國產環絲氨酸膠囊的人體藥動學和生物等效性研究

藍慧玉

（杭州市江干區采荷街道社區衛生服務中心，浙江 杭州 310003）

環絲氨酸適用于敏感菌引起的、初始治療（鏈霉素、異煙肼、利福平和乙胺丁醇）不足的活性肺和肺外結核（包括腎結核）。環絲氨酸對結核分枝桿菌具有較好的抑制作用，優點是不易產生耐藥性，對耐藥結核菌也有效，最低抑菌濃度為25 mg/L，其作用機制為抑制結核分支桿菌的細胞壁合成。環絲氨酸膠囊空腹給藥后平均0.75 h達到最高血藥濃度，半衰期為8～12 h。本次研究針對中國男性健康志愿者在開展體內藥動學研究工作期間，主要選擇液相色譜-串聯質譜法針對（LC-MS/MS）環絲氨酸膠囊的相關特點加以分析，將國產環絲氨酸膠囊以及進口環絲氨酸膠囊二者具有的生物等效性加以充分對比，從而為臨床用藥的合理性做出充分保證。

1 資料與方法

1.1 一般資料

受試制劑：環絲氨酸膠囊（250 mg，批號10120101，浙江海正藥業股份有限公司）；參比制劑：環絲氨酸膠囊（250 mg，批號ECD072A，M acleods Pharmaceutical Ltd.）；環絲氨酸對照品（CAS 68-41-7，C6880，Sigma）；內標（煙酸，100434-200301，中國藥品生物制品檢定所）；試劑：甲醇（色譜純，德國Merck公司）；甲酸（質譜純，Fluka公司）；水為Milli-Q水；其他試劑均為分析純；液氮（＞99.999%，杭州今工氣體工貿有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 研究對象分析

對于本次研究，全部通過醫學倫理委員會同意。選擇男性健康志愿者24名作為實驗研究對象；平均年齡為（23.92±2.22）歲，平均體重為（64.71±6.70）kg，平均身高為（172.33±5.44）cm，平均體重指數為（21.76±1.55）kg/m2，在準備對患者展開實驗研究前，合理展開全面體格檢查工作，最終觀察結果均未呈現出異常。所有檢驗人員以往不存在疾病史以及藥物過敏史，均未呈現出精神狀態異常現象，在準備進行實驗前2周直至對患者展開實驗過程中，禁止患者選擇其他藥物干預，在實驗過程中，要求患者需要禁煙禁酒，禁止應用含有咖啡因的相關飲料。對于檢驗人員在實驗前針對本次實驗開展目的以及相關要求加以了解，最終合理完成知情同意書簽寫。于本院I期臨床研究病房中合理完成本次實驗操作。

所有受試者須遵守研究條件所要求的有關規定。在對所有實驗人員開展研究工作4周時間內，禁止患者進食富含油脂的食物，禁止飲用咖啡以及茶類引流等，禁止飲酒。此外避免出現過度疲勞的情況。對于籃球、足球以及游泳等系列激烈運動禁止參與。在具體用藥期間，需要對人體身體狀況穩定做出保證，在對患者選擇藥物治療以及對其開展抽血工作期間，服從安排，不遲到，不早退。試驗前一晚空腹10小時以上。

1.2.2 給藥方案和血樣采集

本試驗采用自身對照的雙周期交叉試驗設計，將24名健康受試者隨機分成2組，分別給予受試制劑和參比制劑，兩次服藥間隔為1周。受試者于試驗前一天晚8點后禁食，試驗當日早晨空腹用250 mL溫開水送服環絲氨酸膠囊受試或參比制劑500 mg，服藥后2 h內不飲水，4 h后給予統一低脂標準餐。于服藥前（0 h）和服藥后10 min、20 min、30 min、45 min、1.0、2.0、4.0、8.0、12.0、24.0、36.0、48.0、72.0共14個時間點取靜脈血5 mL，置BD抗凝管中， 3000 rpm離心10 min，分離出血漿立即置聚丙烯試管中-20℃低溫保存待測。

1.2.3 合理展開血漿樣品處理工作

將冷凍血漿取出后，于室溫條件下展開融化處理操作，之后于多管渦旋器上方展開渦旋操作，控制時間為20秒。之后選擇劑量為200 μL血漿于規格為1.5 mL離心管中置入，加入內標溶液（716μg·mL-1）10 μL，750 μL甲醇，振蕩30秒，離心（4℃，13000 rpm，5 min），取劑量為10μL上清液，展開分析工作。

1.2.4 合理展開血藥濃度測定

針對環絲氨酸血藥濃度，合理利用LC-MS／MS反復噶展開。在對血漿樣品進行測定的過程中，合理完成新型標準曲線的創建，之后合理展開不同濃度質控樣品測定。此種方法的創建需要體現出靈敏度高、快速以及準確性顯著的特點、

1.2.5 合理展開數據處理工作

合理選擇SPSS 2.1.1統計學軟件進行分析，計數資料用百分數（%）表示，采用x2檢驗，計量資 料用“±s”表示，采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 合理進行血藥濃度-時間曲線分析

對于所有檢驗人員血液濃度-時間曲線分析情況見圖1。根據最終結果發現，在血藥濃度方面，受試制劑同參比制劑二者表現較為類似。

2.2 藥動學參數分析

針對所有檢驗人員血藥濃度有效展開統計學分析，見表1。

圖1 所有實驗人員參比制劑及受試制劑后環絲氨酸平均藥時曲線對比

表1 單劑量選擇環絲氨酸膠囊受試和參比制劑后加以口服后的主要藥動學參數臨床對比

表2 環絲氨酸膠囊兩種制劑主要藥動學參數方差臨床分析

表3 環絲氨酸膠囊生物等效性的雙單側t檢驗臨床結果統計

2.3 生物等效性分析

針對主要藥動學參數Cmax同AUC二者進行對數轉換，完成后進行方差分析，見表2。對于雙單側t檢驗結果以及[1-2α]置信區間法臨床研究結果可見表3。通過完成雙單側t檢驗以及[1-2α]置信區間法分析，針對最終結果研究發現，Cmax，AUC0-t，AUC0-∞均對于生物不等效假設表現為拒絕。對于受試制劑AUC0-t90%置信區間為99.8%～108.7%，AUC0-∞90%置信區間為98.8%～109.1%，Cmax90%置信區間為106.4%～124.3%，均落在80%～125%區間內。Tmax經非參數檢驗，表明無顯著性差異（P＞0.05）。對于上述統計結果，對于CFDA針對生物等效性表現出的系列要求可以充分滿足，從而針對環絲氨酸膠囊受試制劑同參比制劑生物二者表現為等效關系。

2.4 不良反應觀察

整個試驗在醫護人員監護下進行，健康志愿者在試驗過程中未觀察到明顯不良反應。其中1例受試者出現谷丙轉氨酶異常增高（入組體檢時，谷丙轉氨酶39 U/L；試驗結束出組體檢時，谷丙轉氨酶67 U/L）未經特殊處理，后隨訪至正常。整個試驗過程無提前退出和脫落的病例，無嚴重不良事件報告。

3 討 論

臨床觀察表明受試制劑與參比制劑安全性表現相似。單劑量口服環絲氨酸膠囊500 mg耐受性較好。

根據本次研究結果顯示，環絲氨酸膠囊在24名健康志愿者體內的主要藥代動力學參數經DAS分析生物等效，表明兩種制劑在臨床使用時可無需調整劑量相互替換。

[1] 鄭凱航.母乳喂養[J].浙江省優生優育協會,2016.2-3

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