番石榴葉與果止瀉作用的比較研究

摘 要：為比較研究番石榴葉與果的止瀉作用，以小白鼠為研究對象，觀察番石榴葉與果不同濃度提取物對硫酸鎂致瀉小白鼠的止瀉作用，篩選出番石榴葉與果提取液止瀉作用最有效的濃度。結果表明：與空白組相比，同濃度番石榴葉提取液與番石榴果提取液兩者的潛伏時間和稀便率均有顯著差異（P<0.05），且番石榴葉A組（2 g/mL）潛伏時間為（136±6.17）min，稀便率為（62.97±11.56）%，番石榴果A組（2 g/mL）潛伏時間為（127±5.73）min，稀便率為（65.65±13.57）%，番石榴葉提取液止瀉作用明顯優于番石榴果提取液。這表明同劑量番石榴葉提取液對硫酸鎂致瀉小白鼠的止瀉作用明顯優于番石榴果提取液，其止瀉強弱與提取液的濃度有一定關系，隨提取液濃度的增大，止瀉效果逐漸增大，為下一步研發新型的止瀉藥物提供理論基礎。另外，番石榴葉提取物對硫酸鎂致瀉小白鼠的止瀉效果很好，成為了新型止瀉藥的重要潛在來源。

關鍵詞：番石榴葉；番石榴果；止瀉作用

番石榴，也被稱為雞屎果、番桃樹[1]。其廣泛種植在我國南部，葉片平整，味道甘澀，具有淬滅、止血，緩解脾臟、胃、大腸和肝臟出血的作用。現主要對番石榴葉與果對小白鼠止瀉作用進行比較研究。

一、試驗材料

（一）試驗藥材與動物

1.藥品檢定

本次試驗采用的是番石榴葉和果實。番石榴果（番石榴的干燥幼果），為干燥的未成熟幼果，呈不規則的圓球形、卵形或梨形不等，橫截面直徑2～

3 cm，新鮮時青綠色，烘干時黑褐色。表面稍粗糙堅硬，先端有宿存的花萼及殘存花柱[2]。

番石榴的果實堅硬，淺褐色，5室，有多數種子密集鑲嵌于內[3]。番石榴種子為黑褐色，如綠豆大小。味道微微青澀、有酸味，有輕微果香，最好的狀態為飽滿、堅實。

番石榴葉面呈不規則橢圓形或卵圓形，大多數表面蜷縮彎曲或破碎，葉片表面淡灰褐色、無毛，下表面棕色，有密集而柔軟的短毛，主葉脈和側脈均隆起，側脈在近葉緣處連成邊脈。嫩莖扁四棱形，密被短柔毛[4]。番石榴葉有清香的氣味，味道微苦澀。

2.藥材

番石榴果實和葉，購于吉林省長春市諾維萊生物科技制藥有限公司。

3.試驗動物

本次試驗采用昆明系小白鼠，SPF級，雌雄各半，體質量18～22 g，均為健康小白鼠。

（二）試驗試劑

硫酸鎂（湖北興銀河化工有限公司CAS號：10034-99-8）、蒸餾水、思密達[批準文號：國藥準字0200609H0生產企業，博福-益普生（天津）制藥有限公司]。

（三）試驗儀器

DSX-280B手提式壓力蒸汽滅菌器，數顯恒溫水浴鍋，LG-08A快速開蓋萬能高速搖擺粉碎機，電子天平，灌胃器，針管，漏斗，50 mL和100 mL容量瓶，500 mL燒杯，50 mL量筒，玻璃棒，藥匙，稱量紙，濾紙，試管架，鑷子等。

二、試驗方法

（一）番石榴葉與果水提物提取

將番石榴果實和葉去除表面污垢，60 ℃恒溫干燥箱中干燥6 h，分別用粉碎機粉碎，過80目篩，放玻璃瓶密封（防潮解）備用。用分析天平精密稱取粉末各10 g，置于500 mL燒杯中，再各自加200 mL蒸餾水，置于55 ℃恒溫水浴鍋中加熱2 h，用多層紗布過濾，殘渣中加入100 mL蒸餾水再于55 ℃水浴中加熱1 h，過濾，合并濾液，濃縮至20 mL，得到濃度為0.5 g/mL藥物的稀釋液，放入4 ℃冰箱備用。

（二）濃縮稀釋提取液

將番石榴果實和葉的提取液分別于水浴鍋中加熱，然后蒸發濃縮成5、10、20 mL，稀釋到40 mL，即得到濃度分別為2.00、1.00、0.50、0.25 g/mL的提取液，并做好標記，放入冰箱備用。

（三）試劑的制備

1.硫酸鎂溶液制備

用電子天平精密稱取硫酸鎂5 g、活性炭1 g，放入50 mL容量瓶中加蒸餾水反復振蕩溶解，加蒸餾水水定容到

50 mL備用。

2.思密達溶液的制備

用電子天平精密稱取思密達5 g，放入100 mL容量瓶中，加蒸餾水反復振蕩使其充分溶解，再加蒸餾水定容到100 mL

備用。

（四）硫酸鎂誘導小白鼠腹瀉模型

1.動物分組

取小白鼠80只，雌雄各半，體質量18～22 g，隨機分為10組，每組8只，分別為2.00 g/mL番石榴果組、1.00 g/mL番石榴果組、0.50 g/mL番石榴果組、

0.25 g/mL番石榴果組、2.00 g/mL番石榴葉組、1.00 g/mL番石榴葉組、0.50 g/mL番石榴葉組、0.25g/mL番石榴葉組、陽性組（灌胃思密達）以及空白對照組（生理鹽水）[5]。

隨后觀察并記錄小白鼠稀便點數，以稀便多少表示小白鼠的腹瀉程度，每小時換紙1次，連續觀察4 h。

2.止瀉試驗

試驗前小白鼠禁食不禁水12 h。將小白鼠分好組別，做好標記后分別灌胃不同濃度番石榴葉與果提取液，每只

0.02 mL/g，陽性組灌胃相同體積思密達溶液

（3 g/60 mL），空白對照組灌胃相同體積生理鹽水溶液。

給藥30 min后，各組均灌胃硫酸鎂溶液，每只0.02 mL/g，隨后將小白鼠單個放在墊有吸水紙的鼠籠內，每隔1 h換墊紙，給硫酸鎂后即計時，記錄1～4 h

內小白鼠總便數、稀便數、稀便級，計算腹瀉指數，計算組間不同時間累積腹瀉次數（稀便點數）及腹瀉指數[6]。并觀察小白鼠的臨床表現，包括小白鼠是否出現腹瀉、寒顫、松毛、活動量降低及肛門紅腫等癥狀。

其中稀便級的確定依據為：糞便污跡直徑<1.0 cm為1，1.0～1.9 cm為2，2.0～3.0 cm為3，>3.0 cm為4。另外，腹瀉指數=稀便率×平均直徑。

（五）統計學處理

數據用x±s表示，數據間差異的顯著性采用SPSS13.0軟件處理。

三、結果與分析

通過建立硫酸鎂致瀉小白鼠模型研究探討番石榴葉和果實不同提取物的止瀉作用，試驗結果如表1所示。

表1 對硫酸鎂致瀉小白鼠的止瀉作用（x±s）

組別n劑量/（mL/g）潛伏時間/min稀便率/%

生理鹽水組80.0290±4.2181.77±7.45

番石榴果A組80.02127±5.73**65.65±13.57*

番石榴果B組80.02116±4.76*67.28±11.67*

番石榴果C組80.02108±3.98*72.88±9.65*

番石榴果D組80.0298±3.17*78.82±8.78*

番石榴葉A組80.02136±6.17**#62.97±11.56**#

番石榴葉B組80.02127±5.12**65.78±9.21*

番石榴葉C組80.02114±4.87*71.27±8.76*

番石榴葉D組80.02102±4.01*75.57±6.73*

思密達組80.02150±9.31**60.78±8.75**

注：生理鹽水組為空白對照組，*表示表中各組與空白組有顯著差異（P<0.05），**表示表中各組與空白組有極顯著差異（P<0.01），#表示番石榴葉A組與番石榴果A組比較有顯著差異（P<0.05）。

臨床表現，生理鹽水組小白鼠出現腹瀉、寒顫、松毛、活動量降低及肛門紅腫等不良癥狀。番石榴果A組、番石榴葉A組、番石榴葉B組未出現上述不良癥狀，除思密達組外，其余各組出現輕微腹瀉等不良癥狀。

結果表明，與空白組對比，番石榴葉A組、番石榴葉B組、番石榴果A組、思密達組潛伏時間有極顯著差異

（P<0.01），其余各組潛伏時間有顯著差異（P<0.05）。與空白組對比，番石榴葉A組、思密達組稀便率有極顯著差異（P<0.01），其余各組稀便率有顯著差異（P<0.05）。而且番石榴葉提取液止瀉作用優于番石榴果提取液。不同濃度的番石榴果、葉提取物對小白鼠均有不同程度的止瀉作用。

通過硫酸鎂致瀉小白鼠止瀉試驗可知，同樣濃度的番石榴葉與果提取液相比，番石榴葉提取液潛伏時間>番石榴果提取液的潛伏時間，番石榴葉組的稀便率<番石榴果組的稀便率。由此得出，同樣濃度的番石榴葉的止瀉作用優于番石榴果。

同種提取液不同濃度對小白鼠的稀便率和潛伏時間也有差異，潛伏時間番石榴葉A組>番石榴葉B組>番石榴葉B組>番石榴葉D組，稀便率番石榴葉A組<番石榴葉B組<番石榴葉C組<番石榴葉D組。隨提取液濃度的增高，潛伏時間有劑量依賴性升高；隨提取液濃度增高，稀便率有劑量依賴性降低。由此看出，劑量越高，止瀉效果明顯增強。

總之，2種提取液都具有止瀉作用，而且番石榴葉提取液止瀉作用高于番石榴果提取液。

四、討論

（1）番石榴葉提取液與果提取液對硫酸鎂致瀉小白鼠均有止瀉作用，且止瀉作用有明顯差異，其中番石榴葉作用顯著，原因可能與番石榴葉與果中所含的鞣質成分及黃酮含量不同有關，具體差異有待繼續深入研究。

（2）同種提取液不同濃度對小白鼠的稀便率和潛伏時間也有差異，潛伏時間番石榴葉A組>番石榴葉B組>番石榴葉B組>番石榴葉D組，稀便率番石榴葉A組<番石榴葉B組<番石榴葉C組<番石榴葉D組。隨提取液濃度的增高，潛伏時間有劑量依賴性升高；隨提取液濃度的增高，稀便率有劑量依賴性降低。由此看出，提取液的濃度是衡量止瀉效果的條件之一。

（3）番石榴葉A組與陽性組相比，陽性組止瀉作用優于番石榴葉A組。原因可能是本試驗采用的提取方法為水提法，并不能完全使番石榴葉內的有效止瀉成分完全提取出來，提取方法有待提高與優化。

五、結論

本試驗通過水提法對番石榴果實和葉進行提取，采用濃縮稀釋法制成不同濃度的提取液。與空白組對比，同濃度番石榴葉提取液與番石榴果提取液兩者的潛伏時間和稀便率均有顯著差異

（P<0.05），且番石榴葉A組（2 g/mL）

潛伏時間為（136±6.17）min，稀便率為（62.97±11.56）%，番石榴果A組

（2 g/mL）潛伏時間為（127±5.73）min，

稀便率為（65.65±13.57）%，番石榴葉提取液止瀉作用明顯優于番石榴果提取液。同劑量番石榴葉提取液對硫酸鎂致瀉小白鼠的止瀉作用明顯優于番石榴果提取液，其止瀉強弱與提取液的濃度有一定關系，隨提取液濃度的增大，止瀉效果逐漸增大。

參考文獻：

[1]程天印.番石榴葉止瀉機制的初步研究[J].畜牧與獸醫，2005（2）：15-17.

[2]謝志明，王敏春.廣西中藥材番石榴的生藥作用[J].中國民間醫藥雜志，2000（6）：363.

[3]劉建林，夏明忠，袁穎.番石榴的綜合利用現狀及發展前景[J].中國林副特產，2005（6）：64-66.

[4]魏連波.番石榴葉治療小兒輪狀病毒腸炎類的臨床研究 [J].中國中西結合雜志，2000（9）：893.

[5]劉素芳.野罌粟水煎劑對番瀉葉致瀉小白鼠止瀉作用的機理研究[D].北京：北京中醫藥大學，2008.

[6]曾蓁，楊麗萍，胡瑤.米湯止瀉作用及其機制[J].醫藥導報，2015（2）：34-37.