王寶蘭 張春玲/陜西省商南縣畜牧獸醫中心
豬偽狂犬病(Pseudorabies virus,PrV)是由皰疹病毒科皰疹病毒屬偽狂犬病病毒引起的多種動物感染和發病的傳染病。感染途徑主要通過公豬精液、母豬胎盤傳播,亦可以水平進行傳播。豬是偽狂犬病毒貯存宿主和主要傳染源,且以豬的流行狀況造成的危害損失最為嚴重。該病一年四季均可發生,尤其是冬、春季節最為多發,母豬產仔季節也可流行。
豬感染偽狂犬病后,其臨床表現隨豬的日齡和毒株毒力的不同而有很大差異。哺育仔豬(1~4周齡)感染本病后,病初體溫升高到41℃~42℃,食欲減退,精神不振,眼瞼充血腫脹,嘔吐或腹瀉,隨后興奮不安或轉圈運動,繼之出現痙攣,四肢作游泳狀,最后衰竭死亡。斷奶后的仔豬(60日齡以上),感染后癥狀輕微或呈隱性感染,多表現為一過性發熱,精神沉郁,有些病豬流鼻液,咳嗽,嘔吐,幾天內可恢復。妊娠母豬發生流產,或產木乃伊胎、死胎和弱仔。弱仔產后出現嘔吐和腹瀉,運動失調,痙攣,角弓反張,多在2~3d內死亡。
豬偽狂犬病的主要病變是上呼吸道黏膜及扁桃體水腫,肺水腫,淋巴結腫大,腦膜充血水腫,腦脊液增多,胃腸黏膜卡他性或出血性炎癥,胃底呈大片出血。流產胎兒的肝、脾、淋巴結及胎盤絨毛膜有凝固性壞死。肝、脾等實質器官可見白色壞死結節、病灶,腎臟布滿針尖狀出血。
偽狂犬病的控制與凈化需要實施綜合措施,包括規范的引種,嚴謹的生物安全措施,定期血清監測與病豬的果斷淘汰,科學的免疫程序,良好的飼養管理以及優質高效的基因缺失疫苗的合理應用等。
病豬的臨床癥狀和病程隨年齡不同而有很大差異。根據患病種類及日齡豬偽狂犬病臨床表現大致可分為四類:
1.母豬妊娠初期,可在感染后發生流產,在妊娠后期,經常發生死胎和木乃伊,或者產出弱胎和死胎。妊娠母豬發病表現為流產和產死胎,且病程短、死亡較快。流產常發生于感染后的10d左右,流產胎兒的大小基本一致。患病母豬有時還具有不發情、配種不孕、反復發情次數增多的臨床表現。
2.新生仔豬感染后可出現大量死亡,主要臨床表現為生后第二天開始突然發病,體溫過高、精神沉郁甚至昏睡、嘔吐并伴有腹瀉、沉鳴低吼,運動共濟失調、機體呈現癲癇樣抽搐、后軀出現麻痹、原地轉圈、角弓反張致使頭部后仰等神經癥狀,3~5d死亡率達到高峰,15日齡內感染此病死亡率高達100%。斷奶仔豬發病死亡,發病率20%~40%,死亡率10%~20%,主要表現為神經癥狀、拉稀、嘔吐等。
3.2~4周齡仔豬發病時,也具有以上描述的神經癥狀,但病程比之較緩。4周齡到3月齡小豬出現嚴重感染時,特征癥狀為咳嗽、流鼻液和打噴嚏等,個別病豬表現有中樞神經紊亂癥狀,如肌肉發生強直和陣發性痙攣,后肢不受神經支配呈現運動失調、頭部出現緊張、上下頜緊緊閉合,死亡數占總數比例一般低于5%。采食量雖然正常,但其生長速度比健康豬生長速度要慢,飼料報酬明顯降低。
4.育肥豬感染的潛伏期為3~5d,表現為慢性呼吸道癥狀、增重遲緩、飼料報酬率降低、推遲上市時間。主要癥狀有不吃食、體溫明顯升高和呼吸困難等呼吸道癥狀,偶爾出現中樞神經紊亂的臨床癥狀。成年豬感染后主要表現為精神不振、沉郁及呼吸系統癥狀,可長期帶毒和排毒,是本病的主要傳染源。
1.剖檢變化。腦:腦膜表面充血、出血和水腫;腦脊髓量增多,腦實質點狀出血;鼻腔:出血性或化膿性炎癥;扁桃體:出血、水腫,甚至可見明顯的化膿壞死;腎臟:腎腫大,表面布滿針尖樣散在的出血點,顏色暗紅,切面濕潤,氣管內有泡沫狀液體;肺:散在分布點狀、片狀出血,有一定程度的萎縮和出血斑,觸診呈橡皮樣;脾臟:有特征性多發壞死病灶,呈橢圓形,略隆起;肝臟:呈現淤箅及輕微水腫,散布分布有點狀出血與黃白色壞死灶;胃腸:胃腸黏膜充血、出血,可見卡他性炎癥,胃底底部有明顯的出血區。
2.病理組織學變化。腦:膠質細胞彌漫性增生,腦組織呈非化膿性腦炎;鼻腔:黏膜可見出血性炎癥;扁桃體:扁桃體上皮細胞腫脹變性;腎:腎小球腫大,并伴有淀粉樣沉淀;肺:肺泡壁毛細血管充血、擴張、上皮細胞增生;脾臟:白髓和紅髓組織間隙紅細胞增多,局部脾組織存在紊亂現象;肝臟:肝組織出現出血現象,有大量的紅細胞滲出到血管外;肝小葉結構紊亂,局部壞死;肝細胞腫脹、變性。
豬偽狂犬病常用的診斷方法有病原學診斷、血清學診斷和分子生物學診斷方法。其中病原學診斷有動物接種試驗;血清學診斷包括中和試驗、酶聯免疫吸附試驗、乳膠凝集試驗、補體結合試驗及間接免疫熒光等;分子生物學診斷方法包括PCR檢測法、多重PCR檢測法、定時定量PCR檢測法、環介導等溫擴增方法等。由于個人能力和實驗室條件的限制,只對以下幾種診斷方法做簡單介紹。
1.動物接種試驗。采取病豬腦組織、磨碎后,加生理鹽水,制10% 懸液,同時加青霉素1000u/ml,鏈霉素 1mg/ml,放入 4℃冰箱過夜,離心沉淀,取上清液于后腿外側部皮下注射,家兔1~2ml,小鼠0.2~0.5ml,家兔接種后2~3d,小鼠 2~10d(大部分在3~5d)死亡,死亡前,注射部位的皮膚發生劇癢。家兔、小鼠抓咬患部,以致呈現出血性皮炎,局部脫毛,皮膚破損出血。
2.酶聯免疫吸附試驗。酶聯免疫吸附試驗其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。常用的 ELISA 法有雙抗體夾心法和間接法,前者用于檢測大分子抗原,后者用于測定特異抗體。因此,酶聯免疫吸附試驗既可以檢測抗原,又可以檢測抗體,具有快速、簡潔、特異性強、敏感性高的特點,3~4h內可得出試驗結果,并可同時檢測大批量樣品,廣泛用于偽狂犬病的臨診診斷。
3.病原PCR檢測。PCR檢測豬偽狂犬病病毒,利用PCR可從患病動物的分泌物,如鼻咽拭子或組織病料中擴增豬偽狂犬病病毒的基因,從而對患病動物進行確診。PCR與病毒分離鑒定相比,具有快速、敏感、特異性強、易于操作等優點,能同時檢測大批量的樣品,并且能進行活體檢測。此檢測方法敏感度很高,適合科學研究、臨床診斷及流行病學調查,但不能區分疫苗免疫與野毒感染。
1.加強飼養管理。(1)引進無PRV種豬。豬場引進種豬是必須隔離、嚴格檢疫。防止外界車輛攜帶,防止飼料污染,防止鳥類、野生動物、人攜帶病毒入侵;(2)早期斷奶、分群飼養(兩點或三點飼養)、每一階段合理均衡營養、加強動物保健,改善亞健康;(3)引進的種公豬至少需要隔離2個月。為避免因引種帶來的病原分險,提倡自繁自養;(4)種母豬需免疫后然后隔離三個月,評價本豬場的免疫程序是否有效,免疫后1個月和首次配種后一個月后采血檢測野毒抗體。
2.科學免疫防控。實踐證明,進行免疫接種,保護易感豬群是預防本病最有效的措施之一。建議:后備種豬種-基礎免疫后,于配種前一個月肌肉注射1頭份。妊娠母豬-產前4周肌肉注射1頭份。生產公豬-每6個月肌肉注射1頭份。若采取全群“一刀切”的免疫方法,每年至少3~4次。妊娠母豬在產前4周加強免疫1次。仔豬5~6周齡時肌肉注射1頭份。感染壓力大的豬場應于11~12周齡加強免疫一次。
3.偽狂犬病凈化。(1)種豬群。全場使用基因缺失弱毒疫苗免疫,首先進行分批不斷抽血檢測,直到全部生產公母豬均有血檢記錄,生產公豬最先全部血檢。陽性公豬立即淘汰,陽性母豬群視其陽性率高低來定,陽性率大于15%的分批淘汰,陽性率小于15%的1次淘汰;(2)后備豬群。在選留前進行血檢,偽狂犬病毒陰性豬才留用;同時混群前評價疫苗的免疫效果,合格的混入豬群;(3)仔豬凈化階段采用基因缺失疫苗免疫,免疫程序建議采用0~3日齡仔豬滴鼻1頭份,30日齡和70日齡各自肌注1頭份;(4)種豬群分胎次以10%的比例抽樣,仔豬分周齡比例抽樣檢測偽狂犬病抗體,評價疫苗的免疫效果;(5)豬場加強飼養管理、衛生防疫體系建設,豬場進行嚴格滅鼠活動,控制犬、貓、鳥類和其他禽類進入豬場,嚴格控制人員來往和消毒措施,及時處理和消滅傳染源。