不同溫度條件下6—芐氨基嘌呤對采后西蘭花貨架壽命的影響

尹攀攀+肖麗霞+胡花麗+張雷剛+羅淑芬+李鵬霞

摘要： 分別在10、15、20 ℃，相對濕度為85%～90%條件下進行貨架模擬，以清水處理為對照，研究了30 mg/L 6-芐氨基嘌呤（6-benzylaminopurine，6-BA）浸泡處理10 min對采后西蘭花外觀品質、色差、葉綠素含量、可溶性蛋白質含量和可溶性糖含量的變化，及組織中內源6-BA含量的影響。結果發現，6-BA處理能有效地減緩采后西蘭花的黃化和外觀品質的下降，顯著延緩西蘭花葉綠素的分解，維持其較高的可溶性蛋白質含量及可溶性糖含量；3個溫度條件下，6-BA含量的變化均為逐漸上升的趨勢；與對照相比，10、15、20 ℃條件下，6-BA處理可分別將西蘭花的保鮮期延長1、3、4 d。結果表明，6-BA處理可延長不同貯藏溫度下西蘭花的貯藏壽命。

關鍵詞： 西蘭花；6-芐氨基嘌呤；溫度；品質

中圖分類號： S635.309+.3 文獻標志碼： A

文章編號：1002-1302（2017）22-0225-04

西蘭花（Brassica oleracea L.）別稱青花菜、花椰菜等，為十字花科蕓薹屬甘藍種中以綠色花球為產品的一個變種，富含蛋白質、碳水化合物、維生素等營養素，并具有防癌抗癌的功效，日益受到消費者青睞 。西蘭花的食用部分為幼嫩的花球和花梗，采收之后呼吸代謝旺盛，在常溫下易黃化、失水萎蔫、開花，嚴重影響西蘭花的品質，對西蘭花產業的發展有很大的影響[3]。因此，研究西蘭花采后保鮮技術具有重要意義。

6-芐氨基嘌呤（6-benzylaminopurine，6-BA）是一種人工合成的植物生長激素，主要作為促長劑和保鮮劑使用，能夠促進與調節植物生長發育，具有防衰老、保鮮作用[4]。Xu等研究表明，200 mg/L 6-BA處理青花菜可顯著抑制葉綠素相關降解酶活性，從而減緩葉綠素的降解，保持青花菜的表觀顏色，延緩活性成分的下降，維持其營養品質[5]。Siddiqui等報道，200 mg/L 6-BA處理后的花菜，能保持較高生物活性成分含量，維持較高的細胞膜透性和抗氧化活性[6]。梁鳳玲等也報道，25 mg/L 6-BA處理可顯著降低青菜貯藏期間的失質量率，減緩維生素C的減少，延緩蔬菜葉片褐變，延長貨架期[7]。另外，Zhang等研究表明，500 mg/L 6-BA可以防止桃采后軟化，降低細胞膜通透性，保護細胞膜免受氧化刺激，保持其良好的外觀品質[8]。

目前，有關6-BA在西蘭花保鮮上的應用已有一些報道[9-11]，但是關于不同銷售溫度下，6-BA處理對西蘭花貨架壽命的影響研究鮮有報道，關于6-BA處理后西蘭花組織中內源6-BA水平的研究未見相關報道。本試驗以新鮮西蘭花為材料，探討6-BA處理對不同銷售溫度下西蘭花貨架壽命的影響，同時測定了6-BA處理后西蘭花組織中內源 6-BA 含量的變化規律，旨在為西蘭花的貨架期保鮮提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 材料及處理

本試驗所用西蘭花購買于南京眾彩物流市場，1 h內運回江蘇省農業科學院果蔬保鮮與加工實驗室，選取花球鮮綠、無明顯機械損傷、成熟度均勻的西蘭花為試驗材料。根據預試驗的結果，選用30 mg/L 6-BA浸泡處理西蘭花10 min，以清水浸泡作為對照（CK）。瀝干后，將花球裝入21 L樂扣箱中，每箱15個花球，分別于10、15、20 ℃，相對濕度85%～90%條件下貯藏，處理與對照組分別定義為：6-BA-10 ℃、CK-10 ℃，6-BA-15 ℃、CK-15 ℃，6-BA-20 ℃、CK-20 ℃。定期取樣用于各項指標的測定。

1.2 方法

1.2.1 葉綠素含量測定

參照李合生等的方法[12]，采用乙醇浸提法測定葉綠素。稱取樣品1 g，加入10 mL 95%乙醇充分研磨后，浸提至組織變成白色。經定容、過濾后，在波長663、646、470 nm處測定吸光度，重復3次測定，計算葉綠素含量。

1.2.2 色差測定

參照紀淑娟等的方法[13]，利用CR-400全自動測色色差計測定花球的色度，在a*、b*模式下，平行測定5次。a*表示綠色和紅色（或品紅色）之間的轉變程度（負值表示為綠色，正值表示顏色為紅色或品紅色），b*表示黃色和藍色之間的轉變程度（負值表示藍色，正值表示黃色）。

1.2.3 可溶性蛋白質含量測定

參照羅淑芬等的方法[14]，稱取樣品1 g，加10 mL蒸餾水研磨成勻漿后，在4 ℃下 10 000 r/min 離心10 min，取上清液0.05 mL加入0.95 mL蒸餾水和5 mL考馬斯亮蘭G-250試劑搖勻，放置2 min后在595 nm下比色，通過標準曲線查得可溶性蛋白質含量。

1.2.4 可溶性糖含量測定

采用蒽酮法[15]測定可溶性糖含量，稱取樣品1 g，加10 mL蒸餾水研磨成勻漿后，塑料薄膜封口，于沸水中提取30 min（提取2次），提取液過濾入25 mL容量瓶中，反復沖洗試管及殘渣，定容至刻度。吸取0.5 mL提取液依次加入1.5 mL蒸餾水、0.5 mL蒽酮乙酸乙酯、5 mL濃硫酸，充分混勻后放入沸水浴中保溫1 min。取出后自然冷卻至室溫，于630 nm下比色，通過標準曲線查得可溶性糖含量。

1.2.5 6-BA含量測定

參照王麗萍等的方法[16]，利用高效液相色譜法測定6-BA含量。稱取2 g西蘭花樣品于 50 mL 離心管中，加入8 mL酸化甲醇，常溫超聲浸提30 min。10 000 r/min離心20 min，取上清；再加入3 mL酸化甲醇重復浸提，離心后合并上清。取5 mL上清用氮吹儀吹至1 mL，過C18小柱，先用5 mL水洗去水溶性雜質，再用甲醇將6-BA洗出，定容至5 mL。用0.45 μm有機相濾膜過濾用于液相色譜儀（Agilent 1200）測定。液相色譜參考條件：色譜柱Xbridge C18（250 mm×4.6 mm×5.0 μm）；流動相：A：甲醇 ∶ 乙腈=60 ∶ 5，45%；B：0.1%乙酸，55%；流速1.0 mL/min；柱溫 30 ℃；進樣體積20.0 μL；測定波長267 nm。endprint

1.3 數據統計

所有數據均平行測定3次，數據采用平均值±標準差表示，采用Origin 8.5軟件繪制圖表，顯著性采用SPSS 16.0軟件進行分析（α=0.05）。

2 結果與分析

2.1 不同溫度條件下6-BA對西蘭花外觀品質的影響

在貨架期過程中，10、15、20 ℃條件下，6-BA處理西蘭花的外觀品質均顯著優于CK（圖1）。例如，20 ℃條件下，6-BA 處理可延遲西蘭花黃化1～2 d；15 ℃條件下，6-BA處理可延遲西蘭花黃化3～4 d；10 ℃條件下，CK于8 d時黃化明顯，而6-BA處理于10 d時仍能保持西蘭花較好的外觀品質。

2.2 不同溫度條件下6-BA對西蘭花葉綠素含量的影響

在整個貯藏過程中，不同溫度條件下西蘭花的葉綠素含量均呈現下降趨勢（圖2）。同一溫度條件下，處理組西蘭花葉綠素的含量均顯著高于CK（P<0.05）。尤其在10 ℃條件下，貯藏10 d時，6-BA處理組西蘭花的葉綠素含量約為CK的5倍，從而說明6-BA具有良好的護綠效果。

2.3 不同溫度條件下6-BA對西蘭花色差的影響

a*值為負表示綠色，b*值為正表示黃色，正值越大顏色越黃。不同溫度條件下，西蘭花花球a*值和b*值均呈現增大趨勢，表明西蘭花花球開始變黃。所有CK組西蘭花的黃化趨勢均顯著高于6-BA組（P<0.05），說明6-BA處理能有效減緩采后西蘭花的黃化進程。其中，20 ℃貯藏西蘭花的黃化最為顯著。例如，貯藏6 d時，CK-20 ℃組a*值由初始值-12.06增加至-3.96，而6-BA-20 ℃組西蘭花a*值僅為-10.40；CK-20 ℃組b*值比6-BA-20 ℃組西蘭花b*值高12.37（表1）。

2.4 不同溫度條件下6-BA對西蘭花可溶性蛋白質含量的影響

可溶性蛋白質的含量隨貨架期時間的增長而降低。不同溫度條件下，可溶性蛋白質降低速率不同，溫度越高其下降速率越快。20 ℃條件下，西蘭花可溶性蛋白質下降速率最快，與0 d相比，在貯藏6 d時，處理組和CK西蘭花可溶性蛋白質含量分別下降了4.89、8.85 mg/g；而貯藏6 d時，6-BA-10 ℃ 組西蘭花的可溶性蛋白質含量僅下降了 0.40 mg/g（圖3）。

2.5 不同溫度條件下6-BA對西蘭花可溶性糖含量的影響

西蘭花的可溶性糖含量隨著貨架期時間的延長持續下降，在整個貯藏期間，所有處理組西蘭花的可溶性糖含量均顯著高于CK（P<0.05）。10 ℃條件下，在貯藏8、10 d時，6-BA 處理組西蘭花的可溶性糖含量分別比CK高出1.93、1.38 mg/g（圖4）。可見，6-BA處理能顯著延緩西蘭花貯藏期間可溶性糖含量的下降（P<0.05）。

2.6 不同溫度下6-BA對西蘭花內源6-BA含量的影響

基于6-BA對西蘭花采后保鮮的上述有益影響，進一步分[CM（25]析了不同溫度貯藏下6-BA處理對西蘭花組織內源

6-BA含量的影響。不同貯藏溫度條件下，所有西蘭花組織中的6-BA含量均逐漸上升（圖5）。在貯藏前6 d，10、15、20 ℃ 這3個溫度條件下，處理組與CK的內源6-BA含量之間無顯著差異；在貯藏結束時，不同溫度條件下，處理組與CK的內源6-BA含量出現差異（P<0.05）。同時測定了貯藏于10 ℃ 10 d時，西蘭花煮熟后組織中的6-BA含量變化，通過熟制可降低約85%的內源6-BA含量（圖6）。

3 討論與結論

3.1 不同溫度條件下6-BA處理對西蘭花外觀品質的影響

西蘭花頭部為顆粒狀致密排列的小花，采收時呼吸代謝旺盛，在室溫條件下極易褪綠、黃化，耐貯性差[17]。本試驗表明，在10、15、20 ℃貯藏條件下，西蘭花外觀品質的主要變化為褪綠、黃化，6-BA處理可有效延緩這3種溫度貯藏下西蘭花組織的黃化，保持其較好的外觀品質。在西蘭花采后貯藏過程中，葉綠素含量的下降是其衰老的重要標志[18]。本研究表明，6-BA處理可有效減緩西蘭花葉綠素含量的降低。Clarke等研究也表明，2.21×10-4 mol/L 6-BA能延緩西蘭花葉綠素降解[19]。汪峰等研究也顯示，15 mL/L 6-BA處理能保持食莢豌豆較高的葉綠素含量[20]。6-BA處理對組織葉綠素降解的這種抑制可能與其抑制葉綠素酶、脫鎂螯合酶和葉綠素降解相關過氧化物酶活性有關[21-22]。同時，我們觀察到，西蘭花組織葉綠素含量的下降導致其花蕾由深綠色變為亮黃色，色差分析表明其組織的a*值和b*值均增加。林本芳等的研究也表明，在貯藏期間西蘭花的b*值呈上升的趨勢[23]。岳本芳等的研究也發現，在西蘭花貯藏過程中其葉綠素會逐漸分解，同時a*值上升[24]，本研究結果與之類似。

3.2 不同溫度條件下6-BA處理對西蘭花可溶性蛋白質及可溶性糖含量的影響

蛋白質的降解是果蔬組織衰老的重要標志之一，可溶性蛋白質含量可以間接地衡量西蘭花體內蛋白質的代謝活動情況[25]。本研究發現，整個貯藏期內處理組和對照組的可溶性蛋白質含量均表現出下降趨勢（圖3），與陶煒煜等所進行的乙醇處理對最小加工西蘭花蛋白質含量的變化規律[26]類似。可見，6-BA處理能夠延緩西蘭花可溶性蛋白質的降解。

通常，可溶性糖可作為評價西蘭花的風味和營養價值的一個重要指標。本研究結果表明，隨著貯藏時間的延長，西蘭花組織中的可溶性糖含量下降，這與敖靜等不同薄膜自發氣調包裝對西蘭花的保鮮效果的研究[27]類似。伍新齡等研究也證明，在貯藏期間西蘭花可溶性總糖含量逐漸降低[28]。

3.3 外源6-BA處理對采后西蘭花內源6-BA含量變化的影響

目前，6-BA已被美國環境保護署認證作為植物生長調節劑，并且在國際現行標準中，6-BA被豁免最大殘留限量，因而可作為生物防腐保鮮劑在食品領域應用[29-30]。盡管如此，本試驗分析了不同貯藏溫度下，西蘭花組織內源6-BA含量的變化規律。研究發現，在整個貯藏過程中，不同溫度條件下，6-BA含量的變化均為逐漸上升的趨勢；熟制過后，能有效降低西蘭花內源6-BA水平。endprint

綜上所述，6-BA處理可以更有效地減緩采后西蘭花的黃化和外觀品質的下降，顯著減緩西蘭花葉綠素分解，維持其較高的可溶性蛋白質及可溶性糖含量，因此延緩了西蘭花貯藏品質的下降。總之，較對照相比，10、15、20 ℃條件下，6-BA 處理可使西蘭花的保鮮期分別延長1、3、4 d。

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