感染性T細胞檢測在耐多藥肺結核中的應用效果評價

張金鳳

肺結核是因感染結核分枝桿菌而引發的慢性傳染性疾病, 患者常在得到有效科學治療后, 獲得較好的治療效果。但是近年來隨著耐多藥肺結核的出現, 其傳播及蔓延再次成為醫療界關注的重點。肺結核是以體內變態反應及細胞免疫為基礎的傳染病, 其以T細胞調節為主。肺結核患者往往免疫力低下, 耐多藥肺結核患者更為明顯［1］。在結核病的診斷方法中, 結核菌素試驗是常規的檢查方法, 但是其假陽性率較高。相關研究顯示, 感染性T細胞檢測是一種特異性與敏感性均較高的新興檢查方法［2］。本研究圍繞感染性T細胞檢測在耐多藥肺結核中的應用效果展開討論, 取得了較為滿意的結果, 現具體報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本次研究行回顧性調查法, 隨機選取本院2016年1月～2018年1月收治的36例耐多藥肺結核患者為A組, 同期78例健康者作為B組。A組中男20例, 女16例；年齡23～73歲, 平均年齡(39.2±11.8)歲；結核分類：10例為原發性肺結核, 26例為繼發性肺結核。B組中男48例, 女40例, 年齡22～79歲, 平均年齡(40.1±13.5)歲。兩組性別、年齡等一般資料比較差異無統計學意義(P＞0.05), 具有可比性。本研究經本院倫理會討論并通過, 所有研究對象知曉本次研究內容, 并愿意參與。

1.2 方法 兩組研究對象分別進行感染性T細胞檢測、結核菌素試驗、血清抗結核抗體檢測、結核PCR試驗、結核分枝桿菌培養及抗酸桿菌涂片。

1.2.1 感染性T細胞檢測 取兩組研究對象各5 ml的靜脈血, 添加枸櫞酸鈉抗凝, 分離單核細胞后將其放置于微孔板上［其內含有干擾素(IFN)-7抗體、早期分泌抗原靶蛋白-6(ESAT-6)及培養濾液蛋白10(CFP-10)抗原］, 于37℃的環境中恒溫培養。24 h后, 洗脫抗原致敏效應T細胞, 并加入二抗(由生物素標記), 在酶聯顯色后, 于細胞因子處形成斑點, 其斑點數即為T淋巴細胞的數量。當陰性對照孔斑點數＜6時且測試孔斑點數減去陰性對照孔斑點數≥6, 為陽性；或當陰性對照孔斑點數≥6且測試孔斑點數≥2倍陰性對照孔斑點數 , 為陽性［3］。

1.2.2 其他檢測方法 ①結核菌素試驗：取0.1 ml 結核菌素純蛋白衍生物(PPD), 即包括5單位結核菌素, 進行前臂尺側皮內實驗, 2～3 d后觀察結果, 試驗的硬結若≥10 mm即視為陽性；②血清抗結核抗體檢測：通過酶標儀檢測光密度值(OD值), 對照標準滴度曲線查詢相應的抗結核抗體滴度, 其值＞400 U/ml即視為陽性；③結核PCR試驗：對結核分枝桿菌進行DNA檢測；④抗酸桿菌涂片；⑤結核分枝桿菌培養。

1.3 觀察指標及判定標準 比較兩組檢測結果、A組患者不同檢測方法檢測結果, 分析不同檢測方法敏感性、特異性與準確性。計算公式如下：①特異性=真陰性數/(真陰性數+假陽性數)×100%；②敏感性=真陽性數/(真陽性數+假陰性數)×100%；③準確性=(真陽性數+真陰性數)/總數×100%。

1.4 統計學方法 采用SPSS13.0統計學軟件對研究數據進行統計分析。計數資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組研究對象檢測結果、A組患者不同檢測方法檢測結果比較 A組患者感染性T細胞檢測、血清抗結核抗體檢測、結核PCR試驗、結核分枝桿菌培養、抗酸桿菌涂片、結核菌素試驗結果陽性率分別為94.4%(34/36)、13.9%(5/36)、16.7%(6/36)、27.8%(10/36)、2.78%(1/36)、55.6%(20/36),B 組分別為 2.56%(2/78)、23.1%(18/78)、5.13%(4/78)、0、0、25.6%(20/78)。A組患者感染性T細胞檢測陽性率高于其他檢測方法, 差異具有統計學意義(P＜0.05)；A組患者感染性T細胞檢測、結核PCR試驗、結核分枝桿菌培養、結核菌素試驗結果陽性率均高于B組, 差異具有統計學意義(P＜0.05)。

2.2 不同檢測方法敏感性、特異性與準確性分析 感染性T細胞檢測敏感性、特異性、準確性分別為94.4%(34/36)、97.4%(76/78)、96.5%(110/114), 血清抗結核抗體檢測分別為13.9%(5/36)、76.9%(60/78)、57.0%(65/114), 結核 PCR 試驗分別為16.7%(6/36)、94.9%(74/78)、70.2%(80/114), 結核分枝桿菌培養分別為27.8%(10/36)、100.0%(78/78)、77.2%(88/114),抗酸桿菌涂片分別為2.8%(1/36)、100.0%(78/78)、69.3%(79/114), 結核菌素試驗分別為55.6%(20/36)、74.4%(58/78)、68.4%(78/114)。綜合對比, 感染性T細胞檢測是最理想的檢查方式。

3 討論

由WHO粗略統計, 每年全球大約有20億人感染結核桿菌, 200萬人因感染而導致死亡。我國是結核的高發地區,且近年來其發病率有上升的趨勢, 因此如何有效控制結核桿菌的蔓延及預防耐藥菌的產生是臨床工作的重點［4-6］。

目前臨床常用的篩查結核桿菌的方法是結核桿菌試驗,但其假陽性率較高；結核PCR技術是一種較為新型的檢測方法, 但其過程較為繁瑣且結果并未呈現一個較為滿意的可靠性而限制了其應用。血清結核桿菌抗體試驗的敏感度較低,因檢查費用昂貴而應用不廣。相關研究報道, 近年來興起的感染性T細胞檢測具有較為理想的敏感性與特異性, 其應用原理是通過斑點數來推斷患者體內的結核菌群數, 檢測效應T細胞來診斷是否受到結核桿菌的感染［7,8］。當機體長期暴露于結核桿菌的感染下時, 當抗原再次侵犯能迅速激發體內的免疫反應, 從而分泌γ-干擾素, 對結核桿菌的判斷及是否處于活動狀態有較高的臨床意義［9,10］。同時, 該檢測方法簡單易行, 價格便宜, 且屬于體外試驗, 患者更容易接受。綜上所述, 對于耐多藥肺結核而言, 感染性T細胞檢測具有較為理想的特異性與敏感性, 對耐多藥肺結核的檢出更具優勢, 值得在臨床中進一步推廣。