廣西牛羊主要呼吸道疫病的血清學調查

韓林梅 ，吳翠蘭 ，李 軍 ?，余艷娟 ，潘 艷 ，李常挺 ，陶 立 ，曾 蕓 ?

（1.廣西大學動物科學技術學院 530004；2.廣西獸醫研究所 廣西獸醫生物技術重點實驗室 530001；3.桂林市水產畜牧獸醫局 541199）

牛呼吸道疫病綜合征是由傳染性牛鼻氣管炎病毒、牛支原體等病原與宿主自身應激相互作用形成的一種呼吸系統疫病[1]。該病是歐洲的三大牛病之一；在澳大利亞的中大型肉牛場，有70%以上的臨床疫病和50%的死亡率是由呼吸道疫病引起[2]；美國全國牛場主協會也將牛呼吸道疫病綜合征列為養牛業的頭等大病。在我國，隨著“北牛南育”模式的不斷發展，牛呼吸道疫病綜合征的發病率也在不斷上升，對我國養牛業造成了嚴重的經濟損失。

羊呼吸道疫病主要是由綿羊肺炎支原體、溶血曼氏桿菌和化膿隱秘桿菌等呼吸道條件性致病菌引起，通常是由天氣、生理壓力和細菌的聯合作用等不利因素共同作用的結果，僅通過臨床癥狀觀察，很難確定具體的感染病原。

近年來，隨著廣西農業供給側結構性改革的深入，部分地市為了實現當地畜牧業增效和養殖農民增收，出臺了牛羊養殖業發展扶持政策，牛羊養殖規模得到迅速發展，但隨之而來的是牛羊疫病也逐年增加，尤其是以呼吸道癥狀為主要特征的疫病給養殖戶造成嚴重的經濟損失。為此，本研究針對危害牛羊養殖業最嚴重的呼吸道疫病—傳染性牛鼻氣管炎，牛支原體，綿羊肺炎支原體進行血清學調查，從血清學方面調查了其感染情況，為上述疫病的防控提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品來源

樣品來自廣西6個牛羊養殖重點城市的牛羊血清。每個城市每年采集200份，2016年和2017年兩年共采集2400份牛血清和2400份羊血清。采樣的牛場均未進行傳染性牛鼻氣管炎和牛支原體的疫苗免疫。采樣的羊場未進行羊支原體肺炎疫苗的免疫。

1.1.2 主要儀器與試劑

酶標儀SPARK 10M購自澳大利亞SPARK公司；離心機購自德國 eppendorf公司；移液器(單道、8道、12道）購自德國 eppendorf公司；4℃醫用冰箱購自中科美菱；-20℃冷凍冰柜購自澳柯瑪股份公司；純水儀購自北京卓信博澳公司；傳染性牛鼻氣管炎病毒gE抗體檢測試劑盒購自美國IDEXX公司；牛支原體肺炎抗體檢測試劑盒購自加拿大Biovet公司；綿羊肺炎支原體抗體檢測試劑盒購自美國KERNEL公司。

1.2 方法

分別按照各抗體檢測試劑盒的使用說明書進行傳染性牛鼻氣管炎病毒抗體、牛支原體抗體和綿羊肺炎支原體抗體的檢測，按說明書進行檢測結果的判斷。

2 結果

2.1 傳染性牛鼻氣管炎的抗體檢測結果

廣西6市2016年和2017年傳染性牛鼻氣管炎的檢測結果顯示，廣西6個市2400份血清的傳染性牛鼻氣管炎抗體個體平均陽性率為36.45%（875/2400），場群平均陽性率為72.18%（96/133）。2016年和2017年廣西6市牛血清的傳染性牛鼻氣管炎個體陽性率分別為 27.33%(328/1200)，45.58%(547/1200)；群體陽性率分別為 58.93%(33/56)，81.82%(63/77)（表 1）。經 t檢驗，2017 年傳染性牛鼻氣管炎的個體陽性率和群體陽性率均高于2016年，呈差異顯著和差異極顯著。

表1 2016年～2017年廣西6市傳染性牛鼻氣管炎的檢測結果

圖1 2016年～2017年廣西6市IBRV的感染趨勢

2016年～2017年廣西6個市傳染性牛鼻氣管炎的感染趨勢，總體呈現出不同程度的上升（圖1），6個市中，以BS市在的傳染性牛鼻氣管炎感染最為嚴重。對2017年和2016年的傳染性牛鼻氣管炎感染率進行t檢驗，BS市差異極顯著（P＜0.01）；GG市、HZ 市、LZ 市、NN 市差異顯著（P＜0.05）；LB 市差異不顯著(P＞0.05)。

2.2 牛支原體的抗體檢測結果

廣西6市2016年～2017年牛支原體檢測結果顯示，個體抗體陽性率為 30.92%（742/2400），群體陽性率為 67.18%（86/128）。2016年和2017年廣西6市牛支原體抗體個體陽性率分別為23.33%（280/1200），38.5%（462/1200），群體陽性率分別為 59.2%（36/61），74.62%（50/67）（表 2）。 經 t檢驗，2017 年牛支原體的個體陽性率和群體陽性率均高于2016年，呈差異顯著和差異極顯著。

表2 2016年～2017年廣西6市牛支原體的抗體檢測結果

2016年～2017年廣西6個市牛支原體的感染趨勢，總體呈現出的是不同程度的上升（圖2），HZ市在6個市中的牛支原體感染最高，LZ市在6個市中的牛支原體感染最低。對2017年和2016年的牛支原體感染率進行t檢驗，HZ市、GG市、HZ市、LB市、NN 市差異顯著（P＜0.05）,LZ 市差異不顯著(P＞0.05)。

圖2 2016年～2017年廣西6市牛支原體的感染趨勢

對2016年～2017年采集的2400份牛血清進行傳染性牛鼻氣管炎抗體和牛支原體抗體的雙陽性結果統計結果顯示，其雙重感染率為12.21%（293/2400）（表3）。其中，在傳染性牛鼻氣管炎抗體陽性的牛血清中，牛支原體抗體也為陽性的比率為33.48%(293/875)；而在牛支原體抗體陽性的牛血清中，傳染性牛鼻氣管炎抗體也為陽性的比率為39.48%(293/742)。經t檢驗，兩者差異不顯著。

2.3 綿羊肺炎支原體的抗體檢測結果

廣西6市2016年和2017年綿羊肺炎支原體的檢測結果顯示，廣西6個市2400份血清的綿羊肺炎支原體抗體個體陽性率為 40.66%（976/2400），場群陽性率為 77.14%（81/105）（表 3）。2016年和2017年廣西6市羊血清的綿羊肺炎支原體個體陽性率分別為 32.2%（386/1200）和 49.2%（590/1200）；群體陽性率分別為72.88%(43/59)和82.61%(38/64)。經t檢驗，2017年綿羊肺炎支原體的個體陽性率和群體陽性率均高于2016年，呈差異極顯著和不顯著。

表3 2016年～2017年廣西綿羊肺炎支原體的抗體檢測結果

2016年～2017年廣西6個市綿羊肺炎支原體的感染趨勢，總體呈現出的是不同程度的上升（圖3）。GG市在6個市中的綿羊肺炎支原體感染最為嚴重，LZ市感染最低。對2017年和2016年的綿羊肺炎支原體感染率進行t檢驗，BS市、GG市、HZ市、LZ市、LB 市、NN 市差異均不顯著（P＞0.05）。

圖3 廣西2016年～2017綿羊肺炎支原體的感染趨勢

3 討論

近年來，廣西牛羊養殖業得到政府的大力扶持，但是在規模和數量上遠不及北方地區。由于廣西本地牛羊良種有限，不足以滿足自身需求，需要從周邊省份或者內蒙、山東、吉林、新疆等牛羊養殖大省引進牛羊。本研究結果顯示，2016年～2017年廣西傳染性牛鼻氣管炎的平均個體抗體陽性率為36.45%，其抗體陽性率雖較北方低[3]，但是2017年廣西6市傳染性牛鼻氣管炎的抗體陽性率與2016年相比，同比增長66.77%，說明傳染性牛鼻氣管炎已經嚴重感染廣西養牛業。究其原因可能有以下兩點：其一，養殖戶從外地引進的牛在混群前未做傳染性牛鼻氣管炎的感染檢測，致使攜帶傳染性牛鼻氣管炎病毒的牛在本場傳播病毒；其二，可能運輸工具未經消毒又繼續運輸牛群，導致病毒引入本地牛場。傳染性牛鼻氣管炎主要感染肉牛，以犢牛最為易感，若牛受到傳染性牛鼻氣管炎感染將會長期或終身帶毒，對牛場構成持續性威脅。本研究結果顯示，傳染性牛鼻氣管炎已在廣西廣泛流行，需要引起相關部門對該病的預防工作的重視。

廣西獸醫生物技術重點實驗室于2013年首次分離到廣西地區牛支原體，并證實牛支原體已經成為導致廣西肉牛引種回來后爆發牛呼吸道疫病綜合征的主要病原[4,5]。Fu等[6]報道2011年廣西奶牛牛支原體的感染陽性率在3.3%～14.89%之間，而本研究結果顯示，2016年～2017年其陽性率分別為23.33%和38.5%，這表明牛支原體在廣西地區呈地方性流行，感染強度較2011年增加。

綿羊肺炎支原體在世界各國都普遍存在，特別是養羊業發達的澳大利亞、以及歐美等國家。本研究結果顯示，2016年～2017年廣西的綿羊肺炎支原體抗體陽性率總體為40.6%，遠高于廣西獸醫生物技術重點實驗室在2010年的檢測數據（抗體陽性率18.89%）[7]。出現這種情況可能主要有以下幾點原因：其一，廣西區內缺乏優良品種，需要大批引種；其二，頻繁的市場貿易；其三，飼養管理水平低以及養殖戶缺乏相關的專業知識。由于廣西肉羊養殖業處于發展階段，必需加強對該病的防控。

2016年～2017年廣西6市傳染性牛鼻氣管炎、牛支原體、綿羊肺炎支原體的群體感染率和個體感染率每年都均以不同程度的速度上升，側面反映出廣西牛羊養殖的發展，不僅給廣西地區帶來了機遇，還帶來了挑戰。為此，解決好廣西養殖業發展帶來的問題仍需各相關部門共同努力。