農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測能力驗證問題和技巧分析

張建忠 吳 瑤 周沫瑤

（江蘇省儀征市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢測中心，江蘇儀征 211400）

1 農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測能力驗證的準備工作

1.1 人員檢測人員具備農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)的能力，具備上崗證書，選擇專業(yè)技術(shù)水平較高、試驗操作技能強、工作態(tài)度好的人員參加能力驗證工作。同時領(lǐng)導(dǎo)要重視，至少有兩三人協(xié)同進行檢測，主要和關(guān)鍵步驟應(yīng)由同一人操作，檢測全過程及關(guān)鍵步驟需由另一人監(jiān)督和確認，遇到疑問要沉著應(yīng)對、團結(jié)協(xié)作、群策群力。

1.2 設(shè)備儀器設(shè)備必須是檢定合格設(shè)備。調(diào)試至最佳狀態(tài)，因氣相色譜只有1臺，中途要換襯管、色譜柱，有機磷有時出峰不太穩(wěn)定，因此需先檢測有機磷后檢測菊酯類，早開機平衡。

1.3 標準物質(zhì)能力驗證前要及時采購新的標樣，配成單標和混標，提前上機檢測。最好與省農(nóng)檢中心采購相同單位生產(chǎn)的標準物質(zhì)。

1.4 玻璃器皿和試劑耗材三角瓶、刻度試管、高型燒杯、刻度試管和容量瓶等，色譜純乙腈、丙酮、正己烷、甲醇和二氯甲烷等，以及Florisil固相萃取小柱、氨基固相萃取小柱。

1.5 操練通過添加回收試驗，確保儀器設(shè)備、標準物質(zhì)、檢測方法等檢測全過程沒有問題，發(fā)現(xiàn)問題可提前解決。能力驗證時即可沉著應(yīng)對。

2 能力驗證檢測基本流程

一是領(lǐng)樣品，領(lǐng)回考核樣品后靜置一段時間。二是取空白樣和一個考核樣進行前處理并上機檢測。三是初步定性和定量（圖譜分析），即配置每種農(nóng)藥選擇一種濃度的混合農(nóng)藥標準溶液，判斷樣品中含有哪幾種農(nóng)藥，根據(jù)峰高和峰面積推算出農(nóng)藥的含量。四是根據(jù)定性結(jié)果配置對應(yīng)農(nóng)藥的標準曲線。五是質(zhì)量控制。根據(jù)推算的含量，確定質(zhì)控樣品加標濃度。六是定量。對2個平行樣和質(zhì)控樣進行前處理并上機檢測，數(shù)據(jù)分析得出目標農(nóng)藥的濃度。

3 能力驗證問題和技巧

3.1 標準曲線要求曲線全覆蓋農(nóng)藥標準曲線配置，不需要配置所有農(nóng)藥的標準曲線，可以根據(jù)初步定性的結(jié)果，配置對應(yīng)農(nóng)藥的標準曲線，標準曲線至少5個點，而且要覆蓋樣品濃度，濃度范圍不易過窄，可以參考農(nóng)藥的限量值，高濃度點是限量值的5～10倍，低濃度點是限量值的1/10。

3.2 凈化過程出現(xiàn)的問題在氣相色譜測定菊酯類農(nóng)藥、液相色譜測定吡蟲啉和多菌靈農(nóng)藥過程中都需要凈化。一方面注意凈化要完全，防止部分農(nóng)藥未被完全洗脫，可以加大洗脫液的用量，如液相色譜測定多菌靈回收率偏低，原因就是凈化過程中洗脫不完全，后增加洗脫液用量至10mL，回收率正常；另一方面比較不同公司凈化柱的凈化效果，筆者發(fā)現(xiàn)不同公司去除色素等雜質(zhì)效果有區(qū)別，部分公司同一批次產(chǎn)品質(zhì)量不一致。選擇高質(zhì)量品牌的凈化柱，去除不必要的干擾，可更準確地對農(nóng)藥進行定性鑒別或定量測定。

3.3 能力驗證定性過程中出現(xiàn)的問題出峰時間相近的農(nóng)藥都應(yīng)單獨配置標準溶液，同時通過軟件解析，進行圖譜比對，仔細鑒別。例如，殺螟硫磷、馬拉硫磷、對硫磷出峰時間相近，要仔細鑒別，甲基對硫磷和馬拉硫磷出峰時間相近，同時檢出，漏報馬拉硫磷。

3.4 能力驗證定量過程中出現(xiàn)的問題菊酯類農(nóng)藥很多都有同分異構(gòu)體，如氯氟氰菊酯等，如果與考核機構(gòu)購買完全一致的標準物質(zhì)時，可以用其中一個或多個峰積分計算結(jié)果，如果不一致，用其中一個峰計算可能導(dǎo)致結(jié)果出錯，因不同檢測機構(gòu)的同分異構(gòu)體比例可能不一樣，所以需要各組分加和積分，結(jié)果才準確。

3.5 圖譜保留時間存在的問題液相樣品保留時間2min以內(nèi)，肯定不對，都是雜峰，液相檢測樣品至少30min以上。氣相色譜ECD檢測時間20min太短，正常45min，防止上下樣品出峰重疊，程序升溫過程中避開樣品出峰時間。有的圖譜縱坐標設(shè)置太大，峰看起來太小。

3.6 結(jié)果輸出注意事項3個平行樣相對標準偏差過大的，肯定錯誤，至少小于15%。3個平行樣并非完全一致的樣品，有時把平行樣認為是完全相同的樣品，選擇多次測定中最相近的數(shù)據(jù)也是錯誤的。材料裝訂要有序，必須要有圖譜，一般包含能力驗證結(jié)果上報表、標準曲線、標準曲線單點圖譜、樣品圖譜等材料。

4 能力驗證過程中的質(zhì)量控制

4.1 氣相色譜測定中的質(zhì)量控制氣相色譜測定有機磷類或菊酯類農(nóng)藥殘留，有機磷類農(nóng)藥基質(zhì)效應(yīng)明顯，必須用相同基質(zhì)農(nóng)藥配置標準溶液，菊酯類農(nóng)藥不需要。配置標準溶液時，應(yīng)選擇相同的基質(zhì)配置標準溶液。制備質(zhì)量控制樣時，可根據(jù)初步定性和定量的結(jié)果，在自行采購的與考核樣相同的蔬菜中添加相近濃度的農(nóng)藥制備質(zhì)控樣，采購的蔬菜最好不含有農(nóng)藥。

4.2 液相色譜測定中的質(zhì)量控制液相色譜對質(zhì)控樣基質(zhì)匹配要求更嚴，必須選擇完全相同的空白樣品做添加回收試驗，可提供空白樣品需要完成多項檢測，所以可以選擇吸取部分空白提取液做添加回收試驗，可根據(jù)初步定性和定量的結(jié)果，取考核空白樣靜置的分層的乙腈10mL，添加相近濃度的農(nóng)藥制備質(zhì)控樣，將質(zhì)控樣和考核樣品中另外2個平行樣一起進行前處理操作、上機。