聯(lián)合檢測(cè)血漿中PKM2和CEA在人結(jié)腸癌中的臨床價(jià)值

趙曉瑩

結(jié)腸癌是常見(jiàn)的消化道腫瘤, 其致死率居世界惡性腫瘤第三位。結(jié)腸癌早期癥狀無(wú)特異性, 發(fā)現(xiàn)時(shí)已處于中晚期,錯(cuò)失最佳治療時(shí)機(jī), 故需要有效的篩查手段。CEA是腫瘤標(biāo)記物, 診斷結(jié)腸癌的敏感性、特異性不高, 但對(duì)于協(xié)助預(yù)后的診斷意義重大。PKM2對(duì)腫瘤細(xì)胞有較高的表達(dá)性, 對(duì)于結(jié)腸癌敏感度高［1］。故為了探討聯(lián)合檢測(cè)血漿中PKM2和CEA在人結(jié)腸癌中的臨床價(jià)值, 作者特進(jìn)行此次研究, 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年11月～2016年9月于本院收治的80例結(jié)腸癌患者作為觀察組, 另選取同期80例健康體檢者作為對(duì)照組。觀察組男44例, 女36例；年齡33～65歲,平均年齡(59.11±8.09)歲；浸潤(rùn)深度為肌層/黏膜下層40例,漿膜層/漿膜外層40例；低分化程度24例, 中等分化程度39例, 高分化程度17例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的38例, 無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的42例；臨床Ⅰ～Ⅱ期的有30例, Ⅲ～Ⅳ期的有50例。對(duì)照組男42例, 女38例, 年齡35～65歲, 平均年齡(59.20±8.01)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：臨床資料完整的患者、治療依從性好經(jīng)病理檢查確診的患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他惡性腫瘤的患者、感染的患者、凝血功能障礙的患者。兩組患者性別、年齡等一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05), 具有可比性。所有患者已簽署知情同意書(shū), 此次研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)實(shí)施。

1.2 方法 指導(dǎo)患者在檢查前1晚12:00之后禁飲禁食, 于第2天空腹采血, 采取5 m l外周靜脈血, 給予抗凝處理, 在采血的30 min之內(nèi)進(jìn)行血漿分離, -20℃保存。采取雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)血漿PKM2, 按照1∶100的比例稀釋血漿標(biāo)本。采用免疫分析法檢測(cè)血漿C E A。

1.3 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn)［2］觀察比較兩組患者血漿PKM2和C E A的水平。C E A：參考值為0～3.4 n g/m l, 患者血漿C E A>3.4 n g/m l即可判定為陽(yáng)性；PKM2：臨界值為15 U/m l,當(dāng)患者P K M2>15 U/m l即可判定為陽(yáng)性。陽(yáng)性率=檢測(cè)出陽(yáng)性的例數(shù)/總例數(shù)×100%。通過(guò)觀察組檢測(cè)結(jié)果分析陽(yáng)性率和分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、浸潤(rùn)深度的關(guān)系,并比較單獨(dú)檢測(cè)和聯(lián)合檢測(cè)與病理檢查結(jié)果的符合率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示, 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者CEA、PKM2水平比較 觀察組患者血漿CEA、PKM2水平分別為 (35.40±5.60)U/m l、(28.03±4.41)n g/m l；對(duì)照組患者血漿CEA、PKM2水平分別為(1.73±0.20)U/m l、(11.77±2.09)n g/m l；觀察組CEA、PKM2水平高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

2.2 CEA、PKM2水平和病理參數(shù)之后關(guān)系分析 觀察組80例, 有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移38例, CEA、PKM2陽(yáng)性率分別為71.05%(27/38)、92.11%(35/38)；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移42例, CEA、PKM2陽(yáng)性率分別為38.10%(16/42)、59.52%(25/42)。臨床Ⅰ～Ⅱ期30例, CEA、PKM2陽(yáng)性率分別為36.67%(11/30)、63.33%(19/30)；臨床Ⅲ～Ⅳ期50例, CEA、PKM2陽(yáng)性率分別為70.00%(35/50)、90.00%(45/50)。低分化程度24例,CEA、PKM2陽(yáng)性率分別為62.50%(15/24)、91.67%(22/24)；中等分化程度39例, CEA、PKM2陽(yáng)性率分別為51.28%(20/39)、74.36%(29/39)；高分化程度17例, CEA、PKM2陽(yáng)性率分別為29.41%(5/17)、64.71%(11/17)。浸潤(rùn)深度為肌層/黏膜下層40例 , CEA、PKM2陽(yáng)性率分別為 42.5%(17/40)、67.50%(27/40)；浸潤(rùn)深度為漿膜層/漿膜外層40例, CEA、PKM2陽(yáng)性率分別為70.00%(28/40)、92.50%(37/40)。C E A和分化程度呈負(fù)相關(guān)(r=0.195, P<0.05), 跟淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、浸潤(rùn)深度呈正相關(guān)性(r=0.450、0.467、0.378, P<0.05)。PKM2跟分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、浸潤(rùn)深度均呈正相關(guān)性(r=0.393、0.480、0.459、0.337, P<0.05)。

2.3 單獨(dú)檢測(cè)C E A與病理檢查結(jié)果的符合率為77.50%(62/80)。單獨(dú)檢測(cè)PKM2與病理檢查結(jié)果的符合率為76.25%(61/80)。PKM2聯(lián)合C E A檢測(cè)與病理檢查結(jié)果的符合率為86.25%(69/80)。

3 討論

結(jié)腸癌是常見(jiàn)的惡性腫瘤, 預(yù)后差, 致死率高。該病的好發(fā)年齡為40～65歲, 與飲食習(xí)慣、遺傳等因素有密切相關(guān)性。患者的臨床表現(xiàn)主要為排便次數(shù)增多、糞便性狀改變、腹痛、腹部腫塊、貧血、發(fā)熱［3-6］。直腸指檢是首要檢查項(xiàng)目,可以判斷癌腫的部位、活動(dòng)度等。大便隱血試驗(yàn)是大規(guī)模普查或高危人群監(jiān)測(cè)的方法。X線、B超、CT等影像學(xué)檢查是有效而常用的檢查。內(nèi)鏡檢查是結(jié)腸癌診斷的金標(biāo)準(zhǔn)。以上檢查均是臨床常用的診斷結(jié)腸癌的方法。隨著分子生物學(xué)科技和腫瘤標(biāo)志物的發(fā)展, 其有助于協(xié)助臨床診斷, 本文特作此探討。CEA是血清糖蛋白類抗原, 其在正常的細(xì)胞組織之間的分布和癌組織存在明顯的差異：CEA主要存在于正常黏膜的表層上皮細(xì)胞, 呈線狀形態(tài)分布；CEA主要存在于癌組織的胞膜、胞漿、癌性腺管腔等部位, 失去其極向性。過(guò)去臨床常把CEA當(dāng)成結(jié)腸癌的特異性標(biāo)志物, 結(jié)腸癌患者的血清中會(huì)出現(xiàn)CEA的高表達(dá), 且和腫瘤的臨床分期有相關(guān)性,其不僅存在于結(jié)直腸癌血清之中, 還可存在于乳腺癌、肺癌等腫瘤中。雖然CEA對(duì)結(jié)腸癌的診斷特異性不高, 但卻對(duì)判斷結(jié)腸癌的預(yù)后有很大幫助。

丙酮酸激酶在腫瘤細(xì)胞的代謝途徑中發(fā)揮著重要的作用, 其可以分為四型, 丙酮酸激酶L型同工酶(PKL)、丙酮酸激酶M1型同工酶(PKM1)、PKM2、丙酮酸激酶R型同工酶(PKR), PKM2多存在于增生的組織之中, PKL主要存在于正常腎臟、肝臟等糖異生活躍的組織；PKR主要存在紅細(xì)胞之中。PKM1主要存在于心、腦等耗氧大的重要臟器。而PKM2主要存在于增生組織、腫瘤細(xì)胞等處。PKM2在正常組織中主要存在形式是同源四聚體, 而在腫瘤細(xì)胞中主要存在形式是二聚體形式, 且隨著腫瘤細(xì)胞的代謝濃度升高而迅速升高［7］。使用雙抗體夾心法可以準(zhǔn)確的檢測(cè)出血漿中PKM2的水平。觀察組CEA、PKM2水平高于對(duì)照組, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)腸癌的陽(yáng)性率和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、分化程度、浸潤(rùn)深度有相關(guān)性(P＜0.05)。聯(lián)合檢測(cè)血漿中CEA和PKM2的準(zhǔn)確率明顯優(yōu)于單獨(dú)檢測(cè)CEA與PKM2, 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。此次研究發(fā)現(xiàn)結(jié)腸癌患者體內(nèi)的CEA、PKM2水平明顯高于健康受檢者；隨著結(jié)腸癌分化程度的升高, 患者體內(nèi)的CEA、PKM2水平逐漸下降；發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者血漿CEA、PKM2陽(yáng)性率明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者；Ⅲ期、Ⅳ期患者的CEA、PKM2陽(yáng)性率也明顯高于腫瘤I期、Ⅱ期患者；單獨(dú)檢測(cè)的PKM2的敏感性、準(zhǔn)確性明顯高于CEA、但其特異性卻低于CEA檢測(cè),聯(lián)合檢測(cè)的敏感性、特異性、準(zhǔn)確性均優(yōu)于單獨(dú)檢測(cè)。

綜上所述, 聯(lián)合檢測(cè)血漿中CEA和PKM2水平, 是一種簡(jiǎn)單、無(wú)創(chuàng)、低成本的檢測(cè)技術(shù), 且其特異性、敏感度、準(zhǔn)確性較高, 有利于協(xié)助臨床對(duì)于結(jié)腸癌的診斷, 值得在臨床進(jìn)一步探討。

［1］焦鑫, 何思春, 王利君.聯(lián)合檢測(cè)血漿中PKM2和CEA在人結(jié)腸癌中的臨床意義.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床, 2016, 13(1):257-259.

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