陰道微生態(tài)與高危型人乳頭瘤病毒感染對老年宮頸病變患者的影響及其關(guān)系

吳曉燕 許繼芹 朱立梅 劉亞瓊 洪 穎

(連云港市第一人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，江蘇 連云港 222000)

陰道微生態(tài)與高危型人乳頭瘤病毒感染對老年宮頸病變患者的影響及其關(guān)系

吳曉燕 許繼芹1朱立梅2劉亞瓊 洪 穎3

(連云港市第一人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，江蘇 連云港 222000)

目的探討陰道微生態(tài)與高危型人乳頭瘤病毒(HPV)感染對老年宮頸病變患者的影響及其相關(guān)性。方法選取老年宮頸病變患者100例作為宮頸病變組，另取同期體檢無宮頸病變健康老年人100例作為宮頸正常組。檢測兩組陰道微生態(tài)情況，同時檢測高危型HPV感染情況，采用Logistic逐步回歸方法分析兩者相關(guān)性。結(jié)果宮頸病變組乳酸桿菌陽性人數(shù)占比顯著低于宮頸正常組，陰道清潔度3～4級、念珠菌陽性人數(shù)占比均顯著高于宮頸正常組(均P<0.05)。宮頸病變組高危型HPV感染陽性率顯著高于對照組(P<0.05)。經(jīng)多因素Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，乳酸桿菌、陰道清潔度、念珠菌及高危型HPV感染均為影響宮頸病變的獨立危險因素(P<0.05)。結(jié)論老年宮頸病變患者具有明顯的陰道微生態(tài)失調(diào)情況，乳酸桿菌、陰道清潔度、念珠菌及高危型HPV感染均為影響宮頸病變的獨立危險因素。

宮頸病變；陰道微生態(tài)；高危型人乳頭瘤病毒；危險因素

人乳頭瘤病毒(HPV)感染可能是引發(fā)生殖道腫瘤的致病因素之一〔1〕，且HPV感染是導(dǎo)致宮頸病變發(fā)生的必要條件。生殖道感染的HPV亞型達30多種，主要分為高危型和低危型，其中高危型HPV持續(xù)感染更是導(dǎo)致宮頸病變發(fā)生的必要條件〔2〕。以往認為HPV感染多發(fā)于性生活活躍的中青年女性，然而近年來發(fā)現(xiàn)老年人HPV感染也不占少數(shù)，并在老年宮頸癌發(fā)病中起到重要作用〔3〕。同時，陰道中的微生態(tài)菌群、內(nèi)分泌機制及機體解剖結(jié)構(gòu)等構(gòu)成了整個微生態(tài)系統(tǒng)，多種微生物均在該系統(tǒng)中生存，陰道微生態(tài)失衡可能在宮頸病變的發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用〔4〕，但陰道微生態(tài)導(dǎo)致宮頸病變發(fā)生的具體機制尚未完全闡明。本研究旨在探討陰道微生態(tài)與高危型HPV感染對老年宮頸病變患者的影響及其相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選取2015年4月至2017年4月連云港市第一人民醫(yī)院收治的老年宮頸病變患者100例為宮頸病變組，另取同期體檢無宮頸病變健康老年人100例為宮頸正常組。納入標準：(1)宮頸病變組均經(jīng)組織病理學(xué)檢查確診為宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變，而宮頸正常組患者均經(jīng)組織病理學(xué)檢查確診無宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變；(2)患者既往均無頸椎疾病史；(3)入院30 d前未接受任何相關(guān)疾病的治療；(4)入院前72 h無性生活，無陰道用藥及陰道沖洗。排除標準：(1)伴有心、肝、腎等臟器功能嚴重障礙；(2)合并其他生殖器感染性疾病者；(3)伴有惡性腫瘤、免疫性疾病或接受免疫抑制劑治療者；(4)入院前14 d內(nèi)采用抗生素治療者。宮頸病變組年齡60～80〔平均(70.23±6.26)〕歲；體質(zhì)指數(shù)(BMI)16～25 kg/m2，平均(20.14±2.33)kg/m2；疾病類型：宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變Ⅰ級42例，Ⅱ級33例，Ⅲ級25例。宮頸正常組年齡60～81〔平均(69.43±6.35)〕歲；BMI 16～24 kg/m2，平均(20.67±2.24)kg/m2。兩組年齡、BMI等比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，存在可比性。患者均知情并簽署同意書，且經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準。

1.2研究方法 (1)采集標本：患者均取膀胱截石位，采用窺器將宮頸口充分暴露，使用無菌棉拭子取陰道側(cè)壁上1/3的適量分泌物置入試管中送至婦產(chǎn)科陰道微生態(tài)專用檢查室進行檢查。同時，采用專用宮頸刷取數(shù)圈陰道后穹窿與宮頸鱗-柱上皮交界部位，將采集到的標本進行保存并及時送檢驗科與病理科行相關(guān)檢查。(2)HPV感染檢測：采用雜交捕獲2代基因雜交信號放大系統(tǒng)(美國Digene公司生產(chǎn))進行檢測，具體操作嚴格根據(jù)試劑盒(購自上海萊特公司)說明書進行，同時監(jiān)測HPV DNA載量。

1.3陰道微生態(tài)評價標準〔5〕取陰道側(cè)壁上1/3的適量分泌物進行涂片，在高倍鏡下觀察5～8個視野，取平均值，乳酸桿菌<3個為陰性，3個及以上為陽性；陰道清潔度包括1～4級，等級越高表示患者陰道清潔度越差；細菌性陰道病包括陰性、弱陽性及陽性，其中弱陽性與陽性均計為陽性；念珠菌包括陽性、少量及陰性，將少量和陽性計為陽性；滴蟲感染包括陰性、陽性。

1.4觀察指標 觀察不同年齡段老年宮頸癌患者陰道微生態(tài)情況、高危型HPV感染情況。對比兩組陰道微生態(tài)情況、高危型HPV感染情況，分析影響宮頸病變的因素。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS20.0軟件進行χ2、t檢驗、Logistic逐步回歸分析。

2 結(jié) 果

2.1不同年齡宮頸癌患者陰道微生態(tài)情況、高危型HPV感染情況 宮頸病變組細菌感染32例，包括乳酸桿菌21例、念珠菌25例、滴蟲感染2例，其中乳酸桿菌、念珠菌共同感染16例；高危型HPV感染76例，細菌感染率及高危型HPV感染隨宮頸癌患者年齡的增加而降低。見表1。

表1 不同年齡段宮頸癌患者陰道微生態(tài)情況、高危型HPV感染情況〔n(%)〕

2.2兩組陰道微生態(tài)情況比較 宮頸病變組乳酸桿菌陽性率顯著低于宮頸正常組，陰道清潔度3～4級、念珠菌陽性率均顯著高于宮頸正常組(均P<0.05)。見表2。

2.3兩組高危型HPV感染情況比較 宮頸病變組患者高危型HPV感染陽性率為76.00%(76/100)，顯著高于宮頸正常組的21.00%(21/100，χ2=60.555，P=0.000)。

2.4影響宮頸病變的因素分析 以宮頸病變作為因變量，以上述有統(tǒng)計學(xué)差異的乳酸桿菌、陰道清潔度、念珠菌、高危型HPV感染納入Logistic逐步回歸分析，結(jié)果顯示乳酸桿菌、陰道清潔度、念珠菌及高危型HPV感染均為影響宮頸病變的獨立危險因素(P<0.05)。見表3。

表2 兩組陰道微生態(tài)情況比較〔n(%),n=100〕

表3 宮頸病變影響因素的Logistic逐步回歸

3 討 論

宮頸癌是女性生殖系統(tǒng)腫瘤之一，好發(fā)于45歲以上。發(fā)病周期較長，由上皮內(nèi)瘤變發(fā)展為宮頸癌往往需要數(shù)年時間。有學(xué)者認為高危型HPV持續(xù)感染是宮頸病變發(fā)生的必要條件，但臨床上仍有部分HPV感染的宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變患者可自行轉(zhuǎn)歸，并不會引發(fā)宮頸癌的發(fā)生〔6〕。正常情況下陰道中的厭氧菌與需氧菌比例一定，主要是起到維持陰道菌群正常的作用，是臨床上評定正常陰道菌群的標志。而陰道黏膜中存在多種免疫細胞，具有一定的免疫屏障作用，且陰道生態(tài)菌群對維持陰道自凈功能及宿主健康具有重要意義〔6〕。然而，老年人身體免疫力降低，尤其是絕經(jīng)期后雌激素水平下降，導(dǎo)致陰道菌群失調(diào)，從而增加了微生物入侵的風(fēng)險，進一步可能引發(fā)宮頸病變。有研究報道，陰道微生態(tài)的平衡被打破會導(dǎo)致陰道微環(huán)境固有的免疫防護機制被破壞，從而增加了HPV的異常黏附，進一步對上皮細胞造成損害〔7〕。但是對不同年齡老年宮頸癌患者陰道微生態(tài)情況、高危型HPV感染情況，現(xiàn)階段的研究較少。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)細菌感染率及高危型HPV感染隨宮頸癌患者年齡的增加而降低。其原因可能與老年女性性生活活躍程度降低有關(guān)。同時本研究結(jié)果表明陰道微生態(tài)的失衡可能導(dǎo)致了宮頸病變的發(fā)生。而乳酸桿菌的減少，念珠菌的增加均反映了陰道微生態(tài)失衡。其中乳酸桿菌在維持陰道正常的微生態(tài)系統(tǒng)中起著至關(guān)重要的作用，主要機制為防止病原菌或其他有機體的過度繁殖。而宮頸病變的發(fā)生會導(dǎo)致患者陰道中的糖原水平升高，從而為念珠菌等提供了適宜的生存環(huán)境，進一步促進了其生長和繁殖，最終導(dǎo)致微生態(tài)系統(tǒng)失衡，對患者的生命健康安全造成嚴重威脅〔8〕。韓玉等〔9〕研究報道也顯示，當患者抵抗力降低時，可能會使得陰道內(nèi)念珠菌感染風(fēng)險增加，進一步促使陰道菌群的平衡被打破，乳酸桿菌被抑制，從而可能引發(fā)生殖道炎癥，最終發(fā)展為宮頸病變。此外，本研究結(jié)果與國外研究報道一致〔10〕，說明了高危型HPV感染是導(dǎo)致宮頸病變發(fā)生的危險因素。另外，多因素Logistic回歸分析結(jié)果表明乳酸桿菌、陰道清潔度、念珠菌及高危型HPV感染可促進宮頸病變發(fā)生，是宮頸病變的獨立危險因素。同時也提示陰道微生態(tài)系統(tǒng)的失衡可能與HPV感染存在一定相關(guān)性。有研究報道〔11〕，陰道微生態(tài)平衡歸屬于機體免疫的組成之一，而HPV的感染和陰道微生態(tài)菌群存在密切相關(guān)，正常而言，陰道微生態(tài)菌群中HPV檢查均為陰性，但過度生長的厭氧菌和HPV感染有關(guān)，可引發(fā)宮頸病變。

1Wang L，Shen H，F(xiàn)eng B，etal.Reduction in the copy number and expression level of the recurrent human papillomavirus integration gene fragile histidine triad (FHIT) predicts the transition of cervical lesions〔J〕.PLoS One，2017；12(4)：e0175520.

2楊東曉，李紅娟，田曉娜，等.高危型 HPV 感染對宮頸病變組織 Th1 Th2相關(guān)指標表達的影響研究〔J〕.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2017；27(3)：657-9.

3趙麗雅，龐曉燕，陳青青，等.老年子宮頸高危型HPV感染與子宮頸病變的相關(guān)性分析〔J〕.中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2014；43(8)：691-3.

4黃 燕，吳曉寧，蒙亞晴，等.壯族婦女陰道微生態(tài)環(huán)境、血清葉酸水平與宮頸癌的關(guān)系〔J〕.廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2015；32(6)：954-5.

5馬玉蘭，迪麗努爾·安外爾，努爾古再麗·麥合木提，等.高危型人乳頭瘤病毒感染的宮頸脫落細胞中HPVL1蛋白表達及hTERC基因的擴增與宮頸病變的相關(guān)性研究〔J〕.中華臨床醫(yī)師雜志(電子版)，2017；11(3)：361-5.

6Bhat S，Kabekkodu SP，Varghese VK，etal.Aberrant gene-specific DNA methylation signature analysis in cervical cancer〔J〕.Tumour Biol，2017；39(3)：1010428317694573.

7鄭麗麗，鄭麗媛，陳海英，等.高危型人乳頭狀瘤病毒、人巨細胞病毒、人皰疹病毒4型、解脲脲原體感染與宮頸病變的關(guān)系〔J〕.中國婦幼保健，2017；32(1)：37-9.

8Salih MM，F(xiàn)tes AH，Khalifa MA，etal.Cervical cytopathological changes among women with vaginal discharge attending teaching hospital〔J〕.J Cytol，2017；34(2)：90-4.

9韓 玉，艾桂娟，韓 萍，等.陰道微生態(tài)與高危型人乳頭瘤病毒感染和宮頸病變的相關(guān)性分析〔J〕.中國計劃生育和婦產(chǎn)科，2016；8(3)：66-8，78.

10Grozdanov P，Hadjidekova S，Dimova I，etal.Characterization of genomic changes in the cervical pre-cancerous lesions and tumors inducedby different types of human papillomaviruses〔J〕.Virusdisease，2016；27(3)：271-6.

11劉華放，劉 敏，許艷麗，等.HIV陽性婦女高危型HPV感染及子宮頸細胞學(xué)篩查的臨床分析〔J〕.中華婦產(chǎn)科雜志，2016；51(10)：734-8.

R711

A

1005-9202(2017)23-5930-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.23.085

1 常州市第一人民醫(yī)院婦產(chǎn)科 2 連云港市第一人民醫(yī)院檢驗科 3 南京鼓樓醫(yī)院婦產(chǎn)科

洪 穎(1960-)，女，主任醫(yī)師，主要從事HPV感染與老年宮頸疾病研究。

吳曉燕(1976-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事HPV感染與老年宮頸疾病研究。

〔2017-08-26修回〕

(編輯 袁左鳴/滕欣航)