P53和Ki-67在胃高級別上皮內(nèi)瘤變、分化型早期胃癌組織中的診斷價(jià)值

高福平，魏 謹(jǐn)，馬 平，薛 松，夏莉花，孫 瓊，李文潔，趙綺蓮

(南京市高淳人民醫(yī)院病理科，江蘇 南京 211300)

我國胃癌年發(fā)病率約為36/10萬，年死亡率約為26/10萬，位于我國惡性腫瘤死亡率第3位[1]。早期胃癌的預(yù)后良好，術(shù)后5 a生存率大于90%[2]。內(nèi)鏡下黏膜剝離術(shù)常被應(yīng)用于早期胃癌的治療，其能達(dá)到外科根治的療效且創(chuàng)傷輕，近年來內(nèi)鏡下黏膜剝離術(shù)在我國被迅速推廣。由于內(nèi)鏡下黏膜剝離術(shù)等的開展，對早期胃癌的診斷及鑒別診斷提出了更高的要求，但目前病理常規(guī)檢查技術(shù)在與高級別上皮內(nèi)瘤變、低級別上皮內(nèi)瘤變以及慢性胃炎鑒別時(shí)存在一定困難，我們應(yīng)用免疫組化法檢測P53和Ki-67在這三者中的表達(dá)，旨在尋找一種客觀有效的診斷方法。

1 材料與方法

1.1材料選取2015年7月至2017年8月南京市高淳人民醫(yī)院收治的胃內(nèi)鏡下黏膜剝離術(shù)后標(biāo)本，其中診斷為高級別上皮內(nèi)瘤變、分化型早期胃癌病例34例，胃活檢或ESD標(biāo)本診斷為低級別上皮內(nèi)瘤變25例，以及瘤旁正常胃黏膜組織34例。所有病例均經(jīng)2名副主任醫(yī)師以上職稱的病理科醫(yī)生復(fù)診。

1.2試劑及方法即用型鼠抗人P53單克隆抗體、即用型鼠抗人Ki-67單克隆抗體均購自北京中杉金橋生物有限公司。標(biāo)本常規(guī)經(jīng)4%中性多聚甲醛固定，石蠟包埋，3～4 μm厚切片，采用免疫組化PV-9000法，操作過程按說明書進(jìn)行。

1.3染色結(jié)果判定P53、Ki-67陽性部位為細(xì)胞核，細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒為陽性信號。每張切片選取染色較好部位5個(gè)高倍視野(×400)，每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)腫瘤細(xì)胞，取其平均值為細(xì)胞的陽性率。按陽性細(xì)胞所占的比例及染色強(qiáng)度區(qū)分：陽性細(xì)胞數(shù)所占比例<25%為陰性；≥25%為陽性。所有病例均經(jīng)2名副主任醫(yī)師以上職稱的病理科醫(yī)生分別進(jìn)行盲法判讀。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料用百分?jǐn)?shù)表示，比較用χ2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

P53在胃高級別上皮內(nèi)瘤變、分化型早期胃癌組織中陽性表達(dá)率為82.35%，明顯高于正常胃黏膜(0.00%)及胃低級別上皮內(nèi)瘤變(8.00%)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.001)。Ki-67在胃高級別上皮內(nèi)瘤變、分化型早期胃癌組織中陽性表達(dá)率為88.24%，明顯高于正常胃黏膜(8.82%)及胃低級別上皮內(nèi)瘤變(20.00%)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.001)。見表1。

3 討論

目前，我國多數(shù)胃癌發(fā)現(xiàn)時(shí)已處于進(jìn)展期[3]。我國早期胃癌檢出率低的原因有很多，如胃鏡檢查在健康體檢中還不普遍、有早期胃癌診斷經(jīng)驗(yàn)的內(nèi)鏡醫(yī)師總量欠缺，但我國早期胃癌病理診斷標(biāo)準(zhǔn)混亂也是一個(gè)非常重要的原因。

表1 P53和Ki-67在不同胃組織中表達(dá)的比較

注：P53：正常胃黏膜與胃低級別上皮內(nèi)瘤變比較，χ2=2.82，P=0.090；正常胃黏膜與胃高級別上皮內(nèi)瘤變、分化型早期胃癌比較，χ2=47.60，P<0.001；胃低級別上皮內(nèi)瘤變與胃高級別上皮內(nèi)瘤變、分化型早期胃癌比較，χ2=31.87，P<0.001。Ki-67：正常胃黏膜與胃低級別上皮內(nèi)瘤變比較，χ2=1.54，P=0.220；正常胃黏膜與胃高級別上皮內(nèi)瘤變、分化型早期胃癌比較，χ2=42.92，P<0.001；胃低級別上皮內(nèi)瘤變與胃高級別上皮內(nèi)瘤變、分化型早期胃癌比較，χ2=27.80，P<0.001。

早期胃癌一經(jīng)確診，推薦接受內(nèi)鏡或外科治療。目前尚沒有研究表明內(nèi)鏡治療早期胃癌具有更好的預(yù)后，也沒有證據(jù)表明開腹手術(shù)與內(nèi)鏡治療在預(yù)后中的差異。但內(nèi)鏡治療的手術(shù)創(chuàng)傷輕，并發(fā)癥較少。

阿克曼外科病理學(xué)將異型增生分低級別和高級別。高級別異型增生被認(rèn)為是原位癌的同義詞，必須與黏膜內(nèi)癌鑒別，后者腺體有基底膜的破壞。幾個(gè)病理小組將胃活檢標(biāo)本的病理檢查結(jié)果分為以下幾個(gè)類別：1)沒有異型增生；2)異型增生不明確；3)低級別異型增生；4)高級別異型增生、原位癌；5)黏膜內(nèi)癌；6)浸潤癌。雖然日常工作中區(qū)分高級別異型增生、原位癌和黏膜內(nèi)癌十分重要，但由于均需要內(nèi)鏡下黏膜剝離術(shù)治療，而且處理基本一致，我們將兩者合并。實(shí)際工作中，病理有效區(qū)分胃低級別上皮內(nèi)瘤變、正常胃黏膜和胃高級別上皮內(nèi)瘤變、分化型早期胃癌，因?yàn)榍?組只需要隨診復(fù)查，而后者需要進(jìn)一步行內(nèi)鏡下黏膜剝離術(shù)或手術(shù)治療，有著更為重要的實(shí)踐價(jià)值。

既往研究[4]證實(shí)P53基因結(jié)構(gòu)改變是細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的一個(gè)重要途徑，P53基因是眾多抑癌基因中與人類關(guān)系最為密切的一個(gè)。P53基因突變常常發(fā)生在胃癌前病變向胃癌的轉(zhuǎn)化時(shí)期，發(fā)生率為50%～86%[5]。本研究結(jié)果顯示，P53在胃高級別上皮內(nèi)瘤變、分化型早期胃癌組織中陽性表達(dá)率為82.35%，明顯高于正常胃黏膜(0.00%)及胃低級別上皮內(nèi)瘤變(8.00%)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.001)。

Ki-67與細(xì)胞增殖相關(guān),陽性表達(dá)于增殖周期的細(xì)胞核，與細(xì)胞有絲分裂相關(guān)，研究[6]證實(shí)Ki-67可顯示細(xì)胞的增殖情況以及預(yù)測腫瘤患者預(yù)后情況。Ki-67在許多的惡性腫瘤細(xì)胞中存在高表達(dá)，而在對應(yīng)正常細(xì)胞低表達(dá)[7]，與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[8]。本研究結(jié)果顯示，Ki-67在胃高級別上皮內(nèi)瘤變、分化型早期胃癌組織中陽性表達(dá)率為88.24%，明顯高于正常胃黏膜(8.82%)及胃低級別上皮內(nèi)瘤變(20.00%)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.001)。

綜上所述，P53和Ki-67在胃高級別上皮內(nèi)瘤變、分化型早期胃癌組織中的存在高，兩者檢測有助于早期胃癌的鑒別診斷。

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