屎腸球菌廉價培養基的研制

李英英 陳曦 宋鐵英

摘要 [目的]為了降低屎腸球菌微膠囊制劑的發酵成本，[方法]用自主分離的一株屎腸球菌作為發酵菌株，用玉米和豆粕替代MRS基礎培養基中的碳源和氮源，設計不同替代比例的MRS廉價培養基，經過培養和計數，篩選出價格低廉又適合該菌株生長的廉價培養基。[結果]玉米和豆粕作為碳源和氮源制成的替代培養基適合該屎腸球菌生長；結合價格和培養效果，篩選出碳源50%替代、氮源100%替代的MRS-C50N100替代培養基為適合用于屎腸球菌工業化發酵的廉價培養基。[結論]MRS-C50N100替代培養基既可以極大降低屎腸球菌的發酵成本，又可以使活菌數達到益生菌制劑要求的有效活菌量，可用于屎腸球菌微膠囊制劑的工業化生產。

關鍵詞 屎腸球菌；MRS，廉價培養基；飼料原料

中圖分類號 S816.6 文獻標識碼

A 文章編號 0517-6611（2018）32-0080-02

The Development of the Lowcost Medium Using for Enterococcus faecium

LI Yingying，CHEN Xi，SONG Tieying （Institute of Biotechnology，Fujian Academy of Agricultural Science，Fuzhou，Fujian 350003）

Abstract [Objective] In order to reduce the fermentation cost of microencapsulated Enterococcus faecium.[Method] The carbon and nitrogen source in MRS basic medium were instead of corn and soybean meal which were usually used as stuff.MRS lowcost medium with different replacement ratio was designed and a strain of E.faecium isolated by ourselves was used as fermentation strain.After incubation and counting，lowcost medium suitable for the growth of the strain was screened out.[Result]The result showed that the lowcost medium，in which corn and soybean meal were used as carbon and nitrogen source，were suitable for the growth of E.faecium.Considering the price and the effect of culture，the substituting medium MRSC50N100 with 50% alternative carbon source and 100% alternative nitrogen source was selected as a lowcost medium and suitable for industrial fermentation of E.faecium.[Conclusion]MRSC50N100 can greatly reduce the fermentation cost of E.faecium，and enable to reach the viable count required by probiotics.It can be used in industrial production of microencapsulated E.faecium.

Key words Enterococcus faecium；MRS；Lowcost medium；Stuff

基金項目 福建省科技計劃項目（2017R1019-2，2017R1019-7，2018R1019-4）；福建省農科院科技創新項目（A2017-23，PC2017-6）；福建省特種水產配合飼料重點實驗室開發課題（TMKJZ1705）；鰻鱺現代產業技術教育部工程研究中心開放基金（RE201802）。

作者簡介 李英英（1987—），女，河南淅川人，研究實習員，碩士，從事動物營養與免疫研究。*通訊作者，研究員，從事動物營養和免疫研究。

收稿日期 2018-06-29；修回日期 2018-07-19

乳酸菌是動物腸道內的主要益生菌，具有促進營養物質的消化和吸收[1]，維持腸道內微生態平衡[2]，增強機體免疫力[3]，提高生產性能[4]等作用。為解決畜牧行業中抗生素濫用引發的藥殘和耐藥性問題，在動物日糧中添加乳酸菌制劑等抗生素替代物已經成為很多人的選擇[5]。屎腸球菌是乳酸菌中抗逆性較強的一類菌[6]，培養和保存條件都較為容易，是制作乳酸菌微膠囊制劑時的首選菌種[7]。在前期研究中，我們已經篩選到一株抗逆性較強的豬源屎腸球菌，通過噴霧干燥工藝制備成屎腸球菌微膠囊制劑，并且對制成的屎腸球菌微膠囊制劑進行了高溫耐受性、耐酸性、腸溶性、穩定性和動物田間小規模試驗，證明該屎腸球菌微膠囊制劑對高溫、胃液、腸液均有較好的耐受性，并且可顯著提高斷乳仔豬生產性能[4]。但是前期培養屎腸球菌使用的MRS培養基中氮源物質是蛋白胨、牛肉膏和酵母膏，價格昂貴，造成屎腸球菌微膠囊制劑生產成本過高，難以推廣。

豆粕是動物飼料配方中最主要的氮源物質，與MRS培養基中的氮源物質（蛋白胨、酵母膏和牛肉膏）相比，豆粕價格低廉且易得[8]。若用豆粕替代MRS培養基中的蛋白胨、酵母膏和牛肉膏，可大幅度降低屎腸球菌微膠囊制劑的生產成本。而玉米是動物全價飼料中的碳源物質[9]，與培養基中原有的碳源（葡萄糖）相比，價格更低且來源穩定更易獲得。用豆粕和玉米作為培養基中的氮源和碳源，可以降低成本，有利于屎腸球菌微膠囊制劑的工業化生產。本研究擬用豆粕和玉米部分或者全部替代MRS基礎培養基中的氮源和碳源成分，制成MRS替代培養基；再用前期分離得到的屎腸球菌作為菌株，進行培養計數，最后結合價格，篩選出高效、價廉的MRS廉價培養基，為屎腸球菌微膠囊制劑在飼料和養殖行業中的推廣奠定基礎。

4 結論

該研究用飼料原料中的玉米和豆粕替代MRS基礎培養基中的碳源和氮源，經過培養和計數，證明二者作為氮源和碳源制成的替代培養基適合屎腸球菌生長。

進一步試驗中，從營養和價格兩個方面綜合考慮，篩選適合進行工業化發酵屎腸球菌的MRS廉價培養基，最終確定了碳源替代比例為50%；而氮源方面，當替代量達到100%時培養基的價格可大幅度降低，而活菌得率僅會略有下降，仍可達到益生菌制劑要求的有效活菌量。因此，選擇MRS-C50N100替代培養基進行屎腸球菌發酵，在保證活菌得率的情況下，可以極大降低乳酸菌制劑的制作成本，有利于屎腸球菌微膠囊制劑的工業化生產和其在養殖行業的推廣應用。

參考文獻

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