比較研究沙門菌檢驗(yàn)中不同培養(yǎng)基的檢出效果

師秀娟

（新疆博湖縣疾病預(yù)防控制中心，新疆 博湖 841400）

沙門菌種類多樣，分別對(duì)人、動(dòng)物、人與動(dòng)物致病。據(jù)研究統(tǒng)計(jì)世界上細(xì)菌性食物中毒中，由沙門菌引起的中毒最多，其引起人體食物中毒的來源主要是肉類，蛋類、家禽、奶類食品也可引起[1-5]。沙門菌抗原結(jié)構(gòu)較復(fù)雜，通常分為菌體抗原、表面抗原、鞭毛抗原等。本研究比較沙門菌檢驗(yàn)中不同培養(yǎng)基的檢出效果，具體報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：采集2017年6月～10月市場(chǎng)上180例樣品牛、羊肉，各類90份，分別進(jìn)行三種不同平板培養(yǎng)基分離培養(yǎng)，A組接種SS瓊脂平板，B組接種HE瓊脂平板，C組接種NLD瓊脂平板。SS瓊脂平板：牛膽鹽8.5 g、牛肉侵出粉5.0 g、枸櫞酸鐵1.0 g、枸櫞酸鈉8.5 g、中性紅0.025 g、硫代硫酸鈉8.5 g、乳糖10.0 g、胨5.0 g、煌綠0.00033 g、瓊脂16.0 g、1000 mL蒸餾水。HE瓊脂平板：牛肉侵出粉3.0 g、氯化鈉5.0 g、蔗糖12.0 g、乳糖12.0 g、蛋白胨12.0 g、水楊素2.0 g、酸性復(fù)紅0.1 g、檸檬酸鐵納0.8 g、膽鹽20.0 g、溴麝香草酚蘭0.064 g、硫代硫酸鈉6.8 g、去氧膽酸鈉2.0 g、瓊脂15.0 g、1000 mL蒸餾水。XLD瓊脂平板：牛肉侵出粉3.0 g、蔗糖7.5 g、木糖3.75 g、乳糖7.5 g、硫代硫酸鈉6.8 g、去氧膽酸鈉2.5 g、氯化鈉5.0 g、L-賴氨酸5.0 g、林檬酸鐵鈉0.8 g、苯酚紅0.08 g、瓊脂15.0 g、1000 mL蒸餾水。制法均同常規(guī)。

1.2 方法：按照中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行操作和鑒定，用緩沖蛋白陳水（BPW）潤(rùn)濕15支無菌棉簽均勻涂抹180例樣品牛、羊肉，然后分別放入BPW前增菌液，在（36±1） ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6 h，加入四硫磺酸鈉煌綠增菌液和亞硒酸鹽胱氨酸增菌液，繼續(xù)培養(yǎng)18～24 h，取出樣品接種環(huán)增菌液中一環(huán)，劃線分別接種于A、B、C三組培養(yǎng)18～24 h，觀察三組平板上菌落生長(zhǎng)及特征。

1.3 檢驗(yàn)評(píng)價(jià)：培養(yǎng)基平板上出現(xiàn)無色透明菌落，有黑色中心表明呈陽性，出現(xiàn)可疑假陽性需要生化、MID細(xì)菌以及血清學(xué)鑒定。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：本研究中所得數(shù)據(jù)采用SPSS19.0進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料采用百分率（%）表示，使用χ2檢驗(yàn)，當(dāng)P＜0.05時(shí)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

假陽性是培養(yǎng)基平板上除沙門菌落出現(xiàn)的其他菌落，是對(duì)其他菌落抑制能力實(shí)驗(yàn)的重要指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，三組均出現(xiàn)可疑菌落，A組假陽性10份，出現(xiàn)概率為5.55%，B組假陽性17份，出現(xiàn)概率為9.44%，C組假陽性13份，出現(xiàn)概率為7.22%，差異顯著有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；陽性檢出A組41份，出現(xiàn)概率為22.77%，B組27份，出現(xiàn)概率為15.00%，C組18份，出現(xiàn)概率為10.00%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。得出SS瓊脂平板抑菌能力高于HE瓊脂平板和XLD瓊脂平板，檢出率SS瓊脂平板效果也最好。

3 討 論

隨著社會(huì)的發(fā)展，醫(yī)學(xué)的進(jìn)步，推動(dòng)著沙門菌鑒定技術(shù)的進(jìn)一步完善。沙門菌病是一種人畜共患的疾病，是一種常見的食物源性致病菌，其鑒定方法主要是依據(jù)形態(tài)生理生化特征、形態(tài)學(xué)特征、抗原特征、培養(yǎng)特征、噬菌體特征等。感染沙門菌的人以及帶菌者的糞便污染食品，會(huì)導(dǎo)致人發(fā)生食物中毒。其癥狀有惡心、頭痛、腹瀉、腹痛、嘔吐、畏寒、乏力、發(fā)熱、嗜睡等，持續(xù)時(shí)間一般為2～3 d。對(duì)此應(yīng)采取以下防范措施：不喝未經(jīng)處理的水；就餐、便后清洗雙手；接觸每種食物后仔細(xì)清洗道具避免感染其他食物；使用微波爐時(shí)要使食物內(nèi)外溫度一致（＞165 ℃）。沙門菌在水中繁殖較困難，其最易繁殖溫度為37 ℃，20 ℃以上即可大量繁殖。

通過沙門菌檢驗(yàn)效果表明，平板分離培養(yǎng)基操作簡(jiǎn)單，節(jié)省物資，還能增強(qiáng)沙門菌的生長(zhǎng)能力，但由于選擇性的檢出效果各培養(yǎng)基不盡相同，不同菌落鑒別也需改變，在實(shí)際運(yùn)用的時(shí)候，沒有具體的標(biāo)準(zhǔn)。一般來說，所有的沙門菌不可能由一種培養(yǎng)基檢驗(yàn)決定，所以實(shí)際檢驗(yàn)中，通常為兩種及兩種以上培養(yǎng)基分離培養(yǎng)，增強(qiáng)檢出率，提高檢驗(yàn)的科學(xué)性。

本研究中采用牛、羊肉做實(shí)驗(yàn)樣品，結(jié)果顯示SS瓊脂平板檢出率最高，具有強(qiáng)選擇性，HE瓊脂平板與XLD瓊脂平板具有中選擇性，檢驗(yàn)應(yīng)該采用SS瓊脂平板對(duì)比HE瓊脂平板或XLD瓊脂平板，提高檢驗(yàn)沙門菌的科學(xué)性。