高效液相色譜同時測定吡蟲啉和多菌靈農殘能力驗證方法研究

摘 要：能力驗證工作是判定實驗室檢測檢驗能力的重要技術手段，也是實驗室日常檢測工作質量保證的有效方式。江蘇省儀征市農產品質量監督檢測中心連續多年均通過了省農委組織的農藥殘留檢測能力驗證考核。本文介紹一種同時測定蔬菜和水果中吡蟲啉和多菌靈的能力驗證方法，為農產品質量檢測提供技術支持。

關鍵詞：農藥殘留;能力驗證;吡蟲啉;多菌靈

我國有關農藥殘留能力驗證的報道主要集中在有機磷和菊酯類農藥檢測上[1]，

針對農產品中測定吡蟲啉和多菌靈能力的驗證方法尚未見報道。目前，縣級農產品檢測中心沒有質譜，在只有氣相色譜和液相色譜測定農藥殘留的情況下，能力驗證領取的樣品既要依據《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定》

（NY/T 761—2008）方法檢測有機磷和菊酯類農藥殘留[2]，又要依據《蔬菜水果中多菌靈等4種苯并咪唑類農藥殘留量的測定 高效液相色譜法》（NY/T 1680—2009）方法測定多菌靈農藥殘留[3]，

還要依據《蔬菜、水果中吡蟲啉殘留量的測定》（NY/T 1275—2007）方法測定吡蟲啉農藥殘留[4]，顯然領取的樣品無法滿足不同前處理方法的數量要求，所以必須將第一步提取方法統一起來。本文介紹一種依據檢測培訓介紹的方法并進行適當修改，有機磷、菊酯類、吡蟲啉和多菌靈采用同一種提取方法，再依據不同檢測方法處理或凈化，最后實現液相色譜同時測定吡蟲啉和多菌靈農藥殘留的方法。

一、材料與方法

（一）試驗樣品

能力驗證樣品由江蘇省農產品質量檢驗測試中心隨機派發。空白樣品2份，每份35 g;平行樣品3份，每份35 g。樣品不可分取，報送結果需扣除空白樣品濃度。

（二）液相色譜工作參數

島津高效液相色譜儀LC 20 A;色譜柱，Inertsil ODS-SP 5 μm 4.6×150 mm;

檢測器，SPD-20A紫外檢測器;檢測波長280 nm;流動相，甲醇∶水=

40∶60;柱溫25 ℃，流速1 mL/min，進樣量20 μL。

（三）提取方法

樣品取回后，靜置0.5 h，先轉移35 g

樣品，然后用70 mL乙腈分3次潤洗，全部轉移至燒杯中，并在勻漿機中高速勻漿2 min后過濾，濾液收集到預先裝有7.5～10.5 g氯化鈉的l00 mL具塞量筒中，劇烈震蕩l min，室溫下靜置30 min，

使乙腈相和水相分層。

（四）凈化方法

從100 mL具塞量筒中準確吸取10 mL乙腈溶液放入50 mL燒杯中，將燒杯放在80 ℃水浴鍋上蒸發近干。在燒杯中加入

2.0 mL甲醇+二氯甲烷（5∶95）溶解殘渣待凈化。將氨基柱用4 mL甲醇+二氯甲烷（5∶95）淋洗活化，當液面到達柱吸附層表面時即加入上述待凈化溶液，用15 mL離心管收集洗脫液，用4 mL甲醇+二氯甲烷（5∶95）洗燒杯后過柱并重復一次，將離心管置于50 ℃氮吹儀上氮吹蒸發近干，用甲醇準確定容至2.5 mL渦漩混勻，用0.45 μm濾膜過濾，待測。

二、結果和分析

（一）檢測方法的關鍵控制點

檢測波長對吡蟲啉和多菌靈的響應值（或峰高）影響很大，吡蟲啉最大吸收峰約在270 nm，多菌靈最大吸收峰約在280 nm，同等濃度吡蟲啉比多菌靈響應值（或峰高）高1～3倍，綜合考慮選擇在280 nm條件下同時測定吡蟲啉和多菌靈效果最佳。氨基柱凈化，原培訓方法中凈化溶劑用量為6 mL，分3次，每次2 mL，試驗中發現多菌靈回收率較差，為50%～70%。本方法凈化溶劑用量

10 mL，確保多菌靈不會殘留在凈化柱中。柱溫對吡蟲啉和多菌靈的分離效果影響很大，試驗中對比了30 ℃和25 ℃的分離效果，發現25 ℃分離效果最佳（見圖1）。在上述試驗條件下，吡蟲啉保留時間為4.860 min，多菌靈保留時間9.539 min，分離效果良好，滿足同時測定的要求。

（二）方法的標準曲線

分別取1 000 mg/L吡蟲啉和1 000 mg/L

多菌靈標準物質溶液，用甲醇溶解并定容于10 mL容量瓶中，配制成100 mg/L

的標準溶液儲備液。然后配置吡蟲啉和多菌靈質量濃度均為0.05、0.10、0.20、0.50、1.00 mg/L和2.00 mg/L的混合標準溶液。按以上方法的條件進行測定。分別以吡蟲啉和多菌靈的峰高（x）對其質量濃度（Y，mg/L）繪制工作曲線，得到吡蟲啉回歸方程f（x）=0.000 304 2x-0.000 839 6，相關系數R2=0.998;多菌靈回歸方程Y=0.000 457 4x-0.000 727 4，相關系數R2=0.998。這表明在0.05～

2.00 mg/L范圍內，吡蟲啉和多菌靈的峰高與其質量濃度呈良好的線性關系，滿足農藥殘留定量分析的需要。

（三）方法添加回收率

取空白農產品樣品25 g，分別添加0.1、0.5、1.0 mg/kg相同質量濃度水平吡蟲啉和多菌靈，每個添加水平重復3次，按照上述提取和凈化步驟處理后進行測定，計算平均加標回收率和相對標準偏差（RSD），結果見表1。結果表明農產品中不同濃度吡蟲啉和多菌靈的平均回收率在80%～110%，相對標準偏差（RSD）小于15%，滿足農藥殘留檢測不同質量濃度回收率的要求。

（四）圖譜解析

每個樣品分析時間為35 min，從圖2可以很明顯看出空白樣品無吡蟲啉和多菌靈，平行樣品中含有吡蟲啉，無多菌靈。

（五）能力驗證結果

儀征市農產品檢測中心參加某年度省農產品質量安全檢測能力農殘驗證結果如表2所示，結果表明吡蟲啉和多菌靈參數順利通過能力驗證。

參考文獻：

[1]朱培淼，王雙雙，張俊韜，等.農產品農藥殘留檢測能力驗證的方法與技巧[J].上海農業科技，2015（4）：27-28.

[2]中華人民共和農業部.蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定：NY/T 761—2008[S].北京：中國農業出版社，2008.

[3]中華人民共和國農業部.蔬菜水果中多菌靈等4種苯并咪唑類農藥殘留量的測定 高效液相色譜法：NY/T 1680—2009[S].北京：中國農業出版社，2009.

[4]中華人民共和農業部.蔬菜、水果中吡蟲啉殘留量的測定：NY/T 1275—2007[S].北京：中國農業出版社，2007.