骨肉瘤組織XIAP蛋白表達臨床意義的研究

李從達 萬磊 林祥波 王賓 王代憲

【摘要】 目的 綜合分析骨肉瘤組織X連鎖凋亡抑制蛋白（XIAP）表達的臨床意義， 深入研究骨肉瘤發生和發展相關作用。方法 28例骨肉瘤組織標本作為實驗組， 28例正常骨組織作為對照組。兩組均采用免疫組織化學SP染色法。比較兩組XIAP蛋白陽性表達情況， 觀察XIAP蛋白陽性表達與骨肉瘤組織患者臨床參數關系。結果 實驗組XIAP蛋白陽性表達率為64.29%， 對照組XIAP蛋白陽性表達率為0， 實驗組XIAP蛋白陽性表達率顯著高于對照組， 差異具有統計學意義（P<0.05）。XIAP蛋白高表達與XIAP蛋白低表達患者性別、年齡比較差異均無統計學意義（P>0.05）；XIAP蛋白高表達與XIAP蛋白低表達患者病理分型和臨床分期比較差異均無統計學意義（P>0.05）。結論 骨肉瘤組織XIAP蛋白呈現高表達， 對骨肉瘤患者的預后具有參考價值。

【關鍵詞】 骨肉瘤組織；X連鎖凋亡抑制蛋白；表達；臨床意義

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2018.09.005

【Abstract】 Objective To comprehensively analyze the clinical significance of X-linked inhibitor of apoptosis protein （XIAP） expression in osteosarcoma tissue， and further study the related role of occurrence and development. Methods There were 28 osteosarcoma tissue as experimental group， and 28 normal bone tissue as control group. Immunohistochemistry SP staining was used in both groups. The positive expression of XIAP protein in two groups was compared， and the relationship between the positive expression of XIAP and the clinical parameters of osteosarcoma tissue patients was observed. Results The experimental group had positive expression of XIAP as 64.29%， which was 0 in the control group. The control group had obviously higher positive expression of XIAP than the control group， and the difference was statistically significant （P<0.05）. There was no statistically significant difference in gender and age between high and low expression of XIAP patients （P>0.05）. There was no statistically significant difference in pathological classification and clinical staging between high and low expression of XIAP patients （P>0.05）. Conclusion The high expression of XIAP in osteosarcoma tissue is of reference value for the prognosis of osteosarcoma patients.

【Key words】 Osteosarcoma tissue； X-linked inhibitor of apoptosis protein； Expression； Clinical significance

骨肉瘤是較為常見的一種惡性骨腫瘤疾病， 好發于青少年人群， 具有以下幾種臨床特點：①侵襲性非常強；②預后效果較差；③轉移率高[1]。為了能夠研究出骨肉瘤預后指標， 相關學者進行了大量的臨床研究。XIAP蛋白是最新發現的細胞凋亡調節因子， 在腸癌、胰腺癌和肺癌患者的腫瘤細胞表達中呈現高表達， 而XIAP蛋白的高低表達水平與腫瘤的預后效果密切相關[2]。但是， XIAP蛋白在骨肉瘤中的表達和預后效果等研究資料較少。本文將綜合分析骨肉瘤組織XIAP蛋白表達的臨床意義， 深入研究骨肉瘤發生和發展相關作用， 為治療骨肉瘤患者提供科學的數據參考。現報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院2015年11月～2017年11月收治的28例骨肉瘤組織標本作為實驗組， 選取同一階段28例正常骨組織作為對照組。納入標準：①所有入組者均在知情下參與本次研究；②實驗組均經過病理學、臨床研究和影像學等確診；③兩組均進行手術治療且在標本采集之前未實施放化療。排除標準：①中途退出本次研究者；②精神障礙者。實驗組中男19例， 女9例；年齡12.22～20.32歲， 平均年齡（16.27±3.32）歲；體重36.33～55.15 kg， 平均體重（45.74±10.13）kg；骨肉瘤組織類型：2例腓骨、10例肱骨、8例股骨、8例脛骨；Enneking臨床分期：Ⅰ期6例， ⅡA期7例， ⅡB期10例， Ⅲ期5例。對照組中男21例， 女7例；年齡12.25～20.29歲， 平均年齡（16.27±3.35）歲；體重36.35～55.12 kg， 平均體重（45.73±10.16）kg。兩組性別比例、平均體重、平均年齡等一般資料比較差異均無統計學意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 實驗方法 兩組入選者均采用免疫組織化學SP（組織標本用10%甲醛浸泡， 石蠟包埋， 常規厚4 μm連續切片， 常規脫蠟、水化， 滅活）染色法， 滴入XIAP蛋白多克隆抗體， 其他試劑（DAB顯色試劑盒、EDTA抗原修復液和PBS粉劑）由北京某醫院病理科所提供。操作過程中需要嚴格按照說明書， 以PBS代替一抗作為陰性對照。

1. 3 觀察指標及判定標準 比較兩組XIAP蛋白陽性表達情況， 觀察XIAP蛋白陽性表達與骨肉瘤組織患者臨床參數關系。XIAP蛋白表達：根據細胞著色程度評分：0分為不著色、1分為淺黃色、2分為棕黃色、3分為棕褐色。隨機觀察10個高倍視野（×400）， 計數100個骨肉瘤細胞， 再計算陽性百分率；各視野計數相加之和除以10作為最后計分。綜合計分（顏色計分與陽性細胞百分率的乘積為每例組織染色的綜合計分）中低水平表達為0～1分， 高水平表達為>1分。

1. 4 統計學方法 采用SPSS13.0計學軟件對研究數據進行分析處理。計量資料以均數±標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗；計數資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2. 1 兩組XIAP蛋白陽性表達率比較 實驗組XIAP蛋白陽性表達率為64.29%（18/28）， 對照組XIAP蛋白陽性表達率為0（0/28）， 實驗組XIAP蛋白陽性表達率顯著高于對照組， 差異具有統計學意義（P<0.05）。

2. 2 XIAP蛋白陽性表達與骨肉瘤組織患者臨床參數關系 XIAP蛋白高表達中男10例、女4例， XIAP蛋白低表達中男9例、女5例；XIAP蛋白高表達中年齡<18歲有6例、≥18歲有8例， XIAP蛋白低表達中年齡<18歲有7例、≥18歲有7例；XIAP蛋白高表達與XIAP蛋白低表達患者性別、年齡比較差異均無統計學意義（P>0.05）。XIAP蛋白高表達與XIAP蛋白低表達患者病理分型和臨床分期比較差異均無統計學意義（P>0.05）。見表1。

3 討論

骨肉瘤是最為常見的原發性骨腫瘤之一， 在化療之前， 5年內的骨肉瘤生存率僅占18.83%。隨著影像學技術和外科技術的不但發展， 5年內的骨肉瘤生存率上升到58.98%～62.33%[3]。常見的骨肉瘤標本一般為手術切除標本， 化療會影響到XIAP水平的表達敏感性。基于此， 為了消除化療產生的影響， 必須對骨肉瘤化療之前的穿刺標本加以研究分析， 從而方便認清XIAP水平表達和骨肉瘤發生發展的關系[4]。

XIAP是一種獨特的處于細胞增殖和細胞死亡分界面的分子， XIAP能夠顯著抑制凋亡蛋白酶， 使得腫瘤細胞能夠逃避細胞周期檢測點的監控， 從而促進腫瘤細胞的分裂和增殖。XIAP在胰腺癌細胞系和大腸癌細胞系中呈現高表達， 在皮膚纖維原細胞系和正常人乳腺上皮細胞系中呈現低表達[5， 6]。在急性髓性白細胞疾病中， XIAP的異常增高與預后效果不良密切相關。除此之外， XIAP表達增高與生存期限過短密切相關， 高表達XIAP水平也是胰腺癌化療耐藥的主要原因。本文研究結果顯示實驗組XIAP蛋白陽性表達率顯著高于對照組， 差異具有統計學意義（P<0.05）。研究資料顯示[5]， XIAP與多種惡性腫瘤的發生發展密切相關。通過上述數據不難發現 ， XIAP在正常骨組織和骨良性病變組織表達中呈現低表達水平， 在骨肉瘤組織中表達量顯著上升。在骨肉瘤組織中， 通過采取放射治療方法和化學治療方法等， 促進腫瘤細胞凋亡， 在一定程度上釋放骨肉瘤組織對放射治療和化學治療不敏感的原因。

本文研究結果還顯示， XIAP蛋白高表達與XIAP蛋白低表達患者性別、年齡比較差異均無統計學意義（P>0.05）；XIAP蛋白高表達與XIAP蛋白低表達患者病理分型和臨床分期比較差異均無統計學意義（P>0.05）。研究資料顯示， 胰腺癌細胞系中的XIAP表達與化療耐藥密切相關， XIAP在胰腺癌細胞系中呈現高表達， 在正常細胞系中呈現極低表達， 與此同時對腫瘤細胞的耐藥性也產生一定影響， XIAP蛋白水平表達能夠作為評價骨肉瘤生物學行為的一個獨立危險因

素[7]。通過研究資料證實， XIAP在骨肉瘤組織中的表達水平與腫瘤大小以及腫瘤轉移密切相關[8， 9]。XIAP水平表達能夠抑制腫瘤細胞的分化， 積極誘導細胞凋亡， 組織細胞進入到G0期。XIAP對惡性腫瘤的調節與其自身特殊結構密切相關， XIAP由N端桿狀病毒的IAP重復區域和C端環狀鋅指結構所組成， 分別由4個閱讀框轉錄翻譯而成。XIAP是一種抑制細胞凋亡的基因， 編碼產物XIAP蛋白的過度表達會抑制細胞凋亡， 最終促進腫瘤的發生和發展。研究資料顯示， 運用免疫組化方法檢測人胎盤滋養細胞的XIAP蛋白表達水平[10]。從上述研究結果不難看出， XIAP蛋白水平在妊娠早期滋養層中過于旺盛表達， 在妊娠晚期時， XIAP水平表達顯著下降， XIAP的表達與細胞增殖密切相關。XIAP在人類白血病和肝癌患者和子宮頸癌患者中有增高表達。XIAP抑制凋亡的作用對骨肉瘤的發生具有顯著作用， 因此提示XIAP抑制細胞凋亡的作用與早期骨肉瘤分子事件密切相關。

綜上所述， 骨肉瘤組織XIAP蛋白呈現高表達， 對骨肉瘤患者的預后具有參考價值。

參考文獻

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[收稿日期：2017-12-13]