2016年細(xì)菌培養(yǎng)及耐藥性分析

劉艷潔 張靈利

對(duì)本院住院患者送檢的17136份標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng), 通過對(duì)分離病原菌進(jìn)行鑒定及藥敏結(jié)果分析, 詳細(xì)地了解本院菌譜分布特點(diǎn)及耐藥變遷, 為臨床合理用藥提供有利的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 選取本院2016年1～12月住院患者送檢的17136份標(biāo)本, 標(biāo)本類型有痰3425份, 血3456份, 咽拭子3416份, 尿3439份, 體液3400份, 主要來源于住院各科室患者。

1.2 培養(yǎng)基 5%兔纖維血培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂、巧克力瓊脂均購自溫州康泰有限責(zé)任公司。

1.3 質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)菌株 金黃色葡萄球菌ATCC29213、大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853均購自衛(wèi)生部藥品和生物制品檢定所。

1.4 方法 微生物人員、儀器和設(shè)備、平板、鑒定及藥敏試條均在質(zhì)控范圍之內(nèi)。將送檢標(biāo)本立即接種于血平板、麥康凱、巧克力平板培養(yǎng)基 , 36℃ 、5%～7%CO2、24～48 h, 分離出可疑菌落。采用上海星佰BIOJOSUN-II微生物鑒定藥敏分析儀進(jìn)行細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)。細(xì)菌培養(yǎng)鑒定和藥敏試驗(yàn)嚴(yán)格按全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程(第4版)進(jìn)行［1］。

1.5 評(píng)定標(biāo)準(zhǔn) 細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)結(jié)果通過WHONET5.6進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)菌分布總結(jié) 共分離出細(xì)菌2088株, 分離陽性率為12.2%。其中G-桿菌1536株, 占分離菌株數(shù)的73.6%,G+球菌為370株, 占分離菌株數(shù)的17.7%。G-桿菌為主要分離菌，其中前四位的是大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、克雷伯菌屬、鮑曼不動(dòng)桿菌，分離率分別為32.4%(498/1536)、16.4%(252/1536)、13.2%(203/1536)和 8.1%(124/1536)。在 G+球菌中仍以凝固酶陰性葡萄球菌和金黃色葡萄球菌為主要分離菌，腸球菌位于第三，三者分離率分別為9.2%(34/370)、5.4%(20/370)和 2.2%(8/370)。

2.2 藥敏試驗(yàn)總結(jié) 對(duì)G-桿菌較敏的藥物是阿米卡星、亞胺培南、美羅培南、哌拉西林/他唑巴坦, 對(duì)G+球菌敏感的藥物是萬古霉素、利福平。細(xì)菌對(duì)青霉素、紅霉素、哌拉西林表現(xiàn)出較強(qiáng)的耐藥性。亞胺培南對(duì)大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、克雷伯菌屬以及鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥率分別為3.4%、18.8%、3.4%、54.5%。哌拉西林/他唑巴坦對(duì)大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、克雷伯菌屬以及鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥率分別為14.3%、19.9%、9.8%、51.5%。頭孢吡肟對(duì)大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、克雷伯菌屬以及鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥率分別為32.9%、20.5%、12%、56.2%。頭孢他啶對(duì)大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、克雷伯菌屬以及鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥率分別為25.7%、26.6、16%、59.8%。美羅培南對(duì)大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、克雷伯菌屬以及鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥率分別為4.0%、16.9%、3.8%、57.4%。哌拉西林對(duì)大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、克雷伯菌屬以及鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥率分別為78.9%、44.2%、35.6%、59.2%。慶大霉素對(duì)大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、克雷伯菌屬以及鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥率分別為47%、18.8%、15.6%、60.9%。環(huán)丙沙星對(duì)大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、克雷伯菌屬以及鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥率分別為47%、14.3%、19.6%、59.8%。阿米卡星對(duì)大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、克雷伯菌屬以及鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥率分別為4.4%、8.8%、1.1%、54.4%。在主要G+球菌對(duì)臨床常用抗生素的耐藥率方面, 金黃色葡萄球菌對(duì)青霉素、苯唑西林、紅霉素、慶大霉素、環(huán)丙沙星、復(fù)方新諾明、利福平、四環(huán)素、萬古霉素的耐藥率分別為93.9%、21.1%、86%、29.2%、28.1%、12.4%、11.4%、27.2%、0%。凝固酶陰性葡萄球菌對(duì)青霉素、苯唑西林、紅霉素、慶大霉素、環(huán)丙沙星、復(fù)方新諾明、利福平、四環(huán)素、萬古霉素的耐藥率分別為87%、78.1%、84.4%、25.1%、51.0%、31.8%、10.4%、19.8%、0%。

3 討論

2016年送檢的細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本總數(shù)17136份, 標(biāo)本類型主要有痰、血、咽拭子、尿、體液等, 主要來源于住院各科室患者。本院G-桿菌為主要分離菌, 與報(bào)道一致［2］。在本研究中,對(duì)G-桿菌較敏感的藥物為阿米卡星、亞胺培南、美羅培南、哌拉西林/他唑巴坦, 同時(shí)在對(duì)其研究結(jié)果進(jìn)行分析后顯示,對(duì)G+球菌敏感的藥物是萬古霉素、利福平。細(xì)菌對(duì)青霉素、紅霉素、哌拉西林表現(xiàn)出較強(qiáng)的耐藥性。該次統(tǒng)計(jì)中大腸埃希菌產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)菌株有224株, 占33.1%, 肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs菌株有59株, 占22.2%。大腸埃希氏菌和肺炎克雷伯菌, ESBLs的產(chǎn)生很大程度上是由于β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物長期廣泛應(yīng)用而引起的［3］。以銅綠假單胞菌、鮑曼不動(dòng)桿菌為代表的非發(fā)酵菌耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重,目前對(duì)非發(fā)酵菌較敏感的藥物主要有碳青霉烯類(亞胺培南)和第四代頭孢菌素(頭孢吡肟、頭孢匹羅)以及某些喹諾酮類和氨基糖苷類抗生素［4］。大多數(shù)G-桿菌對(duì)酶抑制劑較敏感, 用加酶抑制劑與未加酶抑制劑抗菌藥物比較, 其耐藥率均有不同程度的下降。G+球菌中凝固酶陰性葡萄球菌主要來源于門診的前列腺液、精液、住院部的血和分泌物標(biāo)本,檢測出苯唑西林耐藥菌株共143株, 耐藥率為78.1%。但因其是皮膚、泌尿生殖道等處的正常菌群, 不排除采樣過程中的污染, 臨床醫(yī)生應(yīng)結(jié)合患者的臨床癥狀才能作出正確的診斷；共分離出23株耐苯唑西林金黃色葡萄球菌, 占金黃色葡萄球菌的21.1%。王堅(jiān)等［5］也報(bào)道, 耐甲氧西林金黃色葡萄球菌占重癥患者金黃色葡萄球菌感染中的大部分, 金黃色葡萄球菌因其耐藥率和耐藥強(qiáng)度高、多藥耐藥譜廣已經(jīng)成為醫(yī)院內(nèi)及社區(qū)獲得性感染的主要病原菌。

［1］ 葉應(yīng)嫵, 王毓三.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.南京:東南大學(xué)出版社, 1997:472-531.

［2］ 席維岳, 虎淑妍, 楊曉鳳, 等.慶陽臨床分離病原菌分布特點(diǎn)及耐藥性分析.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志, 2011, 21(15):3269-3271.

［3］ 高堂玲, 陳云鳳, 張馳, 等.276例老年人肺部感染痰培養(yǎng)及藥敏分析.中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào), 2009, 6(25):117-118.

［4］ 黃萍, 李峰.976株泌尿系感染病原菌及其耐藥性監(jiān)測.中國消毒學(xué)雜志, 2014, 31(4):375-376, 379.

［5］ 王堅(jiān), 吳梅, 陸煒方.48株金黃色葡萄球菌檢測耐甲氧西林金黃色葡萄球菌及藥敏分析.中國煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志, 2009,12(1):93-94.