甲硝唑口含片的含量測定

吳瓊 王丹 杜利月 徐振興

摘 要： 目的：建立甲硝唑口含片含量的測定方法。方法：采用紫外分光光度法測定甲硝唑口含片的含量，以稀鹽酸（9→1000）為對照，在277nm波長測定吸光度，計算甲硝唑的含量。結果：甲硝唑在10.44～

含量實驗是評價口服固體制劑內在質量的一種必要手段，對保證藥物能從制劑中順利溶出而發揮療效起到十分重要的作用，也是新藥評審的重要依據[1]。甲硝唑（Metronidazole，MNZ）是在20世紀50年代末人工合成的硝基咪唑類藥物，作為治療厭氧菌的重要藥物，目前上市有普通片劑、泡騰片、注射液、栓劑、膠囊劑等制劑用于臨床疾病的治療[2]。但尚未見有甲硝唑口含片上市，為了方便口腔厭氧菌感染的患者用藥和疾病的治療，豐富MNZ的制劑，筆者采用矯味制劑技術，將甲硝唑原料制備成了甲硝唑口含片[3]。筆者參考相關文獻[4-8]，采用紫外分光光度法，測定了甲硝唑口含片含量，并通過方法學驗證了含量測定方法科學性。

關鍵詞： 甲硝唑口含片 含量 測定

中圖分類號：R943 文獻標識碼：A 文章編號：1003-9082（2016）05-0282-01

一、材料

1.儀器 Carry-100紫外可見分光光度計（美國瓦里安儀器有限公司）；ZPY1036型旋轉式壓片機（上海天祺制藥機械有限公司）；DZF-6020真空干燥箱（上海基瑋試驗儀器設備有限公司）；TE214S型電子分析天平（德國賽多利斯）。

2.藥品與試劑 甲硝唑對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：090806，純度：99.90%）；甲硝唑原料（宜昌長江藥業有限公司，批號：20140162）；甲硝唑口含片（自制，規格：100mg/片）；其他試劑均為分析純。

二、方法與結果

1.甲硝唑口含片的制備 參照杜利月[3]“甲硝唑口含片制備工藝研究”中制備甲硝唑口含片，取甲硝唑原料和輔料分別粉碎，過100目篩，備用。按處方量稱取已粉碎好的甲硝唑200g，蔗糖40g，甘露醇10g，阿斯巴甜20g，混合均勻后加入適量的蒸餾水制軟材，20目篩制濕顆粒，60℃減壓干燥，16目篩整粒，邊攪拌邊噴入檸檬香精，密封保存24h，再將其置于混合機中，加入干顆粒重量0.2%的羧甲基淀粉鈉和0.5%的硬脂酸鎂，混勻后，測定含量，計算片重，壓片，備用。重復制備三批，批號編訂為：20150501、20150502、20150503。

2.測定波長的選擇 精密稱取120℃干燥至恒重的甲硝唑對照品26.1mg置于50ml容量瓶中，以0.1mol/L鹽酸使其溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得1 ml含甲硝唑對照品522.0μg的對照品標準溶液。精密量取上述甲硝唑標準溶液2.5ml置于25ml容量瓶中，以0.1mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻作為測試液，以溶劑作為空白對照，采用瓦里安Carry-100紫外分光光度計在200～800nm范圍內進行掃描，確定最大吸收波長[4，5]。甲硝唑對照品的掃描圖見圖1。由圖可知，甲硝唑在277nm波長處有最大吸收。

圖1 甲硝唑對照品紫外吸收掃描圖

3.干擾性試驗 分別按處方比例取輔料加入蒸餾水（潤濕劑）適量制備成軟材，制濕顆粒，干燥，整粒，加檸檬香精，密閉24h，加入羧甲基淀粉鈉和硬脂酸鎂混合均勻，壓片，制備成不含甲硝唑的空白樣品片，備用。以稀鹽酸（9→1000）為溶劑、轉速為100r/min測定含量。在溶出60min時，取樣5ml，濾過，取2ml續濾液置于適宜的容量瓶中，加稀鹽酸（9→1000）稀釋適宜倍數，備用。取上述混合液，在200～800 nm的波長范圍內進行掃描[5，6]。結果表明在制備甲硝唑口含片過程中加入的輔料不干擾在277 nm波長處測定本品的含量，詳見圖2。

圖2 空白輔料紫外吸收掃描圖

4.線性關系考察 精密量取本章節“2.2測定波長的選擇”項下制備的標準溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml于25ml容量瓶中，以0.1mol/L鹽酸溶液定容，測定吸光度（A），將濃度（C）對吸光度（A）進行線性回歸，得：A=5.554×10-3C + 25.377×10-2，相關系數r=0.9995。回歸方程在研究的濃度范圍10.44～62.64μg/ml，線性關系良好[6]。

5.精密度試驗 連續測定“2.4線性關系考察”項下41.76μg/ml的溶液的吸光度，測定6次的平均吸光度為0.35（RSD為0.41%，n=6），表明方法精密度好。

6.回收率試驗 精密稱定甲硝唑對照品適量，按照處方比加入一定的輔料和鹽酸（9→1000），搖勻，配置成高、中、低三種不同濃度的甲硝唑對照品溶液，每種濃度平行配置三份，樣品過濾后，在最大波長處測定吸光度，計算回收率[7]，結果見表1。

表1回收率試驗結果（n=3）

7.穩定性試驗 取同一批甲硝唑口含片（批號：20150503）粉末適量，加稀鹽酸（9→1000）稀釋至適宜倍數，搖勻備用。以稀鹽酸（9→1000）為對照，在0、2、4、6、8、10、12h時，取樣在最大吸收波長處測定吸光度[5，7-8]。結果顯示，甲硝唑在溶出液介質中放置0～8h時吸光度（RSD為0.19%，n=15）基本穩定不變，其在8h之內的穩定性較好。

8.樣品的含量測定 分別取三批自制甲硝唑口含片粉末適量，每批取6個樣，加稀鹽酸（9→1000）稀釋至適宜倍數，搖勻，以稀鹽酸（9→1000）為對照，在277nm波長處測定吸光度[5，7-8]。三批甲硝唑口含片的測定結果分別為：（99.4±0.22）%（RSD為0.21%，n=6）、（99.9±0.26）% （RSD為0.25%，n=6）、（100.4±0.18）% （RSD為0.23%，n=6）。

三、討論

此種含量測定方法可以簡單、快速的測定出甲硝唑口含片中主藥含量，適合于小批量多批次生產時的快速含量測定，含量的成本低，不但設備操作簡單易上手，而且相對于高效液相色普法測定含量的設備的投入較少。但是此種含量的定的方法有利于節約生產企業的生產成本。此外，本課題組參照中國藥典中甲硝唑片含量測定方法[2]，考察了多種含量測定方法的方法學驗證，包括檢測波長、精密度、回收率、線性方程、干擾實驗、穩定性等，優化了甲硝唑口含片含量的測定方法。

綜上所述，本試驗建立的甲硝唑口含片測定方法科學合理、簡便易行、結果準確，可用于甲硝唑口含片的含量測定。

參考文獻

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