜（HPLC）法對(duì)木鱉子樣品中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯的含量進(jìn)行測(cè)定，并分析海拔、經(jīng)緯度與絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量間的相關(guān)性，以期為木鱉子良種選育與高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)栽培提供參考。

1 材料

1.1 儀器

Agilent 1260 Infinity高效液相色譜儀（美國(guó)Agilent公司）；Milli-Q Academic超純水儀（美國(guó)Millipore公司）；DK-S24型電熱恒溫水浴鍋、DGG-9070型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）；GT10-2型高速離心機(jī)（北京時(shí)代北利離心機(jī)有限公司）；RE-5000B型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海一科儀器有限公司）；SHB-Ⅲ型臺(tái)式循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）；FW100型中草藥粉碎機(jī)（天津泰斯特儀器有限公司）；S210型臺(tái)式pH計(jì)、MS型電子分析天平（瑞士梅特勒-托利多公司）。

1.2 藥材、藥品與試劑

2016年2－4月采集浙江、安徽、福建、廣西壯族自治區(qū)、貴州、江蘇、江西、湖南等地野生木鱉子藥材14批，每批10份，每份15株，經(jīng)麗水市人民醫(yī)院沈宏偉主任藥師鑒定為葫蘆科植物木鱉[Momordica cochinchinensis（Lour.）Spreng.]的干燥種子，詳見(jiàn)表1。絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品（上海源葉生物科技有限公司，批號(hào)：2016B21199，純度：≥99.5%）；乙腈（色譜級(jí)，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：201540064184）；石油醚、甲醇、氯仿、濃硫酸等試劑均為分析純，水為蒸餾水。

表1 8個(gè)省14個(gè)產(chǎn)地木鱉子藥材采集信息Tab 1Information of M.cochinchinensis medicinal material from 14 production places of 8 provinces

2 方法

2.1 絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量測(cè)定方法

按文獻(xiàn)[1]方法測(cè)定含量。

2.1.1 對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取100℃干燥至恒質(zhì)量的絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品50 mg，置于100 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，即為對(duì)照品溶液。

2.1.2 樣品溶液的制備將烘干至恒質(zhì)量的木鱉子，去殼取仁，粉碎過(guò)60目篩。精密稱(chēng)取藥材粉末1 g，加石油醚-氯仿溶液（V∶V＝1∶1）50 mL，75℃索氏提取110 min，棄石油醚-氯仿溶液，濾紙筒揮盡溶劑后置于圓底燒瓶中，加60%甲醇100 mL，80℃加熱回流3 h。旋轉(zhuǎn)蒸干溶劑，加水10 mL溶解殘?jiān)訚饬蛩?.6 mL，密閉封口，沸水浴2 h，冷卻至室溫，棄濾液。用適量甲醇溶解殘?jiān)?0 mL棕色量瓶中，用硫酸調(diào)節(jié)pH至2.0，搖勻，50℃水浴中放置3 h，冷卻至室溫，甲醇定容至刻度，搖勻?yàn)V過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.1.3 色譜條件色譜柱：Agilent Eclipse SB-C18（250 mm×4.6 mm，4.6 μm）；流動(dòng)相：乙腈（A）-0.3%乙酸水（B），梯度洗脫（0～5 min，95%A～83%A；5～15 min，83%A～80%A；15～25 min，80%A～70%A；25～65 min，70%A）；流速：1.0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：203 nm；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：25 μL。

2.1.4 線性關(guān)系及定量限考察將標(biāo)準(zhǔn)品溶液稀釋為0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg/mL的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，過(guò)0.45 μm有機(jī)微孔濾膜，按“2.1.3”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定。以峰面積（y）為縱坐標(biāo)、標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度（x）為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性方程為y＝4 361.95x+67.380 8（R2＝0.999 7），線性范圍為0.05～0.5 mg/mL。取標(biāo)準(zhǔn)品溶液適量，等倍逐步稀釋?zhuān)础?.1.3”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣測(cè)定6次，記錄峰面積。結(jié)果，當(dāng)信噪比為10∶1時(shí)，定量限為15.62 ng；當(dāng)信噪比為3∶1時(shí)，檢測(cè)限為4.67 ng。

2.1.5 穩(wěn)定性考察取M7樣品，按“2.1.2”項(xiàng)下方法制備樣品溶液后，放入適宜的開(kāi)口容器中，置于以下條件保存：①高溫度條件（40℃，避光）；②高濕度條件[室溫，相對(duì)濕度為（90±5）%，避光]；③強(qiáng)光照射條件[室溫，在（4 500±500）lx光照強(qiáng)度下照射][10]。分別于保存0、2、4、6、8、10、12、24 h時(shí)進(jìn)樣，按“2.1.3”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定峰面積，計(jì)算得各處理?xiàng)l件下絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯峰面積的RSD值。結(jié)果，高溫度、高濕度、強(qiáng)光照射試驗(yàn)RSD分別為0.26%、0.67%、18.96%（n＝8），表明樣品溶液在強(qiáng)光照射下不穩(wěn)定，在高溫、高濕、避光條件下保存24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.1.6 重復(fù)性考察取M7樣品6份，按“2.1.2”項(xiàng)下方法制備樣品溶液，按“2.1.3”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，計(jì)算得絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯平均含量為0.306 5%，RSD為1.21%（n＝6），表明試驗(yàn)重復(fù)性良好。

2.1.7 精密度考察取同一標(biāo)準(zhǔn)品溶液，按“2.1.3”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次，計(jì)算得絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯峰面積RSD為0.66%（n＝6），表明儀器精密度良好。

2.1.8 加樣回收率試驗(yàn)取已知絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量的M7樣品，分別加入標(biāo)準(zhǔn)品適量，按“2.1.2”項(xiàng)下方法制備樣品溶液（配制成低、中、高3種濃度梯度），按“2.1.3”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，計(jì)算加樣回收率（%）＝（C－A）/B×100%。式中，A為樣品中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量，B為加入標(biāo)準(zhǔn)品含量，C為實(shí)際測(cè)得量]。結(jié)果，低、中、高3種濃度的平均加樣回收率分別為100.23%、99.90%、99.15%，RSD分別為0.85%、1.43%、1.94%（n＝9）。

2.2 數(shù)據(jù)分析與處理

采用SPSS 17.0與DPS 9.05軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。組間均數(shù)比較采用單因素方差分析；聚類(lèi)分析采用類(lèi)平均法；相關(guān)性分析采用Bivariate法。

圖1 高效液相色譜圖Fig 1HPLC chromatograms

3 結(jié)果與分析

3.1 HPLC法測(cè)定木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量的方法優(yōu)化

（1）波長(zhǎng)選擇：對(duì)木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯色譜峰進(jìn)行全吸收光譜掃描時(shí)發(fā)現(xiàn)，在203 nm波長(zhǎng)處有最大吸收峰，與2015年版《中國(guó)藥典》（一部）木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量測(cè)定波長(zhǎng)一致，故選擇203 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。（2）提取方法：根據(jù)2015年版《中國(guó)藥典》（一部）與文獻(xiàn)[11-13]，對(duì)木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化。在索氏提取棄去石油醚-氯仿提取液后，分別考察加熱回流提取時(shí)間為2、3、4、5 h，提取溫度為60、70、80、90℃，甲醇體積分?jǐn)?shù)為50%、60%、70%、80%時(shí)對(duì)提取的影響。結(jié)果表明，木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯在60%甲醇中以80℃加熱回流提取3 h即可提取完全，操作簡(jiǎn)便，總提取時(shí)間較2015年版《中國(guó)藥典》（一部）減少2.17 h。（3）流動(dòng)相選擇：比較0.1%乙酸水、0.3%乙酸水、0.4%磷酸水與乙腈流動(dòng)相比例時(shí)發(fā)現(xiàn)，以乙腈-0.3%乙酸水為流動(dòng)相，按“2.1.3”項(xiàng)下梯度洗脫條件進(jìn)行洗脫，絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯出峰時(shí)間早、峰形好，分離度大于1.5，理論板數(shù)大于3 000，保留時(shí)間為24.12 min。高效液相色譜圖見(jiàn)圖1。

3.2 不同產(chǎn)地木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量比較與聚類(lèi)分析

8個(gè)省14個(gè)產(chǎn)地的木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量存在極顯著差異（P＜0.01），平均含量為0.330 0%，均達(dá)到2015年版《中國(guó)藥典》（一部）不低于0.25%的標(biāo)準(zhǔn)。湖南、貴州、廣西產(chǎn)木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量相對(duì)較高，其中湖南省會(huì)同縣產(chǎn)木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量最高，達(dá)0.421 5%；其次為浙江、江蘇、福建、江西；安徽產(chǎn)木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量較低，其中安徽省祁門(mén)縣木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量?jī)H為0.251 0%，詳見(jiàn)表2。

表2 8個(gè)省14個(gè)產(chǎn)地的木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量比較（±s，n＝3，%%）Tab2Comparisonofthecontentsofgypsogenin 3-O-β-D-glucuronic acid methyl ester in M.cochinchinensis from 14 production places of 8 provinces（±s，n＝3，%%）

表2 8個(gè)省14個(gè)產(chǎn)地的木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量比較（±s，n＝3，%%）Tab2Comparisonofthecontentsofgypsogenin 3-O-β-D-glucuronic acid methyl ester in M.cochinchinensis from 14 production places of 8 provinces（±s，n＝3，%%）

注：不同字母表示在P＜0.01水平存在極顯著差異Note：Different letters indicated significant differences at P＜0.01

絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量0.387 7±0.028 6B 0.421 5±0.030 9A 0.368 2±0.037 5C 0.395 2±0.038 2B 0.372 1±0.067 3C 0.298 7±0.032 1FG 0.337 1±0.042 1D編號(hào)產(chǎn)地編號(hào)產(chǎn)地M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7浙江省昌化鎮(zhèn)浙江省湍口鎮(zhèn)浙江省常山縣江蘇省宜興市安徽省祁門(mén)縣安徽省黟縣廣西壯族自治區(qū)鐘山縣絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量0.283 1±0.021 4H 0.290 1±0.013 9GH 0.321 6±0.018 4E 0.321 5±0.019 5E 0.251 0±0.024 7J 0.265 1±0.017 1I 0.306 5±0.056 5F M8 M9 M10 M11 M12 M13 M14廣西壯族自治區(qū)平南縣湖南省會(huì)同縣貴州省德江縣貴州省江口縣福建省建陽(yáng)區(qū)福建省浦城縣江西省廣豐區(qū)

以絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量為指標(biāo)對(duì)8個(gè)省14個(gè)產(chǎn)地的木鱉子進(jìn)行聚類(lèi)分析，根據(jù)歐式距離D2＝0.041的聚類(lèi)水平，將供試木鱉子劃分為4個(gè)類(lèi)群，見(jiàn)圖2。類(lèi)群Ⅰ共7個(gè)產(chǎn)地，包括浙江省昌化鎮(zhèn)、浙江省湍口鎮(zhèn)、廣西壯族自治區(qū)鐘山縣、福建省浦城縣、浙江省常山縣、江蘇省宜興市、江西省廣豐區(qū)，該類(lèi)群絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯平均含量適中，為0.308 4%；類(lèi)群Ⅱ共2個(gè)產(chǎn)地，均為安徽產(chǎn)地，絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯平均含量較低，僅為0.258 1%；類(lèi)群Ⅲ與類(lèi)群Ⅳ共5個(gè)產(chǎn)地，包括廣西壯族自治區(qū)平南縣、貴州省江口縣、貴州省德江縣、福建省建陽(yáng)區(qū)、湖南省會(huì)同縣，此2類(lèi)群絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量高，為0.388 9%。

圖28 個(gè)省14個(gè)產(chǎn)地木鱉子藥材聚類(lèi)分析圖Fig 2Cluster analysis diagram of M.cochinchinensismedicinalmaterialfrom14 production places of 8 provinces

3.3 海拔、經(jīng)緯度與絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量的相關(guān)性分析

8個(gè)省14個(gè)產(chǎn)地木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量與海拔、經(jīng)緯度間存在一定的相關(guān)性；海拔與木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.413 66；經(jīng)度、緯度與木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量均呈負(fù)相關(guān)，其中經(jīng)度相關(guān)系數(shù)為0.698 90，緯度相關(guān)系數(shù)為0.541 88，見(jiàn)表3。根據(jù)文獻(xiàn)[14-15]、8個(gè)省14個(gè)產(chǎn)地木鱉子平均海拔與經(jīng)緯度分布，將海拔＞450 m的地區(qū)定義為相對(duì)高海拔地區(qū)。結(jié)果，廣西壯族自治區(qū)平南縣、貴州省江口縣、貴州省德江縣、福建省建陽(yáng)區(qū)、湖南省會(huì)同縣、安徽省黟縣為相對(duì)高海拔地區(qū)，廣西壯族自治區(qū)鐘山縣、廣西壯族自治區(qū)平南縣、湖南省會(huì)同縣、貴州省德江縣、貴州省江口縣為相對(duì)低經(jīng)緯度地區(qū)。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，高海拔、低經(jīng)緯度地區(qū)栽培木鱉子有利于絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯成分的積累。

表3 木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量相關(guān)性分析結(jié)果Tab3Correlation analysisresultsofgypsogenin 3-O-β-D-glucuronic acid methyl ester in M.cochinchinensis

4 討論

目前市場(chǎng)上木鱉子藥材主要依靠采挖野生資源，人工栽培面積少，故收集并評(píng)價(jià)不同產(chǎn)地木鱉子有效成分含量對(duì)木鱉子良種選育與高產(chǎn)栽培具有重要意義[16]。中藥材的有效化學(xué)成分與生態(tài)因子存在相關(guān)性，海拔、經(jīng)緯度等生態(tài)因子可顯著影響中藥材有效成分積累[17-19]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，我國(guó)主要分布區(qū)木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量均符合2015年版《中國(guó)藥典》（一部）不低于0.25%的標(biāo)準(zhǔn)；8個(gè)省14個(gè)產(chǎn)地的木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量存在極顯著差異（P＜0.01），其中湖南、貴州、廣西產(chǎn)木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量較高，可作為木鱉子優(yōu)良種質(zhì)篩選與品種選育的備選種質(zhì)；木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量與海拔呈正相關(guān)，與經(jīng)緯度呈負(fù)相關(guān)，高海拔、低經(jīng)緯度栽培條件有利于木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯成分積累。聚類(lèi)分析結(jié)果顯示，8個(gè)省14個(gè)產(chǎn)地的木鱉子可劃分為4個(gè)類(lèi)群，其中類(lèi)群Ⅲ與類(lèi)群Ⅳ木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量較高，此2類(lèi)群中廣西壯族自治區(qū)平南縣、貴州省江口縣、貴州省德江縣、湖南省會(huì)同縣屬于高海拔、低經(jīng)緯度地區(qū)，福建省建陽(yáng)區(qū)屬于高海拔地區(qū)。

中藥材實(shí)際栽培應(yīng)綜合考慮有效成分含量、藥材產(chǎn)量、種質(zhì)生態(tài)適應(yīng)性差異、立地條件優(yōu)劣等多方面因素。從8個(gè)省14個(gè)產(chǎn)地的木鱉子種質(zhì)資源來(lái)看，高海拔地區(qū)溫差大，木鱉子開(kāi)花晚，種子生長(zhǎng)期相對(duì)較長(zhǎng)，這可能是促進(jìn)木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯成分積累的因素之一。根據(jù)文獻(xiàn)[9，20]，結(jié)合本試驗(yàn)結(jié)果可知，浙江、江蘇、江西、安徽、福建、貴州、廣西、湖南等地木鱉子生態(tài)適應(yīng)性較好，絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量滿(mǎn)足2015年版《中國(guó)藥典》（一部）要求。因此可知，在大田栽培木鱉子時(shí)，選擇高海拔、低經(jīng)緯度地區(qū)栽培有利于提高木鱉子中絲石竹皂苷元3-O-β-D-葡糖醛酸甲酯含量。

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Content Comparison and Correlation Analysis of Gypsogenin 3-O-β-D-glucuronic Acid Methyl Ester in Momordica cochinchinensis from 14 Production Places of 8 Provinces

DING Yuxiao，LYU Weiqi，SHEN Hongwei（Dept.of Pharmacy，Lishui People’s Hospital，Zhejiang Lishui 323000，China）

OBJECTIVE：To provide reference for variety breeding，high yield and high quality cultivation of Momordica cochinchinensis.METHODS：Based on Chinese Pharmacopoeia（2015 edition，VolⅠ），HPLC for determining the content of gypsogenin 3-O-β-D-glucuronic acid methyl ester in M.cochinchinensis was optimized，the contents of gypsogenin 3-O-β-D-glucuronic acid methyl ester in M.cochinchinensis from 14 production places of 8 provinces were compared，and cluster analysis was conducted.Correlation of longitude，latitude and altitude with content of gypsogenin 3-O-β-D-glucuronic acid methyl ester in M.cochinchinensis was analyzed by SPSS17.0 software.RESULTS：Gypsogenin 3-O-β-D-glucuronic acid methyl ester in M.cochinchinensis showed good linear relationship in 0.05-0.5 mg/mL，regression equation was Y＝4 361.95X+67.380 8（R2＝0.999 7）；the limits of quantification and detection were 15.62 ng and 4.67 ng，respectively.Average recovery was 99.76%（RSD＝1.36%，n＝9）.The content of gypsogenin 3-O-β-D-glucuronic acid methyl ester in M.cochinchinensis from 14 production places of 8 provinces had extremely significant differences（P＜0.01）.Clustering analysis results indicated that M.cochinchinensis from 14 production places of 8 provinces were divided intoⅠ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳgroups.Contents of gypsogenin 3-O-β-D-glucuronic acid methyl ester in M.cochinchinensis ofⅢ，Ⅳgroups were relatively high，including Guangxi Pingnan，Guizhou Jiangkou，Guizhou Dejiang，F(xiàn)ujian Jianyang and Hunan Huitong，in which，Guangxi Pingnan，Guizhou Jiangkou，Guizhou Dejiang and Hunan Huitong had high altitude and low latitude，F(xiàn)ujian Jianyang had high altitude.The content of gypsogenin 3-O-β-D-glucuronic acid methyl ester in M.cochinchinensis was positively correlated with altitude，while negatively correlated with longitude and latitude.CONCLUSIONS：HPLC is simple，accurate and reproducible for determining the content of gypsogenin 3-O-β-D-glucuronic acid methyl ester in M.cochinchinensis，and the determined contents of gypsogenin 3-O-β-D-glucuronic acid methyl ester in M.cochinchinensis from 14 production places of 8 provinces have reached the standard of Chinese Pharmacopoeia（2015 edition，VolⅠ）.Cultivation in Guangxi Pingnan，Guizhou Jiangkou，Guizhou Dejiang，Hunan Huitong and other areas with high altitude and low latitude helps to improve the content accumulation of gypsogenin 3-O-β-D-glucuronic acid methyl ester in M.cochinchinensis.

Momordica cochinchinensis；Gypsogenin 3-O-β-D-glucuronic acid methyl ester；Production place；Correlation

R914.1；R931.6

A

1001-0408（2017）34-4821-05

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.34.18

＊藥師。研究方向：中藥材質(zhì)量分析與檢測(cè)。電話：0578-2292513。E-mail：cathy9393@163.com

#通信作者：主任藥師。研究方向：中藥成分分析。電話：0578-2292718。E-mail：lstracy1027@163.com

2017-02-26

2017-07-29）

（編輯：余慶華）