DRD2基因rs1800497多態性與精神分裂癥發病和認知功能的關系

徐曉文+惠李+谷曉楚+吳兢勤+錢志平+孫洪言+潘名志+陳潔+朱宏亮+王小瓊+尹曉莉+臺勇

[摘要] 目的 調查多巴胺D2受體（DRD2）基因rs1800497多態性與慢性精神分裂癥發病和認知功能的關系。 方法 招募567例慢性精神分裂癥患者和421例健康受試者，認知功能采用重復性成套神經心理狀態測驗量表（RBANS）評估，DRD2基因rs1800497多態性采用TaqMan SNP方法進行基因分型為：C/C、C/T、T/T。收集一般人口學和臨床數據。 結果 慢性精神分裂癥組和健康對照組DRD2基因rs1800497位點的等位基因頻率的分布沒有顯著性差異（χ2=0.05，df=1，P=0.83），但基因型頻率的分布出現顯著性差異（χ2=7.00，df=2，P=0.03）。精神分裂癥患者依據rs1800497位點基因型分組分析：組間延遲記憶分值出現顯著差異（F=3.91，P=0.02）。 結論 DRD2基因rs1800497位點可能參與了精神分裂癥的發病，并進一步可能影響精神分裂癥的認知功能。

[關鍵詞] 精神分裂癥；DRD2基因；認知功能；rs1800497

[中圖分類號] R749.3 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701（2017）34-0001-03

Relationship between rs1800497 polymorphism of DRD2 gene and pathogenesis and cognitive function of schizophrenia

XU Xiaowen1 HUI Li1 GU Xiaochu1 WU Jingqin1 QIAN Zhiping1 SUN Hongyan1 PAN Mingzhi1 CHEN Jie1 ZHU Hongliang1 WANG Xiaoqiong2 YIN Xiaoli2 TAI Yong2

1.Guangji Hospital Affiliated to Soochow University， Suzhou 215137， China； 2.Department of Psychiatry， Affiliated Corning Hospital， Wenzhou Medical University， Wenzhou 325000， China

[Abstract] Objective To investigate whether rs1800497 polymorphism of Dopamine D2 receptor（DRD2） gene associated with the onset and cognitive function of chronic schizophrenia. Methods A total of 567 patients with chronic schizophrenia and 421 healthy subjects were enrolled in this study. Cognitive function was assessed by the Repeatable Battery for the Assessment of Neuropsychological Status（RBANS）. The rs1800497 polymorphism of DRD2 gene was genotyped by TaqMan SNP method as follows： C/C， C/T， T/T. The general demographic and clinical data were collected. Results There was no significant difference in allele frequencies of rs1800497 in the DRD2 gene between the chronic schizophrenia group and the healthy control group（χ2=0.05， df=1， P=0.83）. But there was a significant difference in the distribution of genotype frequencies（χ2=7.00， df=2， P=0.03）. Schizophrenia patients were grouped and analyzed according to rs1800497 locus genotypes. There was a significant difference in delayed memory scores between groups（F=3.91， P=0.02）. Conclusion The rs1800497 site of DRD2 gene may be involved in the pathogenesis of schizophrenia and may further affect the cognitive function of schizophrenia.

[Key words] Schizophrenia； DRD2 gene； Cognitive function； rs1800497

國內外研究顯示，多巴胺D2受體（Dopamine D2 receptor， DRD2）與精神分裂癥的發病機制顯著相關。該基因位于染色體11q22～23，長度超過270 kb[1]，參與精神分裂癥患者的精神活動及認知異常的可能機制為：腺苷酸環化酶與該基因負耦聯，作用于第二信使從而抑制鈣離子通道，并激活鉀離子通道[2]。精神分裂癥尸檢和活體PET研究發現紋狀體DRD2的密度顯著增高[3]。Ikeda等[6]發現DRD2基因rs1800497位點與利培酮治療首發精神分裂癥療效具有相關性。此外，有研究報道[7]DRD2基因變化與精神分裂癥患者的記憶異常相關。以上研究結果提示DRD2基因可能是精神分裂癥發病的易感基因，并影響精神分裂癥患者的認知功能。因此，本研究仍需要進一步驗證DRD2基因rs1800497多態性是否參與精神分裂癥的發病，并影響其認知功能?，F報道如下。endprint

1 對象與方法

1.1 研究對象

項目方案和知情同意書經蘇州大學附屬廣濟醫院倫理委員會批準，項目執行時間2013年9月～2016年3月。567例慢性精神分裂癥患者（男378例，女189例）血液樣本來自本院檢驗科，平均年齡（46.6±9.1）歲，符合入組標準：①國際疾病分類標準第10版和《中國精神病分類與診斷標準（第2版）》修訂本診斷為精神分裂癥；②年齡18～60歲，病程超過2年；③能參與臨床癥狀和認知評估；④自愿參加，并簽署知情同意書。排除標準：①無精神分裂癥受試者；②中樞神經系統疾病受試者等；③軀體疾病受試者，如感染、糖尿病和高血壓等；④妊娠期或哺乳期婦女。

421例健康受試者（男281例，女140例）來自蘇州市市立醫院健康體檢中心，平均年齡（47.1±9.0）歲，入組標準：①既往或目前無精神疾病及家族史；無中樞神經系統疾??；無酒精依賴和物質依賴史；②身體健康；③自愿參加本研究。排除標準：①精神分裂癥受試者；②中樞神經系統疾病受試者；③軀體疾病受試者，如感染、糖尿病和高血壓等；④妊娠期或哺乳期婦女?；颊呔栽竻⒓硬⒑炇鹬橥鈺?。精神分裂癥患者和健康受試者兩組資料間具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 臨床資料收集 采用自制CRF表收集患者一般社會人口學資料，主要包括性別、年齡、民族、受教育水平、家族疾病史等和疾病相關的資料。并采用重復性成套神經心理狀態測驗（the Repeatable Battery for the Assessment of Neuropsychological Status，RBANS）[8，9]評估受試者的認知功能。

1.2.2 DNA提取 采集所有受試者清晨空腹靜脈血5 mL于促凝管中，分離血漿后剩余血液樣本按美國Promega公司的DNA試劑盒方案提取DNA，然后Nanodrop 2000檢測DNA濃度，按每微升50 ng稀釋成為工作液，每管分裝100 μL-86℃冰箱保存備用。

1.2.3 DRD2基因 rs1800497位點的檢測應用Thermo公司QuantStudioTM Dx 實時熒光定量PCR設備，訂購Thermo公司DRD2基因rs1800497位點的熒光探針和引物（編號為：C_7486676_10，貨號：4351379），采用TaqMan SNP基因分型檢測方法對該多態性進行基因分型，其結果為CC、CT和TT。

1.3 統計學分析

采用SPSS17.0統計學軟件對兩組的一般人口學和臨床數據計數資料采用方差分析，計數資料采用χ2檢驗，在線遺傳統計SHEsis軟件分別分析慢性精神分裂癥患者組和健康對照組的該基因位點是否符合Hardy-Weinberg（H-W）遺傳平衡度，并檢測該基因位點是否是精神分裂癥的易感位點。按該基因的基因型分組，應用方差分析對精神分裂癥認知功能進行分析，并調整協變量，檢驗水準P<0.05。

2 結果

2.1 DRD2rs1800497基因型在慢性精神分裂癥組和健康對照組中的H-W遺傳平衡

SHEsis在線遺傳軟件分析結果顯示精神分裂癥患者組和健康對照組之間DRD2 rs1800487的基因型分布均符合H-W遺傳平衡（χ2=6.11，P>0.05；χ2=1.83，P>0.05）。

2.2 DRD2rs1800497與慢性精神分裂癥

DRD2基因rs1800497位點的等位基因頻率分布在精神分裂癥和健康對照組中分布沒有顯著性差異（χ2=0.05，df=1，P=0.83），但基因型在兩組之間具有顯著性差異（χ2=7.00，df=2，P=0.03），見表1。進一步調整性別和年齡，兩組間基因型仍然沒有顯著差異（P<0.05）。

2.3 DRD2rs1800497與慢性精神分裂癥患者認知功能

DRD2基因rs1800497位點的基因型和精神分裂癥患者的認知功能之間的關系，見表2。結果表明rs1800497位點的基因型組間延遲記憶分具有顯著差異（F=3.91，P=0.02）。

3 討論

在漢族人群中，DRD2基因的rs1800497多態性是慢性精神分裂癥的易感基因位點，提示該基因位點與漢族精神分裂患者的發病具有相關性。Parsons等研究人員發現DRD2rs1800497多態性在歐洲精神分裂癥和對照組中的等位基因和基因型分布存在顯著性差異，表明該位點可能是精神分裂癥的易感基因位點[10]。以前研究的結果發現DRD2啟動子區域存在-141C del/ins（-141C插入/缺失）位點的突變影響該基因的編碼區轉錄、表達和翻譯等各種變化，并與瑞典精神分裂癥發病具有密切的相關性[11，12]。Meta分析結果顯示：DRD2基因外顯子上的7個位點（如：rs1801028、rs6275和rs6277）與精神分裂癥發病也具有相關性[13，14]。Muller等[6]的研究顯示DRD2rs 1800497位點參與了抗精神病藥物導致精神分裂癥患者的體重增加。此外，Ikeda等[7]的研究也顯示DRD2 rs1800497位點被看作利培酮治療首發精神分裂癥的重要生物遺傳標記。然而也有研究發現，DRD2基因的啟動子區域-141C del/ins位點與英國白種人精神分裂癥發病不相關，這種不一致的結果可能是由于種族、性別等因素的差異造成。因此，未來有必要研究該位點在首發精神分裂癥發病中是否發揮作用，并進一步研究該基因其他位點及位點間的交互作用在首發精神分裂癥發病中的作用。

我們的結果還發現：DRD2基因的rs1800497多態性與慢性精神分裂癥的延長記憶具有顯著的相關性。該基因位點影響精神分裂癥的認知功能的可能機制：該位點堿基的變化可能影響多巴胺神經遞質的傳遞，進而出現精神分裂癥的延長記憶的異常。有研究[15]已發現DRD2基因突變與精神分裂癥患者記憶功能和工作記憶異常具有相關性。因此，該基因位點的變化可能涉及慢性精神分裂癥的認知功能。endprint

本研究存在的不足：①僅檢測DRD2基因的一個多態性位點，并不能代表該基因的突變位點，因此，應該檢測該基因其他功能位點，進行多位點聯合分析，并進一步與環境因素聯合分析對精神分裂癥發病的影響；②該基因位點在不同種族的突變率不同，因此，應該在其他不同地區、不同種族開展研究，進一步驗證該位點是否是精神分裂癥的易感位點；③該研究樣本主要來自每月固定醫院患者體檢，因而可能不同醫生對患者的診斷存在差異；④本研究招募的是長期住院慢性患者，藥物和病程等干擾因素多，因此，采用首發精神分裂癥患者進一步研究是必要的。

總之，DRD2基因rs1800497位點可能參與了精神分裂癥的發病機制，并且影響精神分裂癥受試者的認知功能。然而，這個結果僅僅是初步結果，仍然需要在不同地區、不同種族的首發精神分裂癥患者中進行大樣本的驗證。

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（收稿日期：2017-09-19）endprint