張東升
(甘肅省通渭縣畜牧獸醫服務中心 743300)
豬大腸桿菌病是養豬臨床常見的細菌病之一,多發于仔豬,主要表現黃白痢以及仔豬水腫病,死亡率較高,臨床危害較大[1]。成年豬感染后多表現一過性,以管理水平差,養殖設備落后的豬場發病較多。為了能讓大家更好地認識本病,下面筆者就其臨床檢疫和大家作一下交流。
大腸桿菌又名大腸埃希氏桿菌,革蘭氏染色呈陰性,桿狀或短桿狀,部分菌株表面有莢膜,大小約為 2~3μm×0.4~0.7μm,不形成芽孢。大腸桿菌在自然界分布廣泛,空氣、土壤、河流、湖泊、沼澤、沙漠等環境中都有本菌的分布,動物體表、口腔、鼻腔以及腸道中也都有本菌的分布。對外界環境的抵抗力較強,對各種物理和化學因素比較敏感,60℃條件下30min即可失去毒力,120℃條件下高壓滅菌瞬間死亡,消毒劑中對甲酚、石炭酸、碘制劑和戊二醛等比較敏感。資料表明,大腸桿菌血清型極多,菌體抗原(O)、莢膜抗原(K)和鞭毛抗原(H)保守統計分別能夠達到 145種、90種和49種以上,他們之間的相互組合可形成眾多不同的血清型菌株。
感染大腸桿菌的病豬主要以仔豬為主[2],臨床表現仔豬黃白痢和仔豬水腫病。
黃痢潛伏期短,一般在出生后3d之內即可發病,豬群中常常突然出現1~2頭全身瘦弱,拉黃色漿狀稀糞的豬,糞便中含有未完全消化的凝乳片,病豬很快死亡。剖檢可見腸道膨脹,內容物多量,呈黃色稀糊樣,有時含有氣體,腸黏膜卡他性病變,腸系膜淋巴結出血,肝腎有凝固型壞死灶。
白痢主要發病于出生后10~25日齡間的豬。病豬可突然出血腹瀉,糞便呈灰白色絮狀,腥臭,常污染肛門和皮膚。病程2~3d,有的能拖延一周以上,發病期間采食量基本無影響,死亡率也較黃痢低很多,一般在3%以內。病死豬剖檢可見尸體蒼白消瘦、腸黏膜有卡他性病變,腸系膜淋巴結輕度腫脹。
仔豬水腫本質是一種腸毒血癥,特征為胃壁及其他部位發生水腫,發病日齡集中在30~90日齡,通常情況下發病率不高,但表現癥狀的豬大部分最終死亡,病死率可達80%以上。尤以體格健壯、生長速度快的豬發病最為明顯。水腫是本病的典型癥狀,病豬眼瞼、結膜、頭部等表現腫大,有時會波及到頸部和腹部,胃壁水腫,常見于胃大彎、底部、賁門和食道后端,嚴重者水腫部位有出血,除此之外,喉頭、膽囊、大腸、淋巴結等部位也會表現水腫。
從臨床上看,本病大致可分為兩種感染途徑,一種是體外途徑,主要發病部位在腸道,仔豬表現黃白痢[3],另外一種途徑是發病部位在體內,病原及其毒素直接導致組織器官的損害,仔豬表現水腫。這兩種途徑大腸桿菌存在的部位不同,臨床檢疫時采集病料的方法和檢驗過程也有區別。
3.1.1 面臨問題
仔豬黃白痢病原集中在消化道,由于仔豬出生后,哺乳過程中,乳房皮膚表面攜帶的微生物可經過口腔進入腸道,并在第一時間內進行定植,這些微生物在采集病料分離菌時可對結果造成干擾,分不清哪些是病原菌,哪些是定植菌。另外,病豬一旦將糞便排出體外,肛門周圍、空氣及地面的微生物也會對糞便樣本造成污染,這就使得檢驗結果具有一定的不確定性。
3.1.2 解決方案
針對面臨的問題,為了能將污染微生物幾率降至最低,臨床可通過肛門拭子取樣或直接剖檢病死豬無菌采取腸道內容物的方法來對糞便進行分析。肛門拭子取樣可先將病豬肛門及尾根處用水清洗,碘伏消毒,酒精脫碘,之后用無菌棉簽深入直腸3~5cm,微攪動后取出,將棉頭上沾的糞便直接在綿羊血瓊脂平板、普通營養瓊脂平板、麥康凱瓊脂平板和伊紅美蘭瓊脂平板上接種,37℃恒溫條件下培養24h,觀察結果。
3.1.3 結果判定
如果普通營養瓊脂平板上和綿羊血瓊脂平板上有表面光滑、邊緣整齊、圓形、半透明、凸起的小菌落出現,且菌落在麥康凱瓊脂平板上呈粉紅色,在伊紅美蘭瓊脂平板上呈紫紅色并有金屬光澤,則表明有大腸桿菌感染。由于正常腸道中也有非致病性的大腸桿菌存在,故再進一步作菌型鑒定,確定是黃白痢型大腸桿菌后就可對本病確診。
仔豬水腫病病原感染部位在機體內環境,檢疫時需要對實體組織或體液進行取樣,實體組織可選擇水腫部位的組織,也可選擇肝臟,這些部位病原菌濃度高,容易分離到。分離時嚴格遵守無菌操作,提前將器械工具滅菌,解剖時切開的局部皮膚先用碘伏消毒,之后酒精脫碘,取樣本組織時盡量一次性取下,完畢后在酒精燈火焰旁將平皿開個小口,口對著火焰,將樣本組織放入,之后在無菌操作臺中用組織樣本的橫切面抹板。如果是取水腫液,可直接用無菌注射器扎入抽取,之后將水腫液接種于平板。值得一提的是,雖然水腫液易分離,但其本質是炎性反應體液不對稱分配的結果,里面病原含量低,很多時候并不能成功分離到大腸桿菌,需要盡量多抽取樣本,多選幾個水腫病灶,以增加成功分離的幾率。