幾種單胞藻對(duì)太平洋真寬水蚤生物學(xué)特性的影響

夏立萍，景 斐，胡利騰，朱愛(ài)意，張建設(shè)

(浙江海洋大學(xué)海洋科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，國(guó)家海洋設(shè)施養(yǎng)殖工程技術(shù)研究中心，浙江舟山 316022)

幾種單胞藻對(duì)太平洋真寬水蚤生物學(xué)特性的影響

夏立萍，景 斐，胡利騰，朱愛(ài)意，張建設(shè)

(浙江海洋大學(xué)海洋科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，國(guó)家海洋設(shè)施養(yǎng)殖工程技術(shù)研究中心，浙江舟山 316022)

在靜水實(shí)驗(yàn)條件下，研究了不同餌料種類(lèi)和濃度對(duì)太平洋真寬水蚤存活率、產(chǎn)糞數(shù)和產(chǎn)卵量的影響。結(jié)果表明：在食物碳含量為1.0 mgC/L的條件下，不同餌料投喂后，太平洋真寬水蚤的存活率、產(chǎn)糞數(shù)和產(chǎn)卵量有明顯的差異(P＜0.05)。投喂亞心形扁藻、中肋骨條藻和三角褐指藻的存活率高于球等鞭金藻和小球藻(P＜0.05)；投喂中肋骨條藻的產(chǎn)糞數(shù)明顯高于投喂其他4種單胞藻的產(chǎn)糞數(shù)(P＜0.05)；投喂亞心形扁藻和中肋骨條藻的產(chǎn)卵量明顯高于小球藻(P＜0.05)，其他餌料種類(lèi)的產(chǎn)卵量無(wú)顯著差異(P＞0.05)。實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步研究了不同濃度亞心形扁藻和中肋骨條藻對(duì)太平洋真寬水蚤生物學(xué)的影響，結(jié)果表明：不同濃度的亞心形扁藻對(duì)太平洋真寬水蚤的產(chǎn)卵量無(wú)顯著影響(P＞0.05)；不同濃度的中肋骨條藻對(duì)太平洋真寬水蚤的存活率、產(chǎn)糞數(shù)和產(chǎn)卵量差異性顯著，且隨著濃度的升高其存活率、產(chǎn)糞數(shù)和產(chǎn)卵量逐漸減少(P＜0.05)。投喂亞心形扁藻和中肋骨條藻餌料濃度為2.0 mgC/L時(shí)效果最好，表明此濃度條件下的亞心形扁藻和中肋骨條藻是太平洋真寬水蚤相對(duì)適宜的餌料，可為人工培養(yǎng)太平洋真寬水蚤作為水產(chǎn)活體生物餌料奠定基礎(chǔ)。

橈足類(lèi)；太平洋真寬水蚤；單胞藻；生物學(xué)特性

海洋浮游動(dòng)物數(shù)量多、分布廣，不僅是海洋中主要的次級(jí)生產(chǎn)者，同時(shí)又是營(yíng)養(yǎng)再生者，能夠促進(jìn)海洋生態(tài)系統(tǒng)能量流動(dòng)和物質(zhì)循環(huán)，在海洋浮游生物食物網(wǎng)中扮演著重要角色[1-2]。橈足類(lèi)是海洋浮游動(dòng)物的重要組成部分，其生長(zhǎng)發(fā)育經(jīng)過(guò)卵-無(wú)節(jié)幼體-橈足幼體-成體等12個(gè)發(fā)育階段，個(gè)體大小范圍較廣，能夠滿(mǎn)足魚(yú)類(lèi)各個(gè)發(fā)育時(shí)期的餌料需求，是很多經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi)良好的活體餌料。橈足類(lèi)蛋白質(zhì)含量豐富，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值遠(yuǎn)高于輪蟲(chóng)和鹵蟲(chóng)，是一種非常有開(kāi)發(fā)潛力的優(yōu)質(zhì)活體餌料[3-4]。橈足類(lèi)主要的攝食對(duì)象是浮游單胞藻類(lèi)，藻類(lèi)的種類(lèi)、質(zhì)量對(duì)橈足類(lèi)的生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖等方面有重要影響。

太平洋真寬水蚤Eurytemora pacifica隸屬于哲水蚤目Calanoida、寬水蚤科Temoridae、真寬水蚤屬Eurytemora，是低鹽區(qū)十分常見(jiàn)的暖水性沿岸橈足類(lèi)物種之一[5]，是舟山海域季節(jié)性?xún)?yōu)勢(shì)種之一。目前，國(guó)內(nèi)外已經(jīng)開(kāi)展了UV-B輻射[6]、重金屬[7]等生態(tài)因子對(duì)太平洋真寬水蚤存活、發(fā)育的研究，而餌料種類(lèi)對(duì)太平洋真寬水蚤生物學(xué)特性的影響尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究分析了5種單胞藻餌料對(duì)太平洋真寬水蚤存活、產(chǎn)卵及代謝的影響，并進(jìn)一步研究了高濃度餌料對(duì)太平洋真寬水蚤存活、產(chǎn)卵及代謝影響，為開(kāi)發(fā)太平洋真寬水蚤作為水產(chǎn)活體生物餌料奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 單胞藻的培養(yǎng)

采用LEVENS等[8]的方法，將0.45 μm濾膜過(guò)濾的鹽度為30的海水加入HClO(0.04%，V：V)處理24 h，然后加入硫代硫酸鈉(0.05 g/L)處理24 h，曝氣24 h后加入f/2或f/2-Si培養(yǎng)基備用。取處于指數(shù)生長(zhǎng)期的藻種接種，培養(yǎng)溫度為21℃，光照強(qiáng)度為2 000 lx，光周期D：L=12 h：12 h。每日在顯微鏡下用血球計(jì)數(shù)板檢測(cè)藻類(lèi)密度，當(dāng)藻類(lèi)處于指數(shù)生長(zhǎng)期時(shí)收集備用。

1.2 橈足類(lèi)的獲取與培養(yǎng)

實(shí)驗(yàn)所用的太平洋真寬水蚤于2017年2月采自舟山本島近海，通過(guò)持桿式、網(wǎng)目為300 μm淺水I型浮游生物網(wǎng)水平拖網(wǎng)捕獲。迅速轉(zhuǎn)移到實(shí)驗(yàn)室，放置解剖顯微鏡下分離、挑選出成熟的、附肢完整的太平洋真寬水蚤成體，置于裝有鹽度為30的過(guò)濾海水白色大桶中，在智能人工氣候箱內(nèi)培養(yǎng)，光照強(qiáng)度2 000 lx，溫度(18±2)℃，光周期 D：L=12 h：12 h 馴化 24 h 備用。

1.3 單胞藻種類(lèi)對(duì)太平洋真寬水蚤存活率、產(chǎn)糞數(shù)和產(chǎn)卵量的影響

實(shí)驗(yàn)所用的燒杯60 mL，裝入過(guò)濾好的海水50 mL，投喂藻類(lèi)濃度（藻類(lèi)濃度以藻類(lèi)的生物量計(jì)，用碳含量表示）控制為1.0 mgC/L[9]，藻類(lèi)的碳含量按照STRATHMANN[10]的公式計(jì)算，相應(yīng)的投喂5種單胞藻濃度見(jiàn)表1。選取5對(duì)健康、腹肢完整、游泳迅速的太平洋真寬水蚤成體放入燒杯。實(shí)驗(yàn)溫度為(18±2)℃，光周期D：L=12 h：12 h，光照強(qiáng)度為2 000 lx。每種單胞藻餌料設(shè)置3個(gè)平行，實(shí)驗(yàn)周期為7 d。

1.4 餌料濃度對(duì)太平洋真寬水蚤存活率、產(chǎn)糞數(shù)和產(chǎn)卵量的影響

通過(guò)觀察單胞藻種類(lèi)對(duì)太平洋真寬水蚤存活率、產(chǎn)糞數(shù)和產(chǎn)卵量影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，得出投喂效果：亞心形扁藻＞中肋骨條藻＞三角褐指藻＞球等鞭金藻＞小球藻。根據(jù)以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果，選擇投喂效果較好的亞心形扁藻和中肋骨條藻設(shè)置濃度梯度，亞心形扁藻和中肋骨條藻都設(shè)置1.0、2.0、4.0、8.0和16.0 mgC/L共5個(gè)餌料濃度梯度，實(shí)驗(yàn)條件與上述一致。

1.5 太平洋真寬水蚤存活、產(chǎn)卵及產(chǎn)糞的測(cè)定

每24 h將太平洋真寬水蚤成體移出至新的調(diào)整好相應(yīng)餌料濃度的燒杯，觀察記錄其存活情況，置于萊卡DMI3000B倒置熒光顯微鏡計(jì)數(shù)產(chǎn)糞數(shù)和產(chǎn)卵量[11]。

1.6 結(jié)果計(jì)算和數(shù)據(jù)處理

用雙因素方差分析不同時(shí)間和餌料投喂后太平洋真寬水蚤的存活率、產(chǎn)糞數(shù)和產(chǎn)卵量的差異顯著性。實(shí)驗(yàn)相關(guān)數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行分析,測(cè)定結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 餌料種類(lèi)對(duì)太平洋真寬水蚤存活率、產(chǎn)糞數(shù)和產(chǎn)卵量的影響

通過(guò)雙因素方差統(tǒng)計(jì)分析，餌料種類(lèi)和時(shí)間無(wú)交互作用，餌料種類(lèi)和時(shí)間對(duì)太平洋真寬水蚤的存活率均有顯著性影響 (P＜0.05)。在實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)，投喂5種單胞藻的太平洋真寬水蚤的存活率均隨著時(shí)間的推移逐漸降低，1～3 d投喂5種單胞藻的存活率相對(duì)較高，從第4天開(kāi)始存活率開(kāi)始大幅度下降，第4天投喂三角褐指藻的存活率最高為(83.33±4.71)%，投喂小球藻的存活率最低為(43.33±12.47)%，如圖1。通過(guò)統(tǒng)計(jì)分析，投喂三角褐指藻、亞心形扁藻和中肋骨條藻的太平洋真寬水蚤存活率高于投喂球等鞭金藻和小球藻 (P＜0.05)，投喂三角褐指藻的存活率最高為(78.57±14.68)%，投喂小球藻后其存活率最低為(50.59±33.42)%。

從產(chǎn)糞情況看，餌料種類(lèi)和時(shí)間無(wú)交互作用，餌料種類(lèi)和時(shí)間對(duì)太平洋真寬水蚤的產(chǎn)糞數(shù)有顯著性影響(P＜0.05)。從圖2中可以看出，實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)投喂中肋骨條藻的產(chǎn)糞數(shù)明顯多于其他4種單胞藻，在第4天時(shí)投喂中肋骨條藻的產(chǎn)糞數(shù)最多為 (90.38±9.03)粒/(d·個(gè)體)。除中肋骨條藻外，投喂其他4種單胞藻的產(chǎn)糞數(shù)基本隨時(shí)間的變化浮動(dòng)遞增(圖2)。通過(guò)統(tǒng)計(jì)分析，投喂中肋骨條藻的產(chǎn)糞數(shù)最多且與其他藻種存在明顯差異(P＜0.05)，投喂中肋骨條藻的太平洋真寬水蚤產(chǎn)糞數(shù)為(76.12±11.58)粒/(d·個(gè)體)，投喂球等鞭金藻、亞心形扁藻、三角褐指藻和小球藻的產(chǎn)糞數(shù)依次遞減，小球藻的產(chǎn)糞數(shù)最少為(29.89±10.37)粒∕(d·個(gè)體)。

從產(chǎn)卵量看，餌料種類(lèi)對(duì)太平洋真寬水蚤的產(chǎn)卵量有顯著性影響(P＜0.05)，時(shí)間對(duì)太平洋真寬水蚤的產(chǎn)卵量無(wú)顯著差異(P＞0.05)。投喂小球藻的效果最差，投喂第5～6天出現(xiàn)暫停產(chǎn)卵的情況(圖3)。通過(guò)統(tǒng)計(jì)分析，小球藻的投喂效果最差且與其他單胞藻存在顯著差異(P<0.05)，其中投喂亞心形扁藻的太平洋真寬水蚤產(chǎn)卵量最高為(13.04±6.28)個(gè)/(d·雌體)，小球藻的產(chǎn)卵量最低為(3.40±2.43)個(gè)/(d·雌體)。

圖1 5種單胞藻餌料對(duì)太平洋真寬水蚤存活率的影響Fig.1 Effects of five unialgal diets on survival rate of E.pacifica

圖2 5種單胞藻餌料對(duì)太平洋真寬水蚤產(chǎn)糞數(shù)的影響Fig.2 Effects of five unialgal diets on fecal pellet production of E.pacifica

2.2 餌料濃度梯度對(duì)太平洋真寬水蚤存活率、產(chǎn)糞數(shù)和產(chǎn)卵量的影響

2.2.1 不同濃度梯度的亞心形扁藻對(duì)太平洋真寬水蚤存活率、產(chǎn)糞數(shù)和產(chǎn)卵量的影響

在實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)，設(shè)置亞心形扁藻濃度梯度，經(jīng)過(guò)雙因素方差分析，餌料濃度和時(shí)間無(wú)交互作用，餌料濃度和時(shí)間都對(duì)太平洋真寬水蚤的存活率有顯著性影響 (P<0.05)。在實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)，各個(gè)濃度梯度的太平洋真寬水蚤存活率均隨時(shí)間的推移緩慢下降(圖4)。餌料濃度為1.0、2.0、16.0 mgC/L時(shí)存活率相對(duì)較高且與其他濃度的存活數(shù)存在顯著差異(P<0.05)，在餌料濃度為2.0 mgC/L時(shí)存活率最高為 (85.71±5.26)%。從產(chǎn)糞數(shù)看，餌料濃度和時(shí)間無(wú)交互作用，餌料濃度和時(shí)間都對(duì)太平洋真寬水蚤的產(chǎn)糞數(shù)有顯著性影響(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)第7天餌料濃度為4.0 mgC/L時(shí)產(chǎn)糞數(shù)最多為(105.63±17.50)粒/(d·個(gè)體)(圖5)。通過(guò)統(tǒng)計(jì)分析，餌料濃度為4.0、8.0 mgC/L時(shí)的產(chǎn)糞數(shù)明顯高于濃度為1.0 mgC/L的產(chǎn)糞數(shù) (P<0.05)，餌料濃度為1.0 mgC/L 時(shí)產(chǎn)糞數(shù)最少為(41.60±17.18)粒／(d·個(gè)體)；實(shí)驗(yàn)周期中，1～2 d產(chǎn)糞數(shù)相對(duì)較少，3～7 d產(chǎn)糞數(shù)相對(duì)較多且無(wú)顯著差異。從產(chǎn)卵情況看，餌料濃度隨時(shí)間的推移無(wú)明顯規(guī)律(圖6)。各個(gè)濃度梯度的產(chǎn)卵量無(wú)顯著性差異(P<0.05)。

2.2.2 不同濃度梯度的中肋骨條藻對(duì)太平洋真寬水蚤存活率、產(chǎn)糞數(shù)和產(chǎn)卵量的影響

在實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)，設(shè)置中肋骨條藻濃度梯度，通過(guò)雙因素方差分析，餌料濃度和時(shí)間無(wú)交互作用，餌料濃度和時(shí)間都對(duì)太平洋真寬水蚤的存活率有顯著性影響(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)1～5 d餌料濃度為2.0 mgC/L時(shí)存活率最高為(93.33±4.71)%，其他4個(gè)餌料濃度的存活率基本隨時(shí)間的推移緩慢降低(圖7)。經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)分析，在餌料濃度為2.0 mgC/L時(shí)存活率最高為(91.43±3.01)%，與其他濃度條件下的太平洋真寬水蚤存活率差異顯著 (P<0.05)。從產(chǎn)糞數(shù)看，餌料濃度和時(shí)間無(wú)交互作用，餌料濃度和時(shí)間都對(duì)太平洋真寬水蚤的產(chǎn)糞數(shù)有顯著性影響(P<0.05)。投喂第4天餌料濃度為1.0 mgC/L時(shí)產(chǎn)糞數(shù)最多為(90.38±9.03)粒/(d·個(gè)體)(圖8)。經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)分析，濃度為1.0 mgC/L時(shí)產(chǎn)糞數(shù)最多為(76.12±11.58)粒/(d·個(gè)體)，濃度為 4.0 mgC/L 時(shí)效果次之，這兩個(gè)濃度效果明顯高于其他濃度(P<0.05)；2～7 d的產(chǎn)糞數(shù)明顯多于第1 d(P<0.05)。從產(chǎn)卵量來(lái)看，餌料濃度和時(shí)間無(wú)交互作用，餌料濃度和時(shí)間都對(duì)太平洋真寬水蚤的產(chǎn)卵量有顯著性影響(P<0.05)。各個(gè)濃度梯度的太平洋真寬水蚤的產(chǎn)卵出現(xiàn)了時(shí)間節(jié)律，普遍出現(xiàn)隔天產(chǎn)卵的情況(圖9)。低濃度與高濃度的產(chǎn)卵量存在顯著差異，1.0、2.0、4.0 mgC/L這三個(gè)低濃度的產(chǎn)卵量相對(duì)較高，濃度為2.0 mgC/L時(shí)產(chǎn)卵量最高為(13.17±6.50)個(gè)/(d·雌體)，投喂高濃度 8.0、16.0 mgC/L 產(chǎn)卵量較低，濃度為16.0 mgC/L時(shí)產(chǎn)卵量最低為(3.36±2.77)個(gè)/(d·雌體)。

圖3 5種單胞藻餌料對(duì)太平洋真寬水蚤產(chǎn)卵量的影響Fig.3 Effects of five unialgal diets on egg production of E.pacifica

圖4 不同濃度梯度的亞心形扁藻對(duì)太平洋真寬水蚤存活率的影響Fig.4 Effects of different food concentration of P.subcordiformis on amount of survival rate E.pacifica

圖5 不同濃度梯度的亞心形扁藻對(duì)太平洋真寬水蚤產(chǎn)糞數(shù)的影響Fig.5 Effects of different food concentration of P.subcordiformis on fecal pellet production of E.pacifica

圖6 不同濃度梯度的亞心形扁藻對(duì)太平洋真寬水蚤產(chǎn)卵量的影響Fig.6 Effects of different food concentration of P.subcordiformis on egg production of E.pacifica

3 討論

3.1 餌料種類(lèi)對(duì)太平洋真寬水蚤生物學(xué)特性的影響

餌料種類(lèi)對(duì)橈足類(lèi)生物學(xué)特性的影響主要包括食物粒徑的大小、餌料質(zhì)量和營(yíng)養(yǎng)成分等。

食物粒徑的大小會(huì)影響橈足類(lèi)的攝食、生長(zhǎng)和發(fā)育[12]。餌料大小會(huì)影響橈足類(lèi)的濾食率，橈足類(lèi)不同的發(fā)育時(shí)期有不同的攝食餌料粒徑范圍。實(shí)驗(yàn)采用的是同一發(fā)育期的太平洋真寬水蚤成體，排除體型大小差異，餌料大小成為太平洋真寬水蚤生物學(xué)特性的重要影響因素。根據(jù)動(dòng)物攝食選擇，湯氏紡錘水蚤Acartia tonsa成體期攝食的餌料粒徑相對(duì)較大（14～70 μm）[13]。本研究結(jié)果表明，食物徑粒較大的亞心形扁藻和中肋骨條藻的效果要好于食物粒徑較小的三角褐指藻、球等鞭金藻和小球藻，太平洋真寬水蚤成體攝食粒徑較大的單胞藻可消耗較少的能量來(lái)滿(mǎn)足自身攝食的需求。劉光興等[14]通過(guò)研究幾種單胞藻對(duì)火腿許水蚤Schmackeria poplesia的影響，認(rèn)為亞心形扁藻個(gè)體較大，橈足類(lèi)幼體攝食有一定困難，但適宜橈足類(lèi)成體攝食。羅曉霞等[15]提出雙齒許水蚤S.dubin成體偏向于攝食粒徑相對(duì)較大且具活動(dòng)能力的扁藻和金藻。實(shí)驗(yàn)中投喂的亞心形扁藻和中肋骨條藻的效果相對(duì)較好，除了與餌料粒徑大小有關(guān)，也可能與餌料營(yíng)養(yǎng)成分和餌料選擇喜好有關(guān)，這一推測(cè)可在以后的實(shí)驗(yàn)中進(jìn)一步研究。

不同種類(lèi)單胞藻餌料的營(yíng)養(yǎng)成分不同[16-17]，餌料的種類(lèi)和質(zhì)量等因素直接影響橈足類(lèi)的生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖[18]。張展等[19]研究結(jié)果表明，球等鞭金藻和小球藻不利于雙刺紡錘水蚤Acartia bifilosa雌體的存活和產(chǎn)卵，中肋骨條藻和亞心形扁藻效果較好，是最適宜雙刺紡錘水蚤的單胞藻餌料。李婕等[20]研究發(fā)現(xiàn)微綠球藻和三角褐指藻是中華哲水蚤Calanus sinicus和雙刺紡錘水蚤在開(kāi)口攝食期是最適宜的餌料，但在發(fā)育后期以及整個(gè)發(fā)育期亞心形扁藻和中肋骨條藻更為適宜。本實(shí)驗(yàn)中，綜合存活、產(chǎn)糞和產(chǎn)卵情況，投喂亞心形扁藻和中肋骨條藻的效果較好，是太平洋真寬水蚤相對(duì)適宜的餌料。黃嘉琪等[21]在研究單胞藻對(duì)婆羅異劍水蚤Apocyclops borneoensis脂肪酸組成的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，小球藻和三角褐指藻的效果最差，可能由于小球藻的細(xì)胞壁厚、分泌的小球藻素存在毒性。本實(shí)驗(yàn)中小球藻投喂后，太平洋真寬水蚤的日均存活率、產(chǎn)糞數(shù)和產(chǎn)卵量都最低，也可能與此有關(guān)。球等鞭金藻無(wú)真正的細(xì)胞壁、易消化、營(yíng)養(yǎng)豐富，在培養(yǎng)橈足類(lèi)和其他種類(lèi)中顯示球等鞭金藻是較好的生物餌料[22]，本實(shí)驗(yàn)中投喂球等鞭金藻的效果相對(duì)較差，與上述試驗(yàn)結(jié)果不一致，還有待進(jìn)一步研究。

3.2 餌料濃度梯度對(duì)太平洋真寬水蚤生物學(xué)特性的影響

圖7 不同濃度梯度的中肋骨條藻對(duì)太平洋真寬水蚤存活率的影響Fig.7 Effects of different food concentration of S.costatum on amount of survival rate E.pacifica

圖8 不同濃度梯度的中肋骨條藻對(duì)太平洋真寬水蚤產(chǎn)糞數(shù)的影響Fig.8 Effects of different food concentration of S.costatum on fecal pellet production of E.pacifica

圖9 不同濃度梯度的中肋骨條藻對(duì)太平洋真寬水蚤產(chǎn)卵量的影響Fig.9 Effects of different food concentration of S.costatum on egg production of E.pacifica

橈足類(lèi)的攝食有一個(gè)飽和濃度，當(dāng)餌料濃度過(guò)高超過(guò)飽和濃度時(shí)會(huì)使橈足類(lèi)降低攝食甚至造成死亡[15]。在高濃度的餌料條件下，橈足類(lèi)為消耗較少的能量得到充足的食物，會(huì)采取降低清濾率調(diào)節(jié)濾食率的方式。也有很多研究表明高濃度的硅藻能產(chǎn)生有毒的胞外分泌物，對(duì)橈足類(lèi)的存活和生長(zhǎng)具有抑制作用[23-24]。本實(shí)驗(yàn)顯示，投喂餌料濃度為2.0 mgC/L亞心形扁藻和中肋骨條藻的存活率最高，高于和低于此濃度的存活率都相對(duì)較低，說(shuō)明此濃度的亞心形扁藻和中肋骨條藻是投喂太平洋真寬水蚤的適宜濃度。而高濃度中肋骨條藻可能對(duì)太平洋真寬水蚤存活有抑制作用。

糞便是檢測(cè)橈足類(lèi)對(duì)食物消化吸收情況的一個(gè)重要指標(biāo)，糞便的數(shù)目、尺寸和糞便的總體積會(huì)隨餌料濃度的上升而升高[25-26]。張武昌等[27]研究中華哲水蚤攝食隨餌料濃度增加，在較低餌料濃度下停止攝食。本實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)，太平洋真寬水蚤的產(chǎn)糞數(shù)并沒(méi)有隨著亞心形扁藻和中肋骨條藻的投喂餌料濃度上升而升高。而是發(fā)現(xiàn)亞心形扁藻濃度最低時(shí)太平洋真寬水蚤的產(chǎn)糞數(shù)最少，猜測(cè)亞心形扁藻具有運(yùn)動(dòng)鞭毛，在低餌料濃度條件下太平洋真寬水蚤攝食需要加大運(yùn)動(dòng)頻率，運(yùn)動(dòng)消耗較大產(chǎn)糞數(shù)減少。糞便沉積過(guò)多會(huì)危害卵的孵化甚至造成水體污染導(dǎo)致橈足類(lèi)死亡[28]，此濃度亞心形扁藻可為人工培養(yǎng)太平洋真寬水蚤提供參考。投喂低濃度中肋骨條藻的太平洋真寬水蚤產(chǎn)糞數(shù)最多，在低濃度餌料情況下，太平洋真寬水蚤需要提高附肢運(yùn)動(dòng)效率，活動(dòng)量增加，進(jìn)食更多餌料來(lái)滿(mǎn)足能量需求，使得產(chǎn)糞數(shù)增多。而投喂高濃度的中肋骨條藻產(chǎn)糞數(shù)相對(duì)較少，可能由于中肋骨條藻是沉降型的硅藻且無(wú)運(yùn)動(dòng)的鞭毛，在高濃度餌料條件下太平洋真寬水蚤攝食不需要消耗太多能量，就能夠滿(mǎn)足自身需求，產(chǎn)糞數(shù)減少。

產(chǎn)卵是評(píng)價(jià)橈足類(lèi)生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖的重要指標(biāo)，也是人工培養(yǎng)橈足類(lèi)的重要環(huán)節(jié)[11,29]。有些硅藻對(duì)橈足類(lèi)的生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖有抑制作用[30-31]，而也有研究表明，中肋骨條藻抑制了柱形寬水蚤T(mén)emora stylifera的產(chǎn)卵和孵化，但對(duì)飛馬哲水蚤C.finmarchicus來(lái)說(shuō)影響微乎其微[32]，對(duì)中華哲水蚤投喂中肋骨條藻的實(shí)驗(yàn)中并未發(fā)現(xiàn)抑制其繁殖[33]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，投喂不同濃度梯度的中肋骨條藻產(chǎn)卵情況顯示出差異性。在中肋骨條藻濃度較低(1.0、2.0、4.0 mgC/L)時(shí)，太平洋真寬水蚤產(chǎn)卵量相對(duì)較高；而中肋骨條藻濃度較高(8.0、16.0 mgC/L)時(shí)，太平洋真寬水蚤產(chǎn)卵量低。表明高濃度的中肋骨條藻對(duì)太平洋真寬水蚤的產(chǎn)卵有抑制作用，許捷等[34]研究也表明高濃度的中肋骨條藻會(huì)抑制日本虎斑猛水蚤T(mén)igriopus japonicus的發(fā)育和繁殖。亞心形扁藻各濃度梯度的產(chǎn)卵量無(wú)顯著差異，表明高濃度的中肋骨條藻對(duì)太平洋真寬水蚤的產(chǎn)卵有抑制作用。

綜上所述，不同餌料種類(lèi)對(duì)太平洋真寬水蚤的存活率、產(chǎn)糞數(shù)和產(chǎn)卵量有顯著影響，粒徑較大的亞心形扁藻和中肋骨條藻太平洋真寬水蚤成體的適宜餌料。餌料濃度為2.0 mgC/L時(shí)，投喂亞心形扁藻和中肋骨條藻的效果最好，說(shuō)明此濃度是太平洋真寬水蚤相對(duì)適宜的餌料濃度。投喂高濃度中肋骨條藻的產(chǎn)卵量明顯減少，說(shuō)明高濃度的中肋骨條藻會(huì)對(duì)太平洋真寬水蚤的產(chǎn)卵有抑制作用。

[1]NEJSTGAARD J C,FRISCHER M E,RAULE C L,et al.Molecular detection of algal prey in copepod guts and fecal pellets[J].Limnology&Oceanography：Methods,2003,1(1)：29-38.

[2]朱明星,俞存根,許永久,等.舟山近岸海域秋季橈足類(lèi)種類(lèi)組成和數(shù)量分布[J].水產(chǎn)科學(xué),2017,36(4)：514-518.

[3]RAYNER T A,JφRGENSEN N O G,BLANDA E,et al.Biochemical composition of the promising live feed tropical calanoid copepod Pseudodiaptomus annandalei,(Sewell 1919)cultured in Taiwanese outdoor aquaculture ponds[J].Aquaculture,2015,441：25-34.

[4]左 濤,王 俊,王秀霞.萊州灣橈足類(lèi)胸刺水蚤(Centropages)的種類(lèi)季節(jié)更替和生態(tài)分布[J].海洋與湖沼,2017,48(2)：327-335.

[5]鄭 重,李少菁,連光山.海洋橈足類(lèi)生物學(xué)[M].廈門(mén)：廈門(mén)大學(xué)出版社,1992.

[6]譚海麗,孫廣蓮,于 娟,等.指狀許水蚤和太平洋真寬水蚤對(duì)UV-B輻射增強(qiáng)的敏感性比較[J].中國(guó)海洋大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版,2010,40(增刊)：117-121.

[7]鞏文靜,朱麗巖,郝 雅,等.四溴雙酚A對(duì)太平洋真寬水蚤的急性毒性及氧化脅迫[J].生態(tài)毒理學(xué)報(bào),2016,11(4)：232-238.

[8]LAVENS P,SORGELOOS P.Manual on the production and use of live food for aquaculture[J].Fao Fisheries Technical Paper,Rome FAO,1996(361).

[9]李 捷.高濃度硅藻對(duì)橈足類(lèi)繁殖、生長(zhǎng)的影響[D].青島：中國(guó)科學(xué)院海洋研究所,2005：70-72.

[10]STRATHMANN R R.Estimating the organic carbon content of phytoplankton from cell volume or plasma volume[J].Limnology&Oceanography,1967,12(3)：411-418.

[11]張建設(shè),BUTTINO I,朱愛(ài)意,等.餌料濃度和成體密度對(duì)湯氏紡錘水蚤(Acartia tonsa)產(chǎn)糞粒數(shù)、產(chǎn)卵和孵化的影響[J].海洋與湖沼,2013,44(1)：62-68.

[12]張 芳.中華哲水蚤生殖和生長(zhǎng)生態(tài)學(xué)研究[D].青島：中國(guó)科學(xué)院海洋研究所,2001：19-34.

[13]BERGGREEN U,HANSEN B,KIφRBOE T.Food size spectra,ingestion and growth of the copepod Acartia tonsa,during development：Implications for determination of copepod production[J].Marine Biology,1988,99(3)：341-352.

[14]劉光興,崔建麗,黃 瑛.幾種單胞藻對(duì)火腿許水蚤脂肪酸組成的影響[J].廈門(mén)大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版,2006,45(增刊2)：250-255.

[15]羅曉霞,黃翔鵠,洪 騰.食物類(lèi)型和濃度對(duì)雙齒許水蚤攝食的影響[J].廣東海洋大學(xué)學(xué)報(bào),2008,28(3)：39-44.

[16]MARTíNEZ-FERNáNDEZ E,ACOSTA-SALMóN H,SOUTHGATE P C.The nutritional value of seven species of tropical microalgae for black-lip pearl oyster(Pinctada margaritifera,L.)larvae[J].Aquaculture,2006,257(1-4)：491-503.

[17]VIDHYA K,UTHAYAKUMAR V,MUTHUKUMAR S,et al.The effects of mixed algal diets on population growth,egg productivity and nutritional profiles in cyclopoid copepods(Thermocyclops hyalinus,and Mesocyclops aspericornis)[J].Journal of Basic&Applied Zoology,2014,67(2)：58-65.

[18]宋昌民.渤海和北黃海浮游橈足類(lèi)攝食率的研究[D].大連：大連海洋大學(xué),2016：3-4.

[19]張 展,孫 松,李 捷,等.幾種單胞藻對(duì)雙刺紡錘水蚤雌體繁殖的影響[J].海洋與湖沼,2008,39(6)：612-618.

[20]李 捷,孫 松,李超倫,等.不同餌料對(duì)橈足類(lèi)無(wú)節(jié)幼體存活、發(fā)育的影響研究[J].海洋科學(xué),2006,30(12)：13-20.

[21]黃加祺,黃輝洋.幾種單胞藻對(duì)婆羅異劍水蚤群體增殖的影響[J].海洋科學(xué),1999,23(4)：47-50.

[22]叢 超,胡冬雪,孫春曉,等.不同品系球等鞭金藻在生長(zhǎng)及脂肪酸組成上的種內(nèi)差異[J].中國(guó)水產(chǎn)科學(xué),2017,24(4)：774-782.

[23]IANORA A,MIRALTO A,POULET S A,et al.Aldehyde suppression of copepod recruitment in blooms of a ubiquitous planktonic diatom[J].Nature,2004,429(6990)：403-407.

[24]ARENDT K E,JóNASDóTTIR S H,HANSEN P J,et al.Effects of dietary fatty acids on the reproductive success of the calanoid copepod Temora longicornis[J].Marine Biology,2005,146(3)：513-530.

[25]李光福,朱麗巖,王曉敏,等.溫度和鹽度對(duì)指狀偽鏢水蚤孵化及產(chǎn)糞的影響[J].中國(guó)海洋大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版,2015,45(11)：36-42.

[26]于 娟,張 瑜,楊桂朋,等.餌料、溫度和鹽度對(duì)兩種海洋橈足類(lèi)攝食與排糞的影響[J].中國(guó)海洋大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版,2012,42(z2)：45-52.

[27]張武昌,王 榮.餌料濃度對(duì)中華哲水蚤攝食的影響[J].海洋學(xué)報(bào)：中文版,2000,22(6)：88-94.

[28]WALLACE M I,COTTIER F R,BRIERLEY A S,et al.Modelling the influence of copepod behaviour on faecal pellet export at high latitudes[J].Polar Biology,2013,36(4)：579-592.

[29]CAMUS T,ZENG Chao-shu.The effects of stocking density on egg production and hatching success,cannibalism rate,sex ratio and population growth of the tropical calanoid copepod Acartia sinjiensis[J].Aquaculture,2009,287(1)：145-151.

[30]羅曉霞,黃翔鵠,李長(zhǎng)玲.不同濃度的牟氏角毛藻對(duì)安氏偽鏢水蚤生長(zhǎng)、存活和生殖的影響[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào),2017,41(8)：1276-1286.

[31]BARREIRO A,CAROTENUTO Y,LAMARI N,et al.Diatom induction of reproductive failure in copepods：The effect of PUAs versus non volatile oxylipins[J].Journal of Experimental Marine Biology&Ecology,2011,401(1-2)：13-19.

[32]STARR M,RUNGE J A,THERRIAULT J-C.Effects of diatom diets on the reproduction of the planktonic copepod Calanus finmarchicus[J].Sarsia,1999,84(5-6)：379-389.

[33]劉夢(mèng)壇,金 鑫,李超倫.兩種微藻對(duì)中華哲水蚤繁殖的影響——基于餌料生化組成分析[J].海洋科學(xué),2015,39(12)：1-7.

[34]許 婕,王桂忠,吳荔生.2種浮游硅藻對(duì)底棲橈足類(lèi)日本虎斑猛水蚤存活、發(fā)育和繁殖的影響[J].廈門(mén)大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版,2012,51(5)：939-943.

Effects of Unialgal Diets on the Biological Characteristics of Eurytemora pacifica

XIA Li-ping,JING Fei,HU Li-teng,et al
(School of Ocean Science and Technology of Zhejiang Ocean University,National Engineering Research Center of Marine Facilities Aquaculture,Zhoushan 316022,China)

The effects of different types of dites and concentrations on the survival rate,fecal pellet generation and egg production of Eurytemora pacifica were studied under hydrostatic conditions.The results showed that the survival rate,fecal pellet generation and egg production of E.pacifica were significantly different(P＜0.05)after feeding different diets under the condition of food carbon content of 1.0 mgC/L.After feeding Platymonas subcordiformis,Skeletonema costatum and Phaeodactylum tricornutum,the survival rates of E.pacifica were higher than that of Isochrysis galbana and Chlorella.sp(P＜0.05);after feeding S.costatum,the fecal pellet generation of E.pacifica was significantly higher than that of the other four unialgal diets(P＜0.05);the egg production of E.pacifica after feeding P.subcordiformis and S.costatum was significantly higher than that of C.sp(P＜0.05),the egg production was no significant difference with feeding other diets(P＞0.05).Effects of different concentration of P.subcordiformis and S.costatum on biology of E.pacifica were further studied.Results showed that different concentrations of P.subcordiformis had no significant effects on the egg production of E.pacifica(P＞0.05),the effects of different concentrations of S.costatum on the survival rate,fecal pellet generation and egg production of E.pacifica were significantly different,and while the concentration was increasing,the survival rate,fecal pellet generation and egg production of E.pacifica were decreasing(P＜0.05).The best effect was obtained when feeding the concentration of P.subcordiformis and S.costatum at 2.0 mgC/L.The results showed that the concentration of P.subcordiformis and S.costatum were the most suitable diets of E.pacifica,which could lay the foundation for the development of E.pacifica.

copepod;Eurytemora pacifica;unicellular algae;biological characteristics

S963.21+4

A

2096-4730(2017)04-0308-07

2017-05-10

國(guó)家海洋局公益性行業(yè)科研專(zhuān)項(xiàng)（201505025）；浙江省海洋科學(xué)重中之重學(xué)科開(kāi)放課題（20140104）

夏立萍（1993-），女，山東青州人，碩士研究生，研究方向：海洋生態(tài)學(xué).E-mail：XLPGWB@163.com

張建設(shè)（1979-），男，博士，研究方向：海洋生態(tài)學(xué).E-mail：zhangjianshe@zjou.edu.cn