直腸癌中OTU結(jié)構(gòu)域蛋白酶1的表達及其臨床意義

李小會，劉變英，雷宇峰，趙文媫，楊嫦娥

（山西煤炭中心醫(yī)院消化內(nèi)科，山西 太原 030006）

直腸癌（rectal cancer，RC）是最為常見的消化道惡性腫瘤之一，人體內(nèi)多種基因及蛋白的共同作用與其發(fā)生、發(fā)展有關(guān)[1]。泛素化（ubiquitination）是體內(nèi)蛋白質(zhì)數(shù)量、活性、蛋白-蛋白相互作用的重要調(diào)節(jié)方式，在生理以及病理過程中具有重要作用，包括細胞凋亡、細胞分裂、炎癥、癌變等[2-3]。轉(zhuǎn)移性生長因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）在腫瘤發(fā)生和發(fā)展中有著非常重要的作用，有研究證實，TGF-β引導(dǎo)的TGF-β通路的激活以及其抑制因子SMAD7的泛素化是腫瘤形成及惡化的重要原因。本研究利用免疫組化方法檢測91例患者的直腸癌組織及正常黏膜標本中OTUD1的表達情況，評估OTUD1與預(yù)后的相關(guān)性，探討OTUD1在直腸癌組織中的表達及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2010年1月～2013年3月收治的行根治性手術(shù)治療后的91例直腸癌組織及配對的正常直腸粘膜，所有的患者在術(shù)前均未進放化療等治療，并在術(shù)后病理組織學(xué)證實為直腸癌。91例直腸癌中男53例，女38例，年齡23～85歲，平均（46.80±6.3）歲。對所有的患者進行病理診斷，其包括38例高分化腺癌患者，41例中分化腺癌患者以及12例低分化腺癌患者。應(yīng)用TNM標準進行臨床分期，I期11例，II期23例，III期68例，IV期8例。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者68例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者23例。高位直腸癌（距肛緣12 cm以上）26例，中段直腸癌（距肛緣8～11 cm）31例，低位直腸癌（距肛緣7 cm以內(nèi)）34例。另在直腸癌根治術(shù)中取距離直腸癌組織5 cm以上的正常直腸組織標本91例做陰性對照。

1.2 結(jié)果判定

在本次的研究中，主要應(yīng)用雙盲原則來進行染色切片的讀取，并由本院兩位擁有豐富經(jīng)驗的病理科教授進行獨立的判斷。在X400高倍鏡下隨機挑選染色體切片的三個視野進行合理評分，并在結(jié)合了陽性細胞數(shù)以及陽性位置的基礎(chǔ)上來獲取判定結(jié)果，也就是對細胞的陽性率以及著色強度進行積分。其中0分表明患者染色體切片基本未著色，與背景相似；1分表明淺著色，陽性細胞率少于10%；2分表示中度著色，并明顯高于背景者，陽性細胞率處于10%～50%；3分表明染色體切片已經(jīng)成為了深棕色，陽性細胞率在50%～80%。4分表明染色體切片陽性細胞占據(jù)80%以上。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行分析，計量資料采用t檢驗；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 OTUD1在直腸癌組織與癌旁組織中的表達

由圖1所示，OTUD1在癌旁組織中多以強陽性表達（圖A），直腸癌組織中陽性表達較少，多以弱陽性或陰性為主（圖B）。OTUD1在正常直腸粘膜組織中多以強陽性表達，直腸癌組織中陽性表達較少，多以弱陽性或陰性為主，OTUD1在直腸癌組織中的陽性評分低于正常黏膜，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；OTUD1陽性表達的直腸癌患者中位生存時間明顯長于陰性表達患者的中位生存時間。OTUD1陽性表達患者中位生存時間為49.1個月，OTUD1陰性患者中位生存時間為30.3個月，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；COX多因素回歸分析顯示，OTUD1表達水平、腫瘤的位置、TNM分期、腫瘤分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是直腸癌預(yù)后的獨立危險因素，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；如表1所示，直腸癌組織和癌旁正常組織中OTUD1表達評分的平均值及其標準差分別為3.92±0.17和5.03±0.51，兩組間比較；差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

表1 正常直腸粘膜組織與直腸癌組織中OTUD1表達情況（±s）

表1 正常直腸粘膜組織與直腸癌組織中OTUD1表達情況（±s）

正常 癌 P細胞染色強度平均評分 2.07±0.32 1.89±0.22 0.037*陽性細胞數(shù)平均評分 2.51±0.46 2.05±0.14 0.031*OTUD1表達平均評分 5.03±0.51 3.92±0.17 0.019*

3 討 論

癌癥已成為我國主要的公共健康問題。在我國腫瘤的死亡占全部死因的1/4，導(dǎo)致惡性腫瘤病人死亡的主要原因是因為腫瘤的轉(zhuǎn)移。研究發(fā)現(xiàn)，TGF-β在腫瘤的早期發(fā)生時，扮演著抑癌因子的角色，而后在腫瘤發(fā)展過程中轉(zhuǎn)變成一個促癌因子，通過誘導(dǎo)腫瘤細胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（Epithelial-mesenchymal transition，EMT）和上調(diào)細胞遷移，使腫瘤獲得轉(zhuǎn)移、侵入的能力。TGF-β誘導(dǎo)的TGF-β信號通路受到泛素化修飾的調(diào)控以及逆調(diào)控，因而，對此過程的某個因子進行去泛素化很有可能導(dǎo)致TGF-β信號的激活或抑制。SMAD轉(zhuǎn)錄因子蛋白為TGF-β的下游信號傳遞者，其中，SMAD7可以抑制TGF-β信號通路的表達。因此，SMAD7的泛素化，可以導(dǎo)致TGF-β信號通路的激活不受限制。作為去泛素化酶，OTUD1可以很強地和SMAD7結(jié)合（和其他激活TGF-β的SMADs不結(jié)合），不僅穩(wěn)定SMAD7的蛋白水平，而且還加速了其降解細胞表面泛素的能力，從而抑制TGF-β信號通。Xie. F等證實，癌癥發(fā)生過程中，原癌基因RAS的增加和抑癌基因P53的丟失均能夠?qū)е翺TUD1表達的下調(diào)。同時，在乳腺癌的模型中，OTUD1是抑制乳腺癌肺轉(zhuǎn)移的去泛素化酶，OTUD1缺失還會導(dǎo)致患者的TGF-β信號得到顯著增強，轉(zhuǎn)移速度也會加快。此外在很多類型的惡性腫瘤中還容易出現(xiàn)OTUD1的丟失以及缺失狀況，對于患者的身體健康也會造成非常大的影響，比如在膠質(zhì)母細胞瘤以及肺癌中OTUD1的丟失比例都會達到50%以上。

本研究利用免疫組化方法檢測91例患者的直腸癌組織及正常黏膜標本中OTUD1的表達情況，評估OTUD1與預(yù)后的相關(guān)性，探討OTUD1在直腸癌組織中的表達及臨床意義。綜上所述，通過OTUD1蛋白的表達水平來進行直腸癌組織的檢測，其不僅能夠?qū)χ蹦c癌的發(fā)生與發(fā)展提供思路，并能夠作為一項有效的診斷指標，來對直腸癌患者的后續(xù)治療以及預(yù)后來提供一定的治療依據(jù)，因此具備有良好的臨床機制。值得進行臨床應(yīng)用與推廣。

[1] Bustamante-Lopez L,Nahas CS,Nahas SC,et al. Understanding the factors associated with reduction in the number of lymph nodes in rectal cancer patients treated by neoadjuvant treatment[J].Int J Colorectal Dis.2017,32(6):925-7.

[2] Kravtsova-Ivantsiv Y,Ciechanover A.The ubiquitin-proteasome system and activation of NF-kappaB:involvement of the ubiquitin ligase KPC1 in p105 processing and tumor suppression[J].Mol Cell Oncol. 2015,2(4):e1054552.