臨床197株流感嗜血桿菌的分布及耐藥性分析

楊小蘭，劉偉陽，孫增輝

(惠州市第三人民醫院 檢驗科，廣東 惠州516002)

流感嗜血桿菌(HI)為革蘭氏陰性桿菌、無動力、兼性厭氧。主要引起呼吸系統感染，部分菌株也可發生侵襲性感染導致敗血癥、蜂窩組織炎、腦膜炎、骨髓炎等[1]，易感人群以兒童多見[2]。隨著抗生素的廣泛應用，流感嗜血桿菌的耐藥也較為常見，細菌耐藥性檢測分析作為指導臨床合理用藥的前提尤為重要。回顧性研究分析了我院2016年7月-2017年6月從住院患者送檢標本中分離出的197株流感嗜血桿菌的分布情況及其耐藥特點，旨在為臨床抗生素的合理使用提供一定的指導價值。

1 資料與方法

1.1 菌株來源

197株流感嗜血桿菌均分離于我院2016年7月-2017年6月期間的住院患者送檢標本，剔除同一患者單次入院不同時間標本分離出的相同菌株。

1.2 研究方法

統計分析197株流感嗜血桿菌感染患者的基本資料，包括年齡、入院季節、科室、標本類型，研究流感嗜血桿菌在不同年齡、入院季節、科室、標本類型的分布情況，并統計分析流感嗜血桿菌對氨芐西林、氨芐西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、亞胺培南、美羅培南、頭孢呋辛、頭孢他啶、頭孢曲松、頭孢噻肟、氨曲南、環丙沙星、左氧氟沙星、氯霉素、阿奇霉素、復方新諾明等15種抗生素的耐藥情況。

1.3 細菌培養及鑒定

痰液、腦脊液、血標本的接種嚴格遵循《全國臨床檢驗操作規程》(第3版)進行操作，同時用哥倫比亞血平板、梅里埃嗜血巧克力平板(含萬古霉素)接種，5%-10%CO2環境下，37℃孵育18-24 h，挑取無色或灰白色、透明、濕潤的疑似菌落行衛星試驗進行初步鑒定，衛星試驗使用廣州迪景血平板、江門凱林營養瓊脂平板，采用購自美國OXOID公司的Ⅴ、Ⅹ、Ⅹ+Ⅴ因子紙片輔助鑒定，同時采用VITEK2 compact全自動微生物分析儀行明確鑒定。

1.4 藥敏試驗

流感嗜血桿菌的藥敏試驗采用紙片擴散法(K-B法)，挑取分純后的單個菌落配置成0.5麥氏度的流感嗜血桿菌菌懸液均勻涂布于嗜血巧克力平板上，粘貼藥敏紙片后置于5%-10%CO2環境下，35℃孵育18-24 h，測量抑菌圈直徑，遵循美國臨床實驗室標準化協會(CLSI)標準進行判讀。藥敏紙片購自于溫州康泰藥物有限公司，并采用衛生部臨檢中心的流感嗜血桿菌(ATCC49247),金黃色葡萄球菌(ATCC25923)作為質控菌株。

1.5 統計學分析

應用軟件WHONET 5.6進行藥敏分析，統計各抗生素敏感率、中介率、耐藥率的情況，流感嗜血桿菌的分布比較采用卡方檢驗分析比較，數據處理采用SPSS19.0處理，以P<0.05有統計學意義。

2 結果

2.1 197株流感嗜血桿菌各種分布情況 流感嗜血桿菌按年齡、季節、科室、標本類型分布經卡方檢驗分析比較均有統計學差異(P<0.05)。

2.1.1197株流感嗜血桿菌的年齡段分布見表1。年齡分布流感嗜血桿菌以兒童檢出率(51.27%)較高，其次為老年患者。

表1 197株流感嗜血桿菌的年齡段分布

2.1.2197株流感嗜血桿菌感染的季節分布見表2。流感嗜血桿菌感染與季節存在聯系，以冬、春季為感染高發期。

表2 197株流感嗜血桿菌感染的季節分布

2.1.3197株流感嗜血桿菌感染的科室分布見表3。科室分布以兒科(50.25%)占比最高，其次為ICU(23.35%)。

表3 197株流感嗜血桿菌感染的科室分布

2.1.4197株流感嗜血桿菌感染的標本分布見表4。流感嗜血桿菌檢出以痰液為主(占95.94%)。

表4 197株流感嗜血桿菌感染的標本分布

2.2 197株流感嗜血桿菌藥敏分析

197株流感嗜血桿菌藥敏分析見表5。197株流感嗜血桿菌對15種抗生物表現出不同的耐藥性，其中以復方新諾明(61.42%)、氨芐西林(54.31%)較高，哌拉西林/他唑巴坦、亞胺培南、美羅培南、三代頭孢(頭孢他啶、頭孢曲松、頭孢噻肟等)均敏感性較高。

表5 197株流感嗜血桿菌藥敏分析(n%)

3 討論

流感嗜血桿菌屬嗜血桿菌屬，為條件致病菌，常定植于人類鼻咽部，以飛沫傳播最為多見。對嬰幼兒致病性較強，本研究中，0-14歲年齡段流感嗜血桿菌感染占51.27%，其次為60歲以上老年患者，占29.95%，兩年齡段患者共同生理特點為免疫力低下。相關研究報道顯示[3-5]：免疫功能低下、紊亂是正常菌群易感的高危因素。其對于嬰幼兒尤其2歲以下，因機體免疫系統發育尚未完善，機體特異性抗體水平低下，流感嗜血桿菌易在呼吸道發生定植也是嬰幼兒易發生呼吸道感染的重要原因[6]。目前，因流感嗜血桿菌感染導致的嬰幼兒肺炎尚未引起臨床診療的足夠重視[7]，但該年齡段患兒表現的病癥也相對較重，尤其流感嗜血桿菌腦膜炎的發生，易留下多種后遺癥，嚴重損傷患兒的生活質量。流感嗜血桿菌的致病性源于其內毒素、菌毛及多糖夾膜毒性，尤其后者易引起腦膜炎、會厭炎、膿胸、菌血癥等嚴重的疾病[8]。嬰幼兒肺炎流感嗜血桿菌的檢出并不少見，表現多為支氣管肺炎、節段性肺炎，部分可表現為大葉性肺炎。有研究顯示[9,10]：流感嗜血桿菌在新生兒肺炎的致病菌中排第5位。國外流感嗜血桿菌導致的新生兒肺炎將近1.6-4.9/1000，約占侵入性細菌感染的5%，多繼發于病毒感染及免疫力低下。流感嗜血桿菌感染有一定的季節性特點，本地區流感嗜血桿菌的季節性分布以冬春季為主，與國內一些研究相符[11,12]。科室分布以兒科及ICU多見，兩科室患者符合上述免疫力低下特點，ICU重癥患者多活動受限，長期臥床呼吸道缺乏自潔能力，自身抵抗力低下易發生致病菌的院內感染。

致病菌的耐藥性多與臨床抗生素的不合理應用關系密切，本研究數據顯示：197株流感嗜血桿菌對15種抗生素表現出不同的耐藥性，其中以復方新諾明(61.42%)、氨芐西林(54.31%)較高，哌拉西林/他唑巴坦、亞胺培南、美羅培南、三代頭孢(頭孢他啶、頭孢曲松、頭孢噻肟等)均敏感性較高。在經驗性用藥中氨芐西林為流感嗜血桿菌感染的首選藥物[13]，但多地區的研究報道氨芐西林對流感嗜血桿菌耐藥正日趨嚴重，在世界范圍內氨芐西林對流感嗜血桿菌耐藥高達16.6%，我國則高達41.4%[14，15]。本研究數據氨芐西林的耐藥高于全國的平均水平，提示氨芐西林耐藥嚴重已不適合流感嗜血桿菌感染的治療。流感嗜血桿菌對于氨芐西林的耐藥機制主要源于部分菌株β內酰胺酶的產生。β內酰胺酶可水解抗生素的β內酰胺環，導致抗生素失活。臨床部分輕中度感染提倡應用2代頭孢類抗生素，重癥患者建議選用4代頭孢菌素或碳青霉烯類[16]，但本研究數據提示頭孢呋辛在流感嗜血桿菌感染治療上也產生一定程度的耐藥，值得引起臨床的關注。復方新諾明的耐藥率最高達61.42%，高于50%的耐藥率的抗生素應避免應用于臨床的治療。細菌的耐藥地區性特點較為突出，這主要與當地的醫務工作者經驗用藥習慣相關。

綜上所述，流感嗜血桿菌為引起呼吸道感染的重要病原體，以嬰幼兒多見，藥敏試驗為抗生素應用的前提，根據藥敏分析數據合理應用抗生素不僅有利于療效的提高，更有利于臨床耐藥菌株的減少。

作者簡介：楊小蘭(1973-)，女，副主任檢驗師，研究方向：臨床微生物檢驗。

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