TogoⅡ蛋白在原發性乳腺癌組織中的表達及其與預后的相關性

郭繼文，孫云緯，陳 琳，邱克茂，胡友主

(1.廣州開發區醫院普外科，廣州 510730； 2.暨南大學附屬第一醫院普外科，廣州 510632)

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一。目前，對乳腺癌的治療主要有手術、化療，其中化療是綜合治療乳腺癌的重要方法[1]。但是，有研究[2]顯示，部分患者會出現化療效果欠佳等現象，而多藥耐藥是導致化療失敗的重要原因，其中多藥耐藥基因(MDR)產物——DNA拓撲異構酶Ⅱ(TopoⅡ)是形成化療耐藥性的物質基礎，是導致腫瘤化療失敗以及腫瘤早期復發的主要原因。本研究通過對原發性乳腺癌患者進行TopoⅡ的免疫組化分析，并觀察其與相關臨床病理特征的關系，旨在探討TopoⅡ蛋白在原發性乳腺癌組織中的表達及其與預后的相關性。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選擇2014年6月至2015年12月在廣州開發區醫院和暨南大學附屬第一醫院經術后病理證實為原發性乳腺癌患者100例，均為女性，年齡32～73(52.76±2.48)歲。按照乳腺腫瘤世界衛生組織學分類標準進行病理組織學分型：浸潤性導管癌63例，浸潤性小葉癌10例，原位癌20例，黏液腺癌4例，非浸潤性癌3例。淋巴結轉移38例，無淋巴結轉移62例。所有患者術前均未行新輔助化療、放療或內分泌治療。

1.2 方法

1)取患者的乳腺癌組織標本，用10%中性甲醛固定，石蠟包埋，5μm厚連續切片，DAB顯色，蘇木精-伊紅染色(HE染色)，常規脫水、封片。采用免疫組織化學SP法檢測乳腺癌組織中TopoⅡ、雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)、p53的表達情況，所有試劑盒均購自武漢博士德生物工程有限公司，以上具體操作根據試劑盒說明書進行。用PBS代替一抗作陰性對照，用已知陽性乳腺癌組織作陽性對照。2)分析TopoⅡ蛋白與臨床病理特征的關系及其與ER、PR、p53和預后的相關性。

1.3 結果判定標準

由2位高年資的病理科醫師采用雙盲法進行閱片。在光學顯微鏡(日本奧林帕斯公司，型號：BX51)的產品下隨機選取10個高倍視野，對每個高倍視野中陽性細胞數占腫瘤細胞總數的百分比進行計算。然后，對10個高倍視野陽性細胞的平均百分比進行計算，以細胞核呈現棕黃色或棕褐色顆粒為陽性細胞，若陽性細胞低于10%為陰性，反之為陽性，其中低度表達(+)為10%～29%，中度表達()為30%～49%，強陽性表達()為≥50%。

1.4 統計學方法

采用SPSS17.0統計軟件進行數據處理。計數資料比較采用χ2檢驗，變量間的相關性采用Spearman相關分析。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

100例患者乳腺癌組織中TopoⅡ蛋白陽性表達率為58.00%(58/100)，陰性表達率為42.00%(42/100)；ER陽性表達率為38.00%(38/100)，陰性表達率為62.00%(62/100)；PR陽性表達率為35.00%(35/100)，陰性表達率為65.00%(65/100)；p53 陽性表達率為27.00%(27/100)，陰性表達率為73.00%(73/100)。100例患者乳腺癌組織中TopoⅡ蛋白陽性表達率明顯高于ER、PR、p53(P<0.05)。

年齡為≤50歲、腫瘤大小為≤2 cm、病理類型為浸潤性導管癌TopoⅡ蛋白陽性表達率與年齡>50歲、腫瘤大小為>2 cm，病理類型為浸潤性小葉癌、原位癌、黏液腺癌、非浸潤性癌比較差異無統計學意義(P>0.05)。有淋巴結轉移的TopoⅡ蛋白陽性表達率明顯高于無淋巴結轉移(P<0.05)。見表1。

表1 TopoⅡ蛋白表達與臨床病理特征的關系

相關性分析結果顯示，TopoⅡ蛋白陽性表達與淋巴結轉移和ER、PR、p53表達均呈正相關(r=0.947、0.785、0.627、0.468，均P<0.05)。

3 討論

乳腺癌是全球女性最常見的惡性腫瘤。有研究[3]顯示，我國乳腺癌的患病率呈逐漸增加的趨勢，且在近10年患病率增加了30%，嚴重威脅女性的身心健康。因此，為降低乳腺癌患者的病死率，早期、準確診斷乳腺癌以及判斷其預后具有重要的臨床意義。

由于乳腺癌的臨床癥狀不顯著，大部分乳腺癌患者來院就診時常處于中晚期，且只能接受化療，但有研究[4]發現，部分患者由于多藥耐藥導致化療效果欠佳，預后較差。目前，有研究[5]證明，胚胎型谷胱甘肽-S-轉移酶-π、P-糖蛋白和TopoⅡ等均是導致機體產生多藥耐藥的重要物質基礎，可直接影響乳腺癌患者的治療效果及預后。有研究[6]證實，TopoⅡ不僅是多藥耐藥的重要靶酶，而且是某些細胞藥物作用的靶點，可介導多種化療藥物產生耐藥性。另外，TopoⅡ廣泛存在于生物體細胞核內，是控制核酸生理功能以及調節核酸空間結構動態變化的關鍵酶。有文獻[7-9]報道，TopoⅡ高表達可提示瘤細胞的復制速度加快，并說明腫瘤的惡性程度高。因此，可將TopoⅡ作為正常細胞或腫瘤細胞增殖的標志物之一，對評估化療效果及預后具有十分重要的意義。本研究結果顯示，100例患者乳腺癌組織中TopoⅡ蛋白陽性表達率明顯高于ER、PR、p53(P<0.05)，TopoⅡ蛋白陽性表達與淋巴結轉移和ER、PR、p53表達均呈正相關(r=0.947、0.785、0.627、0.468，均P<0.05)，提示TopoⅡ蛋白在原發性乳腺癌組織中可高表達，可能為評估乳腺癌患者預后的指標之一。馬士輝等[10]探討人表皮生長因子受體2(HER-2)、TopoⅡα以及Ki-67在乳腺癌組織中的表達情況，發現TopoⅡα的擴增或高表達與淋巴結轉移均有顯著的相關性，并認為，可將TopoⅡα作為評估乳腺癌預后的有效指標之一，該觀點與本研究基本一致。

參考文獻：

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[8] 柴其翔，王季石.調控血紅素加氧酶-1誘導K562A02細胞增殖、凋亡及耐藥機制研究[D].貴陽：貴陽醫學院，2015.

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[10] 馬士輝，凌飛海.乳腺癌組織中HER-2、TOPOⅡα、Ki-67的表達及臨床意義[J].哈爾濱醫藥，2016，36(5)：504-506.