老年斑人群APP、Aβ、NOX和SOD檢測及意義

林 花,楊 清,黃 晶*

(1.吉林大學第一醫院 檢驗科;2.吉林大學第一醫院二部 輸血科,吉林 長春130021)

老年斑是人體內臟衰老的象征，是人體老化的重要標志，也是皮膚老化的顯著特征。目前認為，進入老年以后，細胞代謝機能減退，體內脂肪容易發生氧化，產生一種叫做脂褐質的極微小棕色顆粒堆積在皮膚的基底層細胞中，衰老的組織細胞失去應有的分解和排異功能，導致超量的棕色顆粒堆積在局部細胞基底層內，以及老年體內具有抗過氧化作用的SOD的活力降低了，自由基也就相對增加了，自由基及其誘導的過氧化反應長期毒害機體，從而在人體表面形成老年斑[1]。目前關于老年斑形成及病理損傷確切機制仍不清楚，相關的實驗研究方面的報道較少，本文通過對老年斑人群APP、Aβ、NOX和SOD的檢測，探討其在老年斑發生、發展中的意義。

1 資料與方法

1.1研究對象為我院2015年5月至2017年9月的住院和門診患者，215例研究對象均經臨床依據美國精神病協會精神障礙診斷和統計手冊第五版(DSM-V)排除患有老年癡呆癥[2]，其中男158例，女57例，平均年齡(68.5±6.6)歲。對照組120例，為我院體檢中心健康體檢者，男70例，女50例，平均年齡(66.8±5.6)歲。

1.2方法樣本采集，所有研究對象均為早上空腹采血5 ml，37℃水浴15 min， 3 000 r/min離心15 min，取測定APP、Aβ和NOX的樣本上清液置于-70℃凍存待檢。采用ELISA法檢測215例老年斑患者和120例正常對照組血清APP、Aβ和NOX含量，試劑盒分別由北京寶日醫生物技術有限公司和上海嵐派生物科技有限公司提供。測定SOD的樣本，在血清分離后4 h內，采用Olympus5400全自動生化分析儀檢測，試劑由福建福緣生物科技有限公司提供，定標液及指控隨試劑盒提供，嚴格按說明書操作。

2 結果

215例老年斑患者APP、Aβ和NOX水平明顯高于對照組(P<0.01，P<0.05)，SOD水平明顯低于對照組(P<0.05)。見表1。

表1 215例老年斑患者APP、Aβ、NOX和SOD水平

3 討論

老年斑是脂褐素沉積于皮膚表面形成的，在老年人中僅占27%，是脂褐素引發的特殊的老年色素性皮膚病，脂褐素是細胞氧化后的產物，自由基作用的結果，一旦聚集過多便影響臟器功能[3]。APP在機體細胞廣泛表達，病理情況下，其裂解后形成的Aβ寡聚體異常增多和沉積，是形成老年斑的直接原因[4]。NOX是細胞內一組具有氧化活性的蛋白，是許多非吞噬細胞中活性氧(ROS)的重要來源，而ROS的異常增加，可導致氧化應激和抗氧化防御間平衡失調，發生脂質過氧化損傷[5]。SOD是廣泛分布于組織細胞內的金屬蛋白酶，它對平衡機體氧化與抗氧化系統，免除自由基損傷起著至關重要的作用[6]。

APP在各種組織中廣泛存在，是一種具有膜受體樣結構的單次跨膜糖蛋白，在神經元細胞上主要位于突觸。APP的表達量受細胞生長狀態和生理環境的影響，APP的磷酸化和它的功能息息相關，APP磷酸化影響它的亞細胞定位，參與細胞黏附、神經營養、細胞信號通路調節等，目前研究發現，APP在神經系統的發育中扮演重要角色，這種作用通過和接頭蛋白或黏附分子相互結合實現的，同時體內有許多因素可導致APP的代謝和功能紊亂，APP剪切形成的老年斑是老年癡呆發生的主要原因。

Aβ是由 APP 經 β-和γ-分泌酶水解產生的，并集中表達于神經元突觸部位。由APP水解產生的Aβ，在正常情況下產生和降解保持平衡[7]。近年來研究顯示，糖、脂代謝異常，通過干擾細胞信號轉導，上調了APP的淀粉樣代謝途徑，導致Aβ寡聚體異常增多和沉積，形成老年斑[8]。研究證實，Aβ通過其神經毒性作用能引起神經元的凋亡，Aβ誘導的神經元退行性變與老年癡呆的病理改變十分相似[9]。Aβ在大腦中的過量生成和積聚、沉積可引起神經元鈣穩態失衡，自由基大量產生，激活炎性因子，誘導ROS大量產生，引起細胞氧化應激反應，增加細胞易損性，從而增加了細胞凋亡的發生，是老年癡呆發生的重要原因[10]。

NOX是細胞內一組具有氧化活性的蛋白，生理情況下，處于低表達、低活性狀態，通過產生ROS作為信號分子參與了細胞分化、增殖、凋亡等的調節。但在病理情況下，如炎性因子、高糖、高脂等因素作用下，NOX能夠迅速活化產生過量的ROS，引起的氧化壓力會誘導機體多種疾病的發生、發展。高水平的ROS能導致氧化應激和抗氧化失衡，引起生物膜和大分子物質發生脂質過氧化損傷， ROS可以通過損傷DNA、類脂和蛋白，或通過介導激活信號通路誘導細胞凋亡，NOX的異常表達和激活與老年癡呆的發生密切相關[11,12]。

SOD是廣泛分布組織細胞內的催化超氧化物，通過歧化反應轉化為氧氣和過氧化氫的金屬酶。其主要作用是清除體內自由基，與體內自由基呈負相關，是體內重要的抗氧化劑，它對平衡機體氧化與抗氧化系統，免除自由基損傷起著至關重要的作用[13]。

本實驗結果顯示，老年斑患者APP、Aβ和NOX水平明顯高于對照組，SOD水平明顯低于對照組。說明老年斑人群存在著上調APP代謝的機體內環境因素和Aβ的產生與降解平衡失調。同時也存在NOX激活因素和體內自由基的產生與清除平衡失調。說明老年斑人群具有進一步發生啟動Aβ級聯反應、蛋白異常磷酸化、氧化應激、線粒體損傷、神經元凋亡和神經纖維纏結的可能，存在發生老年癡呆的高風險因素。所以APP、Aβ、NOX和SOD與老年斑形成密切相關，動態檢測四項指標，對判斷疾病進展和預后評估有重要意義。

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