二嗪農溶液含量測定方法探討

陳向丹 王峻 萬珊 董書香 丁陽

摘要：建立了二嗪農溶液中二嗪農含量的反相HPLC測定方法。采用C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），檢測波長225 nm，流動相為甲醇-水（75∶25），流速1.0 mL/min。結果顯示，二嗪農在0.2～4.0 mg/mL范圍內，含量與峰面積呈良好的線性關系，相關系數為0.999 9（n=6），平均回收率100.5%，RSD為0.9%。該方法簡便、準確、快速、重現性好，可用于該制劑的含量測定。

關鍵詞：二嗪農溶液;反相HPLC法;含量測定

中圖分類號：O657.7+2? ? ? ? 文獻標識碼：A? ? ? ? 文章編號：1007-273X（2018）11-0008-02

二嗪農又名二嗪磷，英文通用名Dimpylate，化學名稱為O，O一二乙基一O一（2一異丙基一4一甲基嘧啶基一6）硫代磷酸醇，是一種廣譜、高效有機磷殺螨劑。二嗪農具有觸殺、胃毒、熏蒸和一定的內吸作用，有較強的殺螨活性，是世界上大噸位有機磷農藥品種之一[1]。獸用二嗪農溶液用于觸殺家禽的體表寄生蟲蜱、螨、虱，其含量測定方法為氣相色譜法[2-3]。而氣相色譜會使某些如不穩定性有機磷農藥產生熱分解，因而需要把有機磷衍生化，增加了分析過程的復雜性;高效液相色譜法檢測有機磷以其直接、快速、高效、簡便和適用范圍廣等優點而得到迅速發展[4]。同時由于氣相色譜法測定二嗪農溶液的含量方法需要使用大量對照品及內標物質，且部分企業缺少相關檢驗儀器及專業檢驗人員，給檢驗工作帶來了諸多不利于控制的因素。為了更好地控制產品質量，本文探討了反相高效液相法測定二嗪農溶液中二嗪農的含量測定方法。

1? 材料與方法

1.1? 儀器

島津20AD高效液相色譜儀配紫外檢測器;Agilent Eclipse Plus C18色譜柱，4.6 mm×250 mm（i.d.），粒徑5 μm;Mettler AE240 電子天平;MILIPORE超純水處理器等。

1.2? 試劑與材料

二嗪農對照品含量為98.0%（批號為06087，購于上海某科技有限公司）;甲醇為色譜純;水為二次純化水;二嗪農原料、輔料，25%二嗪農溶液供試品（批號為170106，170107，170108）均由武漢某獸藥公司提供。

1.3? 試驗方法

1.3.1? 溶液的配制? 精密稱取二嗪農對照品50 mg，置50 mL量瓶中，加入甲醇至刻度，搖勻，濾過，作為對照品溶液。稱取二嗪農供試品適量（約相當于二嗪農50 mg），置50 mL量瓶中，加入甲醇至刻度，搖勻，濾過，作為供試品溶液。

1.3.2? 色譜條件? 色譜柱：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑流動相：甲醇∶水（75∶25）流速：1.0 mL/min;檢測波長：225 nm;進樣量：10 μL。

1.3.3? 線性試驗? 精密稱取二嗪農對照品500 mg，置50 mL量瓶中，加入甲醇至刻度，搖勻，作為貯備液。分別精密量取貯備液適量，用甲醇分別稀釋至二嗪農濃度為0.2、0.5、1.0、2.0、2.5、4.0 mg/mL的溶液，各取10 μL進樣，記錄色譜圖，以濃度（C，mg/mL）為橫坐標，峰面積（mV）為縱坐標，繪制標準曲線。

1.3.4? 專屬性試驗? 在“1.3.2“色譜條件下，分別取供試品輔料空白溶液、對照品溶液以及供試品溶液注入液相色譜儀，考察其專屬性。

1.3.5? 回收率試驗? 按處方比例配制25%的二嗪農溶液。分別精密稱取40、50和60 mg的二嗪農原料及0.12、0.15、0.18 g的輔料置50 mL具塞容量瓶中，加甲醇至刻度，振搖使其溶解，濾過，按“1.3.2“色譜條件進行測定，按外標法計算二嗪農的含量，計算回收率。

1.3.6? 精密度試驗? 取對照品溶液（二嗪農500 μg/mL），按“1.3.2“色譜條件測定峰面積，連續進樣6次，計算相對標準偏差RSD，考察精密度。

1.3.7? 穩定性試驗? 取對照品溶液（二嗪農500 μg/mL），按“1.3.2“色譜條件測定峰面積，在不同時間（0、2、4、6、8、10、12、24 h）分別進行測定，計算相對標準偏差RSD，考察對照品穩定性。

2? 結果與分析

2.1? 線性試驗

以濃度（C，mg/mL）為橫坐標，峰面積（mV）為縱坐標進行線性回歸（圖1），得回歸方程：Y=5×106X+89 331，r=0.999 9。可見在此色譜條件下二嗪農在0.2～4.0 mg/mL范圍內線性良好。

2.2? 專屬性試驗

在“1.3.2“色譜條件下，色譜圖中二嗪農與各雜峰分離效果好，含量測定不受其他雜質峰的干擾。具體見圖2、圖3、圖4。

2.3? 回收率試驗

加樣回收率考察結果見表1。試驗結果表明，二嗪農平均回收率為100.5%，RSD為0.9%，表明該法符合試驗分析要求，準確度高。

2.4? 精密度試驗

連續進樣6次，測得二嗪農峰面積平均值為5 525 032 mV，RSD為0.1%。結果表明儀器精密度良好。

2.5? 穩定性試驗

在不同時間（0、2、4、6、8、10、12、24 h）分別進行測定，測得二嗪農峰面積平均值為5 528 576，RSD為0.1%，結果表明對照品溶液在室溫下24 h內性質穩定。

2.6? 樣品的測定

分別取同一廠家不同批號的樣品，采用“1.3.2”色譜條件進行測定，試驗結果見表2。樣品測定結果可以看出本法與氣相色譜法測定的結果基本一致。

3? 討論

二嗪農溶液分別在200～400 nm波長范圍進行紫外掃描，結果發現，二嗪農在波長為（225±2） nm處有最大紫外吸收，分別選定了210、225和245 nm在相同試驗條件下測定，結果顯示在波長為225 nm時可以得到較好的峰形且基線穩定，故本文采用以上色譜條件測定二嗪農溶液的含量。

4? 結論

本法測定二嗪農溶液中主藥的含量時，操作簡單、快速，結果準確可靠，可作為該制劑的含量測定方法的參考。特別是在獸藥企業的內部質量控制方面有一定的指導作用。

參考文獻：

[1] 饒? 勇，曾振靈，劉滌潔，等.二嗪農在豬組織中的GC—NPD殘留分析方法[J].中國獸醫學報，2003，23（4）：385-387.

[2] 中國獸藥典委員會.獸藥國家標準（化學藥品、中藥卷）第一冊[S].

[3] 中國獸藥典委員會.中華人民共和國獸藥典二○一五年版（一部）[S].

[4] 宣秋江，周傳光，徐恒振，等.高效液相色譜分離10種有機磷農藥[J].分析試驗室，2008，27（S1）：273-275.