血清白細胞介素-2和白細胞介素-4在糖尿病腎病早期診斷中的意義

劉靜，雷艷君，丁鳳嬌，劉婕，荊成寶

（1.安康市中心醫院檢驗科，陜西 安康 725000；2.西安交通大學醫學院，陜西西安 710018）

糖尿病（DM）屬于代謝性疾病，其中糖尿病腎?。―N）是DM最嚴重的微血管并發癥［1-2］。目前DN診斷主要依靠尿白蛋白測定，但當出現尿白蛋白時說明腎臟已經發生損害。如果不能在早期及時的診斷及治療，DN會持續惡化，導致慢性腎功能衰竭［3-4］。大量的研究證實，在DN早期的病變是可逆轉的，由此可見DN的早期診斷意義重大［5-6］。目前DN早期的診斷指標分為血液指標及尿液指標，血液中的指標有白細胞介素-2（IL-2）和白細胞介素-4（IL-4）、結締組織生長因子（CTGF）、內臟脂肪素（visfatin）等，尿液中的指標有銅藍蛋白（CP）、游離脂肪酸（FFA）、葡萄糖醛酸轉移酶（UDP）、視黃醇結合蛋白（RBP）等［7］。雖然DN的早期診斷指標很多，但是目前仍未有研究證實某個指標是可靠的。本研究測定IL-2和IL-4在DN患者中的含量，探討分析IL-2和IL-4在DN患者早期診斷的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2011年6月—2013年6月在安康市中心醫院被確診為DN患者60例，單純DM患者60例，健康的體檢者60例作為研究對象。其中男性98例，女性82例，年齡40～70歲，平均年齡（49.1±11.3）歲。入選標準：（1）DN患者尿蛋白排泄率＞20μg·min-1，并排除其他腎臟疾病合并癥；（2）DM患者尿蛋白排泄率 ＜20μg·min-1；（3）健康體檢者排除其他重要器官疾病，腎功能正常，無腎病及糖尿病家族史。將患者分為三組，分別為DN組、DM組、對照組各60例。本研究經安康市中心醫院倫理委員會批準，所有患者或患者監護人均已簽署知情同意書。

1.2 研究方法 分別對DN組、DM組和對照組患者采集晨空腹血5 mL，分離血清后，放置于-20℃下，在3 000 r·min-1下離心，取上清液測定。血清IL-2和IL-4測定均采用ELISA法，所有操作均嚴格按照試劑盒（上海通蔚生物科技有限公司）說明書進行。

1.3 統計學方法 所有數據結果均采用SPSS 17.0統計軟件處理，計量資料以s表示，計量資料采用t檢驗或方差分析，計數資料以例數及率表示，采用χ2檢驗及Fisher精確概率法，此外分別做出3個ROC曲線并算出曲線下面積（AUC），對血IL-2和IL-4的準確性、靈敏度和特異度進行評價。p＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 對照組、DM組和DN組患者各項臨床指標各組在性別、年齡、體質量指數（BMI）、收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）上比較，均差異無統計學意義（P＞0.05）。DN組患者尿肌酐（UCr）、血清肌酐（SCr）均高于其他兩組，均差異有統計學意義（p＜0.05）。見表1。

2.2 DN、DM和對照組患者血清IL-2和IL-4水平比較 DN患者IL-2水平明顯低于DM組和對照組，而IL-4水平卻高于DM組和對照組。見表2。

2.3 IL-2和IL-4的ROC曲線 IL-2和IL-4單獨作為標志物診斷AKI時，ROC曲線下面積（AUC）分別為：0.833和0.952（p＜0.01），兩者聯合診斷時，診斷率為100%。見圖1。

表1 對照組、DM組和DN組患者各項臨床指標

表2 DN、DM和對照組患者血清IL-2和IL-4水平比較／（ng·L-1s）

表2 DN、DM和對照組患者血清IL-2和IL-4水平比較／（ng·L-1s）

組別 例數IL-2 IL-4對照組60 6.81±0.48 0.81±0.21 DN組 60 2.91±0.38 1.21±0.20 DM組60 4.12±0.33 1.01±0.19

圖1 IL-2和IL-4的ROC曲線

3 討論

DM是一種全身性的代謝性疾病，主要特征就是血糖長時間高于正常值，引起全身微循環障礙，使得心腦血管、四肢血管、視網膜及腎臟發生器質性病變［8-9］。DN是DM多種并發癥中的一種，它是由于腎臟的微血管發生病變，導致腎臟功能減退，嚴重威脅患者生命健康。其進展可分為五個階段，最終可能引起腎衰竭［10］。目前臨床中DN的診斷主要依靠微量白蛋白尿，但是由于微量白蛋白尿的產生是由于腎小管濾過功能明顯受損所致，腎功能的退化早于尿白蛋白的出現，只有當DN發展到第Ⅲ期時才會發生改變，所以當出現微量蛋白尿的時候已發生腎功能損害。有研究證實，在DN的早期進行干預治療，可以完全逆轉腎臟的病變［11］。但是，如果腎臟已進入第Ⅲ期，只能延緩腎功能的惡化及進展。

目前雖然關于DN相關診斷指標很多，但是大多數只注重于某種獨立診斷指標在DN早期診斷的靈敏度和特異度。由于DN的發病機制的復雜性和多樣性，至今未能有哪個診斷指標能夠成為DN早期患者診斷的金標準。臨床工作者指出，把幾個不同的指標聯合應用來診斷DN可以提高特異度和靈敏度。

白細胞介素是非常重要的細胞因子，對維持正常腎臟的結構和功能有著舉足輕重的作用。當腎臟發生病理性改變時，細胞因子會發生改變，影響腎臟功能和機構異常變化的進程。本研究證明，在DN患者中，IL-2明顯低于健康人群，IL-4明顯高于健康人群，表明 IL-2和 IL-4與 DN有著密切的關系。

IL-2又稱為T細胞生長因子，主要由T細胞產生，其主要功能為活化T細胞，促進細胞因子產生，刺激自然殺傷細胞（NK）增殖及增強NK殺傷活性［12］。當機體受微生物感染時機體會產生IL-2做為免疫應答的一部分，通過與淋巴細胞表面的IL-2受體結合來區別“自己”和“非己”。IL-2是阻止DN發生的一種重要細胞因子，它能夠抑制炎性反應的發生。本研究發現，DN患者IL-2水平明顯低于DN患者和健康人群，我們認為原因可能是當腎臟發生病變時，病變侵及腎臟固有細胞，抑制了細胞產生IL-2，同時發生負反饋導致T細胞活化減少分泌更少的IL-2。此種反應的發生降低了NK細胞及巨噬細胞的能力，使得炎性反應進一步發展［13-14］。

IL-4是Th2細胞分泌的細胞因子。它的主要作用是促進B細胞增殖和分化，促進Th0細胞向Th2細胞分化，抑制Th1細胞活化及分泌細胞因子，在調節體液免疫中起關鍵性作用［15-16］。本研究發現，DM組IL-4水平高于DN組和對照組。我們認為這可能是因為當病變侵及腎臟時，刺激腎臟上皮細胞、內皮細胞等產生IL-4，同時IL-4的產生又抑制了Th1細胞的活化和分泌，導致IL-2的產生減少。IL-2和IL-4兩者可能是相互抑制作用。故我們分析兩種因子相互結合可提高DN的診斷準確性。對DN診斷的準確性進行評價后得出，IL-2和IL-4單獨作為標志物診斷DN時，ROC曲線下面積（AUC）分別為 0.833和 0.952（p＜0.01），二者聯合診斷時，診斷率為100%。多項的聯合檢測能夠提高DN早期診斷率，遠遠高于單項檢測的準確性。

綜上所述，臨床中應用單一的生物學標志物進行診斷DN診斷價值較低。但是，聯合各項生物學標志物進行檢測可以相互彌補，提高DN的診斷準確率，有助于臨床工作者早期發現DN，提供有效的干預措施，減少病死率。

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