食品中六六六和滴滴涕檢測方法的優化

任興權，任璐

（1.酒泉市食品檢驗檢測中心，甘肅酒泉735000；2.西北農林科技大學，陜西楊凌712100）

食品中六六六和滴滴涕檢測方法的優化

任興權1，任璐2

（1.酒泉市食品檢驗檢測中心，甘肅酒泉735000；2.西北農林科技大學，陜西楊凌712100）

采用有機試劑提取、濃縮、凈化，把食品中殘留的六六六、滴滴涕分離出來，用氣相色譜電子捕獲檢測器分析檢測。該方法峰形良好，檢測時間短，其科學性、準確性、高效性都完全優于常規的4種國家標準檢測方法。六六六的回收率為98%～101%，RSD為0.26%；滴滴涕的回收率為98%～102%，RSD為0.32%，因此，在食品中六六六、滴滴涕的檢測中具有重要的實際指導意義。

六六六；滴滴涕；科學性；準確性；高效性；指導意義

六六六的成分是六氯環己烷，對昆蟲有觸殺、熏殺和胃毒作用，過去主要用于防治蝗蟲、稻螟蟲、小麥吸漿蟲、蚊、蠅、臭蟲等。六六六是屬于神經及實質臟器一般毒性作用的毒物，大劑量可造成中樞神經及某些實質臟器的損傷，特別是對肝臟與腎臟的嚴重損害。滴滴涕又名雙對氯苯基三氯乙烷，也是一種神經性毒劑，幾乎對所有的昆蟲都有很強的效用，并且對瘧疾、痢疾等疾病有良好的作用，同時還能夠讓農作物增產。六六六、滴滴涕均屬于有機氯農藥，化學穩定性好、難降解、脂溶性大、易在脂肪組織中積累造成慢性中毒，從而對自然環境造成了污染，對動物和人類造成了危害。上個世紀60年代以來，六六六、滴滴涕被很多國家從人體、牛奶、禽蛋等上發現都有高殘留，引起了全世界的重視。由于六六六、滴滴涕均屬于神經及實質臟器毒物，并且可致癌，我國在上個世紀80年代初就已經禁止使用，因為由于我國30多年來長期使用這兩種農藥，不僅農、林、畜產品受到嚴重的殘留污染，而且土壤、水等環境中都有較高的殘留，很容易通過環境遷移到植物當中，進入食物鏈進行富集，從而影響人類健康，所以六六六、滴滴涕仍是我國食品中有機氯農藥殘留的主要檢測項目。目前食品中六六六、滴滴涕殘留量的檢測方法有氣相色譜法[1-11]、氣質聯用法[12-16]等，但是普遍存在前處理繁瑣，基質效應影響大，雜質干擾等問題。目前經常使用的是氣相色譜電子捕獲檢測器檢測法。氣相色譜-質譜聯用法基質干擾小，檢測靈敏度高，檢出限低，但是價格比較貴，限制了其應用。GB/T 5009.146-2008《植物性食品中有機氯和擬除蟲菊酯類農藥多種殘留量的測定》、GB/T 5009.19-2008《食品中有機氯農藥多組分殘留量的測定》、NY/T 761-2008《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定》、GB/T 5009.162-2008《動物性食品中有機氯農藥和擬除蟲菊酯農藥多組分殘留量的測定》是檢測有機氯農藥常用的4種國家標準[17-20]，按照以上標準試驗發現普遍存在峰形不好，檢測時間較長，分離效果差等問題，根據反復試驗不斷優化檢測條件，摸索出了檢測峰形良好，檢測時間短的方法，尤其是將檢測時間優化為10min，極大的提高了檢驗檢測的準確度和效率，對于日常食品中六六六、滴滴涕的檢測具有現實指導意義。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

六六六（標準品，100μg/mL）、滴滴涕（標準品，100μg/mL）：國家環境監測研究院；30℃～60℃石油醚（色譜純，99.5%）、丙酮（色譜純，99.5%）、氯化鈉（分析純，99.5%）：天津市科密歐化學試劑有限公司；己烷（色譜純，99.5%）、乙酸乙酯（色譜純，99.5%）、環己烷（色譜純，99.5%）：德國默克化學試劑有限公司。

1.2 儀器與設備

島津GC-2014C氣相色譜（電子捕獲檢測器ECD）：日本島津公司；XB220A型電子天平：深圳市朗普電子科技有限公司；KH5200DB型超聲波清洗器：上海喬楓實業有限公司；Advanced-Ⅱ-12高純水機：成都唐氏康寧科技發展有限公司。

1.3 方法

1.3.1 色譜條件和參數

色譜柱：ZKAF-RPAI（30 m×0.32 mm×0.25 μm 毛細管柱）；進樣口溫度：290℃，檢測器溫度：295℃，柱溫：245℃（恒溫）；分流比：10∶1；載氣：氮氣，純度≥99.999%，流速為30mL/min。

1.3.2 標準曲線繪制

分別儲存在-5℃以下冰箱中濃度為100μg/mL的六六六、滴滴涕標準溶液，用正己烷逐級稀釋到濃度為 0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0μg/mL 的標準工作液，經0.2μm濾膜（Noly）過濾后由濃度低到高分別取1 μL注入色譜儀進行檢測，測定峰面積，以峰面積對濃度（μg/mL）作標準曲線。

1.3.3 樣品處理及測定

稱取1 g～10 g樣品（精確至 0.01 g），加入 2.5mL水，加入20mL丙酮，振蕩30min，加入3 g氯化鈉，再加入15mL石油醚（沸程30℃～60℃），再振蕩30min。靜置分層后，轉有機相于玻璃器皿中，用水浴蒸近干，加入10mL乙酸乙酯-環己烷（1+1），濃縮，重復3次，最后定容至5mL。將5mL試樣注入凝膠滲透色譜柱（GPC），用乙酸乙酯-環己烷（1+1）洗脫，將收集的流分濃縮約1mL，用氮氣吹近干，用正己烷定容至1mL，用0.2 μm有機濾膜過濾，上氣相色譜儀分析，根據保留時間定性，外標峰面積定量。

2 結果與分析

六六六的熔點159℃～160℃，沸點288℃；滴滴涕的熔點：108℃～109℃，沸點：260℃，為了保證六六六、滴滴涕能夠迅速的被氣化，并且不分解，以進樣口的溫度要稍微高于288℃，但是不能太高，經過試驗290℃就能完全滿足試驗要求，檢測器的溫度一般和進樣口溫度等同，經過試驗295℃最佳。柱溫一般比進樣口溫度低30℃～70℃，也就是柱溫在220℃～260℃，經過多次試驗，柱溫為245℃時效果最佳。為了防止溶劑峰對目標物質峰的影響，進行分流，在多次試驗分流效果后確定分流比為10∶1為最佳。圖1、圖2、圖3、圖4、圖5分別是優化的方法、GB/T 5009.19-2008《食品中有機氯農藥多組分殘留量的測定》、GB/T 5009.162-2008《動物性食品中有機氯農藥和擬除蟲菊酯農藥多組分殘留量的測定》、NY/T 761-2008《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定》、GB/T 5009.146-2008《植物性食品中有機氯和擬除蟲菊酯類農藥多種殘留量的測定》5種檢測方法的色譜圖。

從5種方法的色譜圖可以清晰的看出本試驗方法能夠完全將4種六六六和4種滴滴涕分離開來，并且峰形良好，可以準確的定性、定量，分析時間僅為10min。方法GB/T 5009.19-2008也可以將六六六、滴滴涕分離開來，但是峰形較小，分析時間很長需要55min。方法GB/T 5009.162-2008方法和GB/T 5009.19-2008基本接近，也可以將六六六、滴滴涕分離開來，但也是峰形較小，分析時間很長需要60min。NY/T 761-2008不能完全將六六六、滴滴涕分離，不能夠準確的定性和定量，分析時間較長為30min；方法GB/T 5009.146-2008也不能將六六六、滴滴涕分離，不能夠準確的定性和定量，分析時間較長為30min。表1是對5種方法的綜合性統計。

圖2 GB/T 5009.19-2008方法譜圖Fig.2 GB/T 5009.19-2008 method spectrogram

圖3 GB/T 5009.162-2008方法譜圖Fig.3 GB/T 5009.19-2008 method spectrogram

圖4 NY/T 761-2008方法譜圖Fig.4 NY/T 761-2008 method spectrum

圖5 GB/T 5009.146-2008方法譜圖Fig.5 GB/T 5009.146-2008 method spectrum

表1 5種檢測方法統計表Table 1 Statistical table of five detection methods

從圖譜及統計表可以看出本方法采用ZKAF-RPAI毛細管柱，進樣口溫度290℃，檢測器溫度295℃，柱溫245℃（恒溫），分流比10∶1，檢測效果完全優于其它4種國家標準。通過加標試驗和重復性試驗可得六六六的回收率為98%～101%，RSD為0.26%；滴滴涕的回收率為98%～102%，RSD為0.32%。

3 結論

本文建立了一種科學、高效、便捷的利用氣相色譜法檢測食品中六六六、滴滴涕的方法，不論是檢測的科學性、準確性、高效性上都優于常規國家標準的方法，還是樣品的提取和檢測過程都比國家標準簡便，檢測方法易于掌握，具有很強的實用性，對于食品檢測方法的更新具有很好推進作用。

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Optimization of Detection Method for Hexachlorocyclohexane and Dichlorodiphenyltrichloroethane in Foods

REN Xing-quan1，REN Lu2
（1.Jiuquan City Food Inspection and Detection Center，Jiuquan 735000，Gansu，China；2.Northwest A&F University，Yangling 712100，Shaanxi，China）

Used organic reagent extraction，concentration and purification，hexachlorocyclohexane and dichlorodiphenyltrichloroethane residues in food were separated and analyzed by gas chromatography electron capture detector.This method was fast and the detected compounds can achieve good peak shapes.The scientificity，accuracy and efficiency of this method was better than the 4 kinds of conventional national standard methods.The recovery rate of hexachlorocyclohexane was in the range of 98%-101%，RSD was 0.26%.Dichlorodiphenyltrichloroethane recovery was in the range of 98%-102%，RSD was 0.32%，so it had important practical significance in the detection of hexachlorocyclohexane and dichlorodiphenyltrichloroethane in food.

hexachlorocyclohexane；dichlorodiphenyltrichloroethane；scientificity；accuracy；efficiency；guiding significance

任興權，任璐.食品中六六六和滴滴涕檢測方法的優化[J].食品研究與開發，2018，39（1）：136-140

RENXingquan，RENLu.Optimization of Detection Method for Hexachlorocyclohexane and Dichlorodiphenyltrichloroethane in Foods[J].Food Research and Development，2018，39（1）：136-140

10.3969/j.issn.1005-6521.2018.01.027

任興權（1984—），男（漢），工程師，碩士，主要從事食品中添加劑、重金屬、農藥殘留的分析檢驗與研究。

2017-07-27