低鹽度脅迫對羅氏沼蝦行為的影響

何竺柳，王如鹓，Hector Victor，朱晶婷，傅冠學，鮑華江，儲張杰

（1.浙江海洋大學水產學院，浙江舟山 316022；2.揚州市水產生產技術指導站，江蘇揚州 225101）

羅氏沼蝦Macrobrachium rosenbergii隸屬節肢動物門、甲殼綱、十足目、長臂蝦科、沼蝦屬，也稱為萬氏對蝦、金錢蝦、馬來西亞大蝦等，素有淡水蝦王之稱[1]。因其個體大而聞名，并且具有生長快、食譜廣、病害較少、肉質細嫩爽口等優點，成為國內外養殖量最高的品種之一。我國自1976年由廣東省珠江水產研究所引進該蝦種試養，并于次年人工繁殖成功，后來經過不斷的生產實踐，逐步解決了羅氏沼蝦越冬保種、苗種繁殖、幼蝦培育和商品蝦養殖等一系列問題，已經形成非常大的規模，現已在廣東、廣西、江蘇、浙江等十多個省市進行養殖，羅氏沼蝦養殖業在我國迅速興起。

盡管羅氏沼蝦產業得到了迅猛發展，但由于產業組織化程度低、養殖規模普遍小，養殖模式單一、疫病爆發、性狀退化、品質下降和良種覆蓋率底等各種原因，嚴重制約了羅氏沼蝦養殖產業的可持續發展[2-3]。羅氏沼蝦原產于印度太平洋地區，生活在各種類型的淡水或咸淡水水域，其生長和肉質可能會因鹽度的改變而受到影響，由于研究人員長久以來側重于對其育苗成活率、養殖模式、飼料配方等應用研究，而對其在不同鹽度狀態下的攝食行為、消化生理等方面研究尚不明確[4-8]。

陳文靜等[9]對羅氏沼蝦生物學研究表明，羅氏沼蝦的蚤狀幼體生長發育最適水域鹽度為10～14。而發育到幼蝦階段乃至抱卵親蝦時期，通常在淡水中生長發育[10-11]。研究指出剛從受精卵孵化出來的羅氏沼蝦只能夠在低鹽度的水中生存，在羅氏沼蝦幼體后期階段才能獲得在淡水中存活的能力，其幼體在鹽度12～14條件下生長和發育最佳[12-13]。劉洪軍等[14]進一步研究了羅氏沼蝦蚤狀幼體及仔蝦對鹽度突變的適應情況，發現其蚤狀幼體第二期及仔蝦能適應較大范圍的鹽度突變，具有較強的調節滲透壓的能力,但其蚤狀幼體必須要在一定的鹽度條件才能正常生長發育。

因此，本實驗選擇在低鹽度下養殖羅氏沼蝦，在室內條件下研究鹽度對其攝食行為等生物學特性的影響，以探討羅氏沼蝦對鹽度的耐受能力及生長等生物學特性，充分利用咸淡水資源，為篩選出適宜羅氏沼蝦養殖的鹽度范圍提供依據，拓展羅氏沼蝦的養殖空間。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

實驗所用的羅氏沼蝦均取自浙江省舟山市岱山縣宮門水產養殖場，帶回實驗室，將其暫養在200 L的養殖水箱中，每個水箱放養500尾，共1 000尾，平均體重5.32±0.20 g，平均體長 6.13±0.20 cm。實驗用水由25的海水和淡水配置而成，充分曝氣，水溫恒溫在26℃，pH控制在7.8～8.3之間，使用海利牌V-30排氣量30 L/min的超靜強力泵來進行增氧，使水中的溶解氧保持在5 mg/L以上。

1.2 實驗方法

不同鹽度對羅氏沼蝦的行為影響鹽度實驗設置對照組及實驗組共8個組，鹽度分別為0，2，4，6,8，10,12,14的鹽度梯度，實驗時隨機挑選健康活撥、附肢齊全大小一致的1只羅氏沼蝦放入養殖行為觀察箱中，每組設30個平行，待蝦在適應環境24 h后，往水中投喂5 g浮性飼料（粗蛋白含量為38%，平均粒徑為2.00 mm），記錄1 h內羅氏沼蝦的行為參數。在實驗開始前，設置不同鹽度下，羅氏沼蝦行為觀察的預實驗，每組鹽度放4只規格一樣的蝦于行為觀察箱中，確定羅氏沼蝦的行為動作。行為參數及其定義如下：

(1)尋食時間：實驗開始至羅氏沼蝦開始攝食的時間（單位/min)。

(2)攝食時間：羅氏沼蝦嗅聞、試探以及用口攝食飼料的時間（單位/min)。

(3)攝食次數：羅氏沼蝦嗅聞、試探以及用口攝食飼料的次數（單位/times·h-1)。

(4)運動時間：羅氏沼蝦累計運動（包括爬行、攀爬、彈退）時間（單位/min)。

1.3 數據處理

采用SPSS20.0軟件和Excel 2010軟件對一小時內所記錄到的羅氏沼蝦的行為參數進行分析和作圖，結果用平均值土標準誤(Mean士SE)表示。數據分析時，首先對實驗數據進行單因素方差（ANOVA）分析，再用Duncan’s進行多重比較檢驗組間差異，以P＜0.05表示差異顯著。

2 結果

2.1 行為描述

通過預實驗發現，羅氏沼蝦在游動時，第1對觸須向前，第2對觸須分別置于身體兩側，第2對螯足呈現攻擊姿勢，其余3對步足收攏在頭胸部，位于腹部的游泳足則不斷地在劃水，尾扇呈張開的姿態來保持身體的平衡，當受到驚嚇或者躲避時，通過收縮腹肌和快速擺動尾扇實現瞬間移動。但在絕大部分時間里基本安靜地潛伏在水箱的底部，偶爾進行小范圍內爬行。在淡水及鹽度10以內的運動情況基本一致，但在鹽度4以上養殖的羅氏沼蝦均有跳躍到水箱外面情況。

投喂飼料后，羅氏沼蝦沒有立刻上去搶食，而是趴在原來的位置，用2對觸須兩邊擺動，隨后使用螯足將飼料夾住，并迅速游回原來的位置，用短而堅硬的大顎把飼料嚼碎，再用第1對小顎將嚼碎的飼料送到嘴里，整個過程持續3～5 min。當有其他蝦靠近其周圍的食物時，如果是來者比自身個體大，則會有躲避的現象，當來者個體小于自身時，則出現驅趕或者搏斗的現象，在高鹽度的羅氏沼蝦的攝食及運動情況明顯弱于生活在淡水及低鹽度組的沼蝦。

圖1 不同鹽度對羅氏沼蝦尋食時間的影響Fig.1 Effect of different salinity on the searching time of M.rosenbergii

2.2 不同鹽度條件下對羅氏沼蝦尋食時間的影響

觀察發現，投喂飼料后，羅氏沼蝦沒有立刻上去搶食，而是趴在原來的位置，用兩對觸須兩邊擺動。從圖1中可以看出，羅氏沼蝦的尋食時間隨著鹽度的升高而出現顯著的變化（F1,7=194.444，P=0.014）。結果表明，隨著鹽度的增加，羅氏沼蝦的尋食時間呈現升高的變化。對照組的羅氏沼蝦的尋食時間最短，在1 h的不間斷記錄中，僅僅用了3.86±0.16 min，而鹽度為14的鹽度組尋食時間最長，用了7.14±0.28 min，比對照組的尋食時間增加了84.97%。通過Duncan’s對各組間兩兩比較可知，對照組0鹽度與實驗組2的羅氏沼蝦的尋食時間沒有顯著性差異（P＞0.05），但與實驗組4，6，8，10，12，14之間的尋食時間差異性顯著（P＜0.05）；各實驗組間，鹽度2～4尋食時間差異不顯著（P＞0.05），鹽度8～14尋食時間差異不顯著（P＞0.05），而鹽度6與各實驗組間差異顯著（P＜0.05）。綜上所述，鹽度會增加羅氏沼蝦的尋食時間，在鹽度在6以上時，羅氏沼蝦的尋食時間增長但變化不大。

2.3 不同鹽度條件下對羅氏沼蝦攝食時間的影響

從圖2中可以看出，羅氏沼蝦的攝食時間隨著鹽度的升高而出現顯著的變化（F1,7=241.355，P=0.068）。結果表明，隨著鹽度的增加，羅氏沼蝦的攝食時間呈現顯著降低的趨勢（P＜0.05）。對照組的羅氏沼蝦的攝食時間最長，在1 h的不間斷記錄中，平均用了5.49±0.27 min進行攝食行為，而鹽度為14的鹽度組攝食時間最短，僅僅進行2.63±0.67 min的攝食行為，比對照組的攝食時間減少了52.09%。通過Duncan’s對各組間兩兩比較可知，對照組0鹽度與各實驗組之間均表現為顯著性差異（P＜0.05）；實驗組的鹽度為4的羅氏沼蝦攝食時間與實驗組鹽度為6的羅氏沼蝦的差異不顯著（P＞0.05），但與其他實驗組差異顯著（P＜0.05）；實驗組鹽度為8與實驗組鹽度為10的羅氏沼蝦的差異不顯著（P＞0.05），而實驗組鹽度為10與實驗組鹽度為8的羅氏沼蝦攝食時間與鹽度12的羅氏沼蝦的差異不顯著（P＞0.05），說明在實驗組鹽度在4～12范圍內的羅氏沼蝦攝食時間雖然有差異，但變化不大。

圖.2 不同鹽度對羅氏沼蝦攝食時間的影響Fig.2 Effect of different salinity on the feeding time of M.rosenbergii

2.4 不同鹽度條件下對羅氏沼蝦攝食次數的影響

從圖3中可以看出，羅氏沼蝦的攝食次數隨著鹽度的升高而出現顯著的變化（F1,7=363.801，P=0.012）。結果表明，隨著鹽度的增加，羅氏沼蝦的攝食次數呈現顯著降低的趨勢（P＜0.05）。對照組的羅氏沼蝦的攝食次數最多，在1 h的不間斷記錄中，平均一共進行了22.1±1.3次的攝食行為，而鹽度為14的鹽度組攝食次數最少，僅僅進行7.2±1.0次的攝食行為，比對照組的攝食次數減少了67.42%。通過Duncan’s對各組間兩兩比較可知，對照組0鹽度的羅氏沼蝦攝食次數與各實驗組之間的羅氏沼蝦攝食次數均表現為顯著性差異（P＜0.05）；實驗組鹽度2與4之間、4與6之間、8與10之間的羅氏沼蝦攝食次數的差異均不顯著（P＞0.05），但與其他實驗組差異顯著（P＜0.05）；實驗組鹽度12與實驗組鹽度14的羅氏沼蝦攝食次數與其他組的差異均顯著（P＜0.05），說明在羅氏沼蝦在鹽度大于10的條件下，攝食次數會明顯受到影響。

圖.3 不同鹽度對羅氏沼蝦攝食頻次的影響Fig.3 Effect of different salinity on the Feeding frequency of M.rosenbergii

2.5 不同鹽度條件下對羅氏沼蝦運動時間的影響

從圖4中可以看出，羅氏沼蝦的運動時間隨著鹽度的升高而出現顯著的變化（F1,7=632.518，P=0.016）。結果表明，隨著鹽度的增加，羅氏沼蝦的運動時間呈現顯著降低的趨勢（P＜0.05）。對照組的羅氏沼蝦的運動時間最長，在1 h的不間斷記錄中，平均一共運動了24.74±0.41 min，而鹽度為14的鹽度組攝食次數最少，僅僅進行12.04±0.70 min的運動行為，比對照組的運動時間減少了51.33%。通過Duncan’s對各組間兩兩比較可知，對照組0鹽度的羅氏沼蝦運動時間與實驗組鹽度2和4的羅氏沼蝦運動時間之間沒有顯著性差異（P＞0.05），但與實驗組鹽度6～14的羅氏沼蝦運動時間均表現為顯著性差異（P＜0.05）；實驗組鹽度6與4及8之間的羅氏沼蝦運動時間的差異均不顯著（P＞0.05），但與其他實驗組差異顯著（P＜0.05）；實驗組鹽度8～14的羅氏沼蝦運動時間之間差異均不顯著（P＞0.05），但與其他組的差異均顯著（P＜0.05）。說明在羅氏沼蝦在鹽度小于6的條件下，運動時間受到的影響比較小。

圖.4 不同鹽度對羅氏沼蝦運動時間的影響Fig.4 Effect of different salinity on the Locomotion time of M.rosenbergii

3 討論

行為是動物對各種內外部刺激影響下表現出來的外在反應，當外部環境條件發生變化時，機體也就作出相應地調節，保證體內環境的正常生理代謝。動物的行為從其功能可以分為取食行為、生殖行為、領域行為、攻擊和防御行為、社群行為和節律行為[15]。水生動物通過攝食行為來吸收營養物質從而維持機體內環境穩定，攝食行為除了受到內分泌系統、神經內分泌系統等內部因素的影響，同時也受到其他非生物因子的影響，鹽度作為一種非生物因素，其變化對水生生物的行為有著不可分割的影響，水生動物在鹽度脅迫下表現出不同的行為策略。陳翔宇等研究了鹽度對克氏原螯蝦Procambarus clarkii格斗行為及存活率的影響，試驗結果顯示，鹽度為4的試驗組的格斗次數和格斗時間均顯著高于鹽度為12的試驗組和淡水組[16]。張安國等研究表明，文蛤Meretrix meretrix L.個體的潛砂率隨著鹽度的升高逐漸升高，鹽度過高或過低都會對文蛤潛沙行為產生一定的影響，并且文蛤潛砂的最適鹽度為26[17]。馬俊峰對鹽度對刺參Oplopanax elatus Nakai生長和行為的影響研究結果顯示，當刺參在正常32鹽度下活動積極、攝食旺盛，但隨著鹽度增加和降低都使刺參的活動受到影響，變得不活躍，尤其當鹽度下降幅度比較大時，刺參活動很少[18]。劉海映等研究了鹽度對口蝦蛄Oratosquilla oratoria仔蝦攝食、存活和掘穴的影響，發現鹽度為21～33時，口蝦蛄仔蝦攝食較為活躍，而鹽度低于18或高于42時，基本不攝食，同時鹽度突變對口蝦蛄仔蝦掘穴的能力影響比較顯著[19]。穆迎春等在周期性鹽度波動的研究中發現，凡納濱對蝦Litopenaeus vannamei在適宜的鹽度波動范圍內可以促進自身的蛻殼和生長[20]。不同生長期對鹽度的適應性不同，蔡清潔等以1日齡和12日齡大齡溞Daphnia magna Straus為研究對象，研究了1～8鹽度水平對其心率和攝食行為的影響，發現幼齡溞濾水率和攝食率峰值比大齡溞出現得早，說明了大齡溞較幼齡溞對鹽度具有更好的適應性[21]。

本實驗中發現，鹽度水平能影響到羅氏沼蝦的攝食行為，從而對其攝食量產生影響。在鹽度（8～14）相對較高時，羅氏沼蝦行為活動有著明顯地改變（尋食時間明顯增加、攝食次數顯著減少、攝食時間大大縮短及運動時間減少）,直接導致其攝食量地減少，說明隨著鹽度的提高,羅氏沼蝦體內代謝更多的能量供給機體對外界鹽度的抵抗作用,從而影響到個體的攝食行為；表明在一定的鹽度的脅迫下，對其攝食行為的影響比較大,進一步會影響到了其正常的生長發育，這和丁張妮等[22]的研究，鹽度對三疣梭子蟹Portunus trituberculatus攝食行為的影響的研究結果相似。當鹽度逐漸降低時，羅氏沼蝦的運動時間增多，攝食時間增加，攝食量明顯增多；因此，從攝食行為看，羅氏沼蝦的養殖鹽度應不超過8。而在較低鹽度下，羅氏沼蝦的行為無太大差異，表明在較低鹽度對羅氏沼蝦的行為脅迫較小。

另外，通過實驗觀察發現，在低鹽度脅迫下，羅氏沼蝦的蛻皮次數較淡水組明顯減少，而且蛻殼時受到的攻擊頻率也降低，相殘率得到有效控制，說明羅氏沼蝦釆取了減少行為活動的對策來降低能量消耗，從而維持自身正常的生理代謝。因此，在羅氏沼蝦養殖過程中，可以通過調節水體鹽度的方法，在較低鹽度下進行養殖，提高羅氏沼蝦的成活率，提高生產效益。

參考文獻:

[1]堵南山.甲殼動物學：上冊[M].北京:科學出版社,1987:15-30.

[2]史建華,肖 雨,徐琴英,等.羅氏沼蝦引種復壯技術的研究[J].水產科技情報,2001,28(2):64-67.

[3]陳宗永.羅氏沼蝦抱卵親蝦質量差和數量不足的成因與對策探討[J].廣西水產科技,2000(4):26-28.

[4]CRAGGS R J,McAULEY P J,SMITH V J.Wastewater nutrient removal by marine microalgae grown on a corrugated raceway[J].Water Research,1997,31(7)：1 701-1 707.

[5]LING S W.The general biology and development of Macrobrachium rosenbergii[J].Fisheries and Aquaculture Department,1969,5(3):589-606.

[6]趙云龍,堵南山,賴 偉.羅氏沼蝦繁殖習性的研究[J].水產科技情報,1995,22(4):147-149.

[7]姜乃澄,盧建平,周雙平.羅氏沼蝦人工繁殖期的占區與雌雄配對行為的研究[J].東海海洋,1998,16(4):25-29.

[8]朱春華.低鹽度條件下羅氏沼蝦人工育苗試驗[J].水產養殖,2005,26(4):19-22．

[9]陳文靜,熊國根,鄧勇輝,等.羅氏沼蝦生物學研究[J].江西水產科技,2000,27(4):15-19．

[10]LING S W,MEREIAN A B O.Notes on the life and habits of the adults and larval stages of Macrobrachium rosenbergii(de Man)[J].Proe Indo-Pac Fish Coun，1961,9:55-60.

[11]GEORGE M J.Genus Maerobraehium Prawn fisheries of India[J].Bull Cent Mar Fish Res Inst,1969,14:179-216.

[12]LING S W.Methods of rearing and eulturing Maerobrachium rosenbergii(de Man)[J].Fisheries and Aquaculture,1969,57(3):607-619.

[13]SANDIFER P A,HOPKINS J S,SMITH T I J.Observations on salinity tolerance and osmoregulation in laboratory-reared Maerobraehium rosenbergii Post-larve(Costaeea:Caridea)[J].Aquaculture,1975，6:103-114.

[14]劉洪軍,王金山,王進河,等.羅氏沼蝦仔蝦及蚤狀XI期幼體對鹽度突變的適應試驗[J].海洋湖沼通報,1998(1):70-75.

[15]周 曄,周儆才.動物行為的分類[J].生物學通報,1998,33(2):23.

[16]陳翔宇,王陳路,李佳佳,等.鹽度對克氏原螯蝦格斗行為及存活率的影響[J].水產科技情報,2013,40(3):126-130.

[17]張安國,袁秀堂,楊鳳影,等.溫度、鹽度及底質對文蛤潛砂行為的影響[J].生態學雜志,2015,34(6):1 595-1 601.

[18]吳旭干,趙亞婷,何 杰,等.低鹽度海水和淡水對中華絨螯蟹性腺發育及交配行為的影響[J].動物學雜志,2013,28(4):555-561.

[19]劉海映,張 嵩,刑 坤,等.鹽度對口蝦蛄仔蝦攝食、存活和掘穴的影響[J].海洋科學,2016,40(11):121-128.

[20]穆迎春,王 芳,董雙林,等.不同鹽度波動幅度對中國明對蝦稚蝦蛻皮和生長的影響[J].海洋學報:中文版,2005,27(2):122-126.

[21]蔡清潔,何文輝,彭自然,等.pH和鹽度對大型溞心率和攝食行為的影響[J].上海海洋大學學報,2017,26(3):415-421.

[22]丁張妮,徐永健,林建華,等.鹽度對三疣梭子蟹攝食行為及生長特性的影響[J].生態科學,2014,33(5):899-903.