彭 剛,曾亞妮,李海英,許嘉曼,龔雪海,喬 方
(1.深圳職業(yè)技術(shù)學(xué)院應(yīng)用化學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院,廣東 深圳 518055;2.深圳西麗果場(chǎng),廣東 深圳 518055)
作為食物源,蔬菜不僅供給人類日常營(yíng)養(yǎng)消耗,還保障了人體正常代謝運(yùn)行。但隨著社會(huì)生活水平提高,人們不再只注重蔬菜本身所提供的基礎(chǔ)性營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),而逐漸偏向于蔬菜所含的功能性營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[1-2]。因而近年來(lái)蔬菜中各種功能性營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的檢測(cè)與分析成為了研究重點(diǎn)。日常代謝過(guò)程中,人體會(huì)在體內(nèi)產(chǎn)生大量自由基,這類物質(zhì)過(guò)量會(huì)損害機(jī)體細(xì)胞和組織,進(jìn)而影響機(jī)體功能,引發(fā)病變[3-4]。而研究發(fā)現(xiàn)這類機(jī)體功能性病變,可通過(guò)食用大量蔬菜進(jìn)行有效預(yù)防[5],表明蔬菜中富含大量生物活性物質(zhì),能高效清除羥自由基和超氧陰離子自由基[6-7]。隨后研究發(fā)現(xiàn),這類生物活性物質(zhì)主要為維生素C(Vc)、膳食纖維、色素等[8]。但在近年研究中發(fā)現(xiàn)總酚和總黃酮也具有較強(qiáng)的自由基清除活性[9]。由于蔬菜種類不同,生長(zhǎng)習(xí)性不同,導(dǎo)致其積累營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的種類和含量存在明顯差異,使不同種類蔬菜在功能活性物質(zhì)積累方面也存在不同。例如,葉菜類蔬菜的還原糖和粗纖維含量明顯高于其他蔬菜,而果菜類蔬菜可滴定酸(TA)和氨基酸含量較高,根菜類蔬菜各營(yíng)養(yǎng)成分含量總體偏低[10]。綜合分析7種葉菜類蔬菜營(yíng)養(yǎng)成分時(shí)發(fā)現(xiàn),菠菜和油菜綜合營(yíng)養(yǎng)價(jià)值最高,生菜最低[11]。盡管過(guò)去在不同種類蔬菜營(yíng)養(yǎng)成分分析方面已進(jìn)行了大量研究,但對(duì)各蔬菜營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),特別是生物活性物質(zhì)種類、含量及其與自由基清除能力相關(guān)性的綜合分析相對(duì)匱乏。本試驗(yàn)以深圳市售7種常見(jiàn)葉菜類蔬菜為研究對(duì)象,分別測(cè)定其營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(水分、總糖、可滴定酸、膳食纖維)和生物活性物質(zhì)(葉綠素、類胡蘿卜素、Vc、總酚、總黃酮)含量,并結(jié)合蔬菜汁對(duì)DPPH和ABTS自由基清除能力進(jìn)行相關(guān)性分析,以探究蔬菜中各成分與其自由基清除能力之間的關(guān)系。利用上述結(jié)果,綜合評(píng)價(jià)各蔬菜營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,為科學(xué)指導(dǎo)人們健康飲食提供理論基礎(chǔ)。
新鮮番薯葉、菠菜、麥菜、小白菜、生菜、上海青、菜心均購(gòu)于深圳市南山農(nóng)批市場(chǎng),主產(chǎn)地為東莞市。蔬菜采購(gòu)回實(shí)驗(yàn)室后,摘除病葉和壞葉,清洗后用剪刀剪碎裝入寫(xiě)好標(biāo)簽的自封袋中,放入-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>
蔬菜中各營(yíng)養(yǎng)成分含量測(cè)定均按照相關(guān)方法進(jìn)行,5次重復(fù)。蔬菜含水量測(cè)定參照GB5009.3-2010[12];膳食纖維含量測(cè)定采用Megazyme膳食纖維試劑盒所提供方法;色素含量測(cè)定參照汪志國(guó)等[13]方法。
Vc含量測(cè)定:先將20 g蔬菜與100 mL 2%草酸混合勻漿后,加入3 g高嶺土除色,過(guò)濾定容至100 mL,濾液根據(jù)徐曉舒等[14]方法測(cè)定。
稱取20 g蔬菜與200 mL蒸餾水勻漿得到蔬菜汁,直接定容至200 mL,用于測(cè)定對(duì)DPPH和ATBS自由基清除能力[15]。
同方法得蔬菜汁過(guò)濾后,濾液定容至200 mL,分別采用蒽酮比色法測(cè)定總糖含量[16],采用酸堿滴定法測(cè)定酸含量[16],采用福林酚法測(cè)定總酚含量[17],采用硝酸鋁-亞硝酸鈉-氫氧化鈉法測(cè)定總黃酮含量[18]。
利用Excel 2010和SPSS 13.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析和相關(guān)分析。
由表1可知,不同蔬菜間基礎(chǔ)性營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量存在顯著差異。7種蔬菜含水量基本都在90%以上,其中次生菜含水量最高、為95%,上海青、菜心和菠菜次之,在92%左右,番薯葉含量最低、為89%。番薯葉總糖含量遠(yuǎn)高于其他蔬菜、約為3.0 mg/g,上海青最低、約為1.5 mg/g。可滴定酸含量表現(xiàn)為菜心>小白菜>番薯葉>菠菜>生菜>麥菜>上海青,其中菜心可滴定酸含量最高、為2.45%,上海青最低、僅1.19%,前者約為后者的2倍。
從圖1可以看出,不同蔬菜不可溶性膳食纖維(IDF)含量遠(yuǎn)高于可溶性膳食纖維(SDF)含量,且不同蔬菜之間膳食纖維含量存在顯著差異。番薯葉和菠菜的IDF及SDF含量均顯著高于其他蔬菜。而小白菜IDF與番薯葉和菠菜相近、約25 mg/g,但其SDF含量則遠(yuǎn)低于番薯葉和菠菜、約6 mg/g。麥菜膳食纖維含量較低,其SDF含量和IDF含量相近、均在7 mg/g左右。其他幾種蔬菜中,菜心SDF含量最低、僅4 mg/g。

表1 不同蔬菜基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的比較
注:同列數(shù)據(jù)后小寫(xiě)英文字母不同者表示差異顯著。

圖1 7種蔬菜SDF、IDF含量比較
從圖2可以看出,除生菜葉綠素含量偏低外,其他幾種蔬菜葉綠素含量相近,介于1.2~1.6 mg/g之間。上海青、菜心、菠菜和小白菜葉綠素含量較高,約為1.5 mg/g。而番薯葉和麥菜葉綠素含量則在1.2 mg/g左右。生菜葉綠素含量為0.38 mg/g,遠(yuǎn)低于其他蔬菜。與葉綠素含量類似,生菜和菠菜外類胡蘿卜素含量基本相近、為20 μg/g左右(圖3),生菜類胡蘿卜素含量最低、約7 μg/g,而菠菜類胡蘿卜素含量則遠(yuǎn)高于其他蔬菜,約為48 μg/g。

圖2 7種蔬菜總?cè)~綠素含量比較

圖3 7種蔬菜總類胡蘿卜素含量比較
不同蔬菜之間Vc含量存在明顯差異,且波動(dòng)幅度較大(圖4)。7種蔬菜中,菜心Vc含量遠(yuǎn)高于其他蔬菜、每100 g達(dá)到305 mg,上海青、小白菜和菠菜的Vc每100 g含180 mg左右,番薯葉每100 g含量約為80 mg,生菜和麥菜中的Vc含量最低、每100 g在26 mg以下。

圖4 7種蔬菜中Vc含量比較
與蔬菜中Vc含量差異較大不同,不同蔬菜中總黃酮和總酚含量相對(duì)較穩(wěn)定(圖5、圖6)。生菜和麥菜中的總酚含量及總黃酮含量均遠(yuǎn)低于其他幾種蔬菜,特別是生菜的總酚含量極低、每100 g約含1 mg。菜心總酚和總黃酮含量雖然高于麥菜,但明顯低于小白菜。上海青、菠菜和番薯葉在總酚含量方面雖然相差較小、每100 g均在40 mg左右,但是番薯葉總黃酮含量明顯高于前面二者,每100 g達(dá)到1019 mg。而上海青和菠菜總黃酮含量每100 g分別在551、436 mg。

圖5 7種蔬菜總黃酮含量比較

圖6 7種蔬菜總酚含量比較
7種蔬菜加水后榨汁,進(jìn)行DPPH和ATBS自由基清除能力測(cè)試,以100 g蔬菜達(dá)到所需Vc量表示(AEAC/100mf),數(shù)值越大表示自由基清除能力越強(qiáng)。不同蔬菜汁對(duì)DPPH和ATBS自由基清除能力存在較大差異,但二者的變化趨勢(shì)相似(圖7)。番薯葉汁無(wú)論對(duì)DPPH還是ATBS自由基均具有最高的清除活性,特別是對(duì)DPPH自由基的清除能力遠(yuǎn)高于其他蔬菜。小白菜、上海青和菠菜也具有較高的自由基清除活性。而生菜和麥菜對(duì)自由基清除活性最低,對(duì)ATBS自由基的清除能力遠(yuǎn)低于其他幾種蔬菜。不同蔬菜汁對(duì)兩種自由基的清除能力表現(xiàn)為番薯葉>上海青>小白菜>菠菜>菜心>麥菜>生菜。

圖7 7種蔬菜汁對(duì)DPPH和ATBS自由基清除能力比較
不同蔬菜各營(yíng)養(yǎng)成分與自由基清除能力的相關(guān)性分析顯示,蔬菜中不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與自由基清除能力相關(guān)性存在較大差異,但對(duì)不同自由基之間基本保持一致(表2、表3)。
蔬菜總酚和總黃酮含量與其自由基清除能力的強(qiáng)弱存在較強(qiáng)的正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)達(dá)0.8以上),即二者含量高低直接影響對(duì)DPPH和ATBS自由基的清除能力。同樣,膳食纖維含量也與自由基清除能力存在明顯正相關(guān),相關(guān)系數(shù)約為0.6。其中不可溶性膳食纖維對(duì)自由基的清除能力略高于SDF。對(duì)葉綠素和類胡蘿卜素而言,其對(duì)DPPH和ATBS自由基清除活性在本試驗(yàn)中顯示偏低(相關(guān)性系數(shù)低于0.6),但二者對(duì)清除ATBS自由基的相關(guān)性(相關(guān)系數(shù)0.6)強(qiáng)于其對(duì)DPPH自由基的相關(guān)性(相關(guān)系數(shù)0.4)。而總糖、可滴定酸及維生素C含量對(duì)自由基清除能力呈現(xiàn)較弱的相關(guān)性甚至負(fù)相關(guān)。
本研究結(jié)果表明,7種葉菜類蔬菜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量和自由基清除活性存在較大差異,這可能與蔬菜本身特征有關(guān),而非栽培條件[18]。生菜和麥菜由于生長(zhǎng)速度較快、含水量偏高,其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生物活性物質(zhì)積累方面偏少,直接導(dǎo)致其在自由基清除能力方面顯著弱于其他蔬菜。膳食纖維分析結(jié)果發(fā)現(xiàn),麥菜是唯一一個(gè)不可溶性膳食纖維與可溶性膳食纖維比例接近1的蔬菜,明顯不同于以往其他研究結(jié)果[19]。柑橘膳食纖維含量分析結(jié)果顯示,柚果肉中SDF與IDF含量比例也為1[20]。雖然Vc體外自由基清除活性較高,但作為含量最高的蔬菜,菜心的自由基清除活性并未明顯高于番薯葉、上海青等,說(shuō)明蔬菜中Vc含量高低與其抗氧化活性不存在明顯相關(guān)性[21-22]。

表2 不同蔬菜營(yíng)養(yǎng)成分含量與DPPH自由基清除能力的相關(guān)性分析

表3 不同蔬菜營(yíng)養(yǎng)成分含量與ATBS自由基清除能力的相關(guān)性分析
自由基清除活性與蔬菜中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量相關(guān)性的分析結(jié)果也顯示,Vc與蔬菜汁自由基清除活性呈現(xiàn)較弱的相關(guān)性(相關(guān)系數(shù)<0.3)。而蔬菜中總酚和總黃酮含量與自由基清除能力呈現(xiàn)強(qiáng)正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)>0.8)[6,23-24]。研究還發(fā)現(xiàn),蔬菜中膳食纖維也與自由基清除活性存在較強(qiáng)相關(guān)性(相關(guān)系數(shù)>0.5),這是由于無(wú)論是IDF,還是SDF均具有較強(qiáng)的抗氧化活性[19,25-26]。盡管葉綠素和類胡蘿卜素被認(rèn)為是日常飲食中重要的天然抗氧化劑之一[27],但本研究結(jié)果顯示,二者與自由基清除能力的相關(guān)系數(shù)偏低,特別是對(duì)DPPH。這可能是由于本試驗(yàn)采用的是蔬菜汁,即水提物,而不是醇提物,導(dǎo)致色素類物質(zhì)抗氧化活性被低估[23,28]。
綜上可知,不同蔬菜營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量不同,直接影響其功能活性,進(jìn)而影響各類蔬菜在人們?nèi)粘I钪械淖饔?。鑒于總酚、總黃酮、膳食纖維、色素等生物活性物質(zhì)含量在自由基清除能力方面的功能,本試驗(yàn)認(rèn)為番薯葉、上海青、菠菜和小白菜的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高,而生菜和麥菜由于較低的生物活性物質(zhì)含量,使其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值偏低。
[1] 郭長(zhǎng)江,高蔚娜,謝宗愷,等. 中國(guó)蔬菜、水果抗氧化作用與有效成分的研究進(jìn)展[J]. 生命科學(xué),2015,27(8):1000-1004.
[2] 吳開(kāi)莉,呂華偉,顏繼忠. 菠菜中化學(xué)成分及藥理活性研究進(jìn)展[J]. 食品與藥品,2016,18(3):222-227.
[3] Scalbert A,Manach C,Morand C,et al. Dietary polyphenols and the prevention of diseases[J].Critical Reviews in Food Science Nutrition,2005,45(4):287-306.
[4] Huang R Y,Yu Y L,Cheng W C,et al.Immunosuppressive effect of quercetin on dendritic cell activation and function[J]. Journal of Immunology,2010,184(12):6815-6821.
[5] 苑林宏,肖忠新,麻微微,等. 富含黃酮類蔬菜和果汁對(duì)機(jī)體抗氧化功能影響[J]. 中國(guó)公共衛(wèi)生,2012,28(6):870-871.
[6] 周佳,阮征,江波,等. 蔬菜抗氧化能力與酚酸和總黃酮相關(guān)性研究[J]. 食品與機(jī)械,2012,28(3):139-143.
[7] 李鵬,王曉,葛紅娟,等. 吉林市售20種蔬菜抗氧化活性的比較研究[J]. 吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報(bào),2015,36(1):22-24.
[8] 魯博,談平. 蔬菜的營(yíng)養(yǎng)功能與保健價(jià)值[J].上海蔬菜,2010(1):76-77.
[9] Bosetti C,Rossi M,Mclaughlin J K,et al.Flavonoids and the risk of renal cell carcinoma[J]. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev,2007,16(1):98-101.
[10] 李英麗,宋朝輝,王立婭,等. 不同類型蔬菜營(yíng)養(yǎng)成分的比較[J]. 北方園藝,2008(10):64-65.
[11] 李元亭,李軍祥,李慶. 不同蔬菜營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量的比較研究[J]. 中國(guó)園藝文摘,2010(7):26-28.
[12] GB5009. 3-2010《食品中水分的測(cè)定》[S].
[13] 汪志國(guó),王靜,李國(guó)剛. 雙波長(zhǎng)分光光度法同時(shí)測(cè)定葉綠素a、b[J]. 中國(guó)環(huán)境監(jiān)測(cè),1999,15(5):21-22.
[14] 徐曉舒,劉成俊,毛興龍. 遵義市16種常見(jiàn)果蔬中維生素C含量的檢測(cè)[J]. 蔬菜,2012(6):49-50.
[15] Singleton V L,Joseph A,Rossi J R. Colorimetry of total phenolics with phosphomolybdic-phosphotungstic acid reagents[J]. American Journal of Enology and Viticulture,1965,16:144-158.
[16] 雷剛,胡志輝,陳禪友. 蒽酮比色定糖法實(shí)驗(yàn)條件的改進(jìn)探討[J]. 長(zhǎng)江蔬菜,2001(8):38-39.
[17] 陳建華. 二十七種蔬菜中黃酮類物質(zhì)的含量及其在烹飪中的變化規(guī)律研究[D]. 北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué),2005.
[18] Ervin E M,Kariuki J K. Demonstrating the minimal impact of cultivation conditions on antioxidants in fruits and vegetables by differential pulse voltammetry[J]. International Journal of Food Properites,2016,19:826-836.
[19] 闞茗銘,葉發(fā)銀,趙國(guó)華. 成熟度對(duì)甘藍(lán)膳食纖維單糖組成及抗氧化活性的影響[J]. 食品科學(xué),2017,38(5):60-64.
[20] 祝淵,陳力耕,胡西琴. 柑橘果實(shí)膳食纖維的研究[J]. 果樹(shù)學(xué)報(bào),2003,20(4):256-260.
[21] 方敏,王耀峰,宮智勇. 15種水果和33種蔬菜抗氧化活性研究[J]. 食品科學(xué),2008,29(10):97-100.
[22] 陳金娥,李冬梅,趙戌利,等. 10種生、熟蔬菜中Vc含量及抗氧化性對(duì)比研究[J]. 食品科技,2012,37(4):57-59,64.
[23] 馬杰,孫勃,薛生玲,等. 豌豆尖主要營(yíng)養(yǎng)成分、生物活性物質(zhì)及抗氧化能力分析[J]. 食品與機(jī)械,2016,32(4):47-51.
[24] 劉澤靜,薛生玲,夏雪,等. 魚(yú)腥草不同部位生物活性物質(zhì)和抗氧化能力分析[J]. 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2016,28(6):992-998.
[25] 周小理,錢(qián)韻芳,周一鳴. 植物性膳食纖維抗氧化活性的研究與應(yīng)用[J]. 食品與機(jī)械,2010,26(3):158-160.
[26] Kendall C W C,Esfahani A,Jenkins D J A. The link between dietary fibre and human health[J].Food Hydrocolloids,2010,24(1):42-48.
[27] Baino A,Nobile M A D. Antioxidant compounds from vegetable matrices:biosynthesis,occurrence,and extraction systems[J]. Critical Reviews in Food Science and Nutrition,2016,56:2053-2068.
[28] 李璐,姚美,張華峰,等. 3種蔥屬蔬菜水提物、醇提物與多糖的抗氧化活性研究[J]. 陜西師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2015,43(3):98-103.