雞馬立克病(MD)是一種淋巴組織增生性疾病,其特征是神經、虹膜、性腺、內臟器官、肌肉等部位產生由淋巴細胞構成的腫瘤病灶。該病多發于2月齡以上的雞,患雞漸進性消瘦,死亡率高。近年來,隨著養雞的規模化養殖,種禽的調運和交易日益頻繁,該病在我縣呈上升趨勢,若繼發感染其他疾病或治療不及時可給養雞戶造成巨大的經濟損失。由于該病在臨床上常與等病癥狀相似,易造成誤診,因此在診斷時主要依據實驗室診斷,下面筆者結合多年的臨床經驗,現將雞馬立克病的實驗室的診斷方法和預防措施介紹如下。
病原 MD病原體由英美學者先后于1967年及1968年分離培胞中感染復制培養成功,并證明它是種皰疹病毒。電鏡檢查表明它在病毒分類學上是屬于B群(細胞結合性)皰疹病毒,根據最近的分類系統,從結構上可分為2種類型∶一是裸露的不完全病毒粒子,直徑為85~100nm,通常見于感染組織培養細胞的細胞核內,在細胞漿和細胞外液中偶然也可看到;二是帶囊膜的完全病毒粒子,主要存在于細胞膜附近雞核空泡中,不過在胞漿中也有存在。
流行特點 該病主要感染雞,火雞、山雞和鵪鶉等較少發病,哺乳動物不感染該病。1日齡雛雞的易感性比較高,隨著雞只日齡的增長其易感性逐漸減弱。雛雞感染該病后常常幾個月才表現癥狀、引起死亡。因此該病常在2~5個月齡的雞群中發病。雞群發病率一般為10%~30%,嚴重時會更高,死亡率與之相當。該病無明顯季節性,一年四季均可發生,當飼養管理差、通風不良、密度過大、應激因素多或感染其他疾病,該病的發生幾率越大。病雞和感染雞是該病的主要傳染源,主要通過空氣和消化道傳播病毒。
實驗室診斷 間接紅細胞凝集試驗:①試驗準備抗原:馬立克氏病皰疹病毒抗原,由正規的獸藥廠家生產,或取患病雞的羽髓制備;致敏紅細胞:取未經稀釋的抗原,加入等量的1%的雞紅細胞懸液,于37℃放置2h,取出后用生理鹽水洗滌3次。被檢血清:采自被檢新鮮血液分離的血清;②操作方法:被檢血清做倍比稀釋,即 1∶2、1∶4、1∶8、1:16……,在塑料凹板每個凹孔內分別滴加各個稀釋度血清0.1ml,再加1%致敏紅細胞0.1ml,混勻后置37℃溫箱中2h,觀察結果,以在最高稀釋度的血清中紅細胞被完全凝集者為該血清的效價;③結果判定:凝集效價達16倍以上時,可視為陽性反應,同時應設陰、陽性血清對照。
瓊脂擴散試驗:采集病雞血液,分離血清,進行瓊脂擴散試驗,并設陽性血清和陰性血清作對照。發現被檢血清和標準抗原之間形成清晰的沉淀線與陽性血清和抗原之間出現沉淀線一致,可判定為陽性。不出現沉淀線的則判為陰性。
PCR檢測:采用無菌操作的方法取病死雞的肝臟、脾臟等組織,經離心處理后,用PCR(聚合酶鏈式反應的方法)檢測馬立克病毒,若能擴增出馬立克氏病毒核酸異性條帶,則為陽性,反之為陰性。
防治措施 ①加強疫苗接種:出殼時接種疫苗是預防本病的主要措施,但必須結合綜合衛生防疫措施,防止出雛和育雛階段早期感染,以保證和提高疫苗的保護效果。另外,還要做好禽流感、新城疫、傳染性喉氣管炎、傳染性支氣管炎等疫病的防控,防止繼發感染該病;②加強飼養管理,搞好衛生消毒和提供均衡營養,搞好孵房、育雛室的衛生消毒,避免雛雞接觸馬立克病毒,不從感染該病的種雞群引進種蛋、種苗。飼養管理不善、環境條件差或某些傳染病 (如球蟲病)等是重要的誘發因素。加強飼養管理,改善雞群的生活條件,增強雞體的抵抗力,對預防該病有很大作用。另外,還要保證飼料和飲水衛生,減少或避免一些病毒傳染源存在和保證舍內空氣暢通,飼喂營養均衡的飼料,平時在飲水或飼料中添加微生態制劑、多種礦物質和維生素等提高雞群免疫力,增強抗病和抗應激能力,減少疫病的發生;③堅持自繁自養原則。堅持自繁自養,防止外來病傳入,如若引種,需到正規的種雞場引進,引進前,要進行病原檢查,結果為陰性的,方可引進。引進后,隔離1個月觀察無異常后,方可混圈入群。