CD10在良性纖維組織細胞瘤中的表達及鑒別診斷價值

胡桂明，陳慧萍，馮怡錕，吳會芳，付文靜，張 敏，任景麗

1)鄭州大學第二附屬醫院病理科 鄭州 450014 2)鄭州市婦幼保健院病理科 鄭州 450014

良性纖維組織細胞瘤(benign fibrous histiocytoma，BFH)是皮膚最常見的間葉源性腫瘤，可發生于真皮及深部組織。腫瘤主要由比例不等的卵圓形或短梭形纖維母/肌纖維母細胞樣細胞組成，呈短交織狀或席紋狀排列，在組織形態上易與隆突性皮纖維肉瘤(dermatofibrosarcoma protuberans，DFSP)混淆。常用于BFH診斷的抗體有CD68和SMA，但特異性均較低。CD34作為DFSP的診斷性抗體已廣泛應用于臨床工作中，但特異性不高。2000年Kanitakis等[1]在研究CD10在皮膚間葉性腫瘤中的表達情況時，發現CD10在真皮纖維瘤(dermatofibromas，DF)中有較高表達(92.6%，25/27)，2006年Lee等[2]也有類似報道，迄今為止，國內尚無相關文獻報道。我們通過分析CD10在BFH和DFSP中的表達情況，并比較其與CD68及SMA的表達特征之間的差異，探討CD10在BFH診斷和鑒別診斷中的應用價值。

1 材料與方法

1.1材料收集鄭州大學第二附屬醫院病理科2012至2017年的BFH手術標本80例，按照軟組織腫瘤病理學分類[3]：DF 49例、富于細胞性纖維組織細胞瘤(cellular fibrous histiocytoma, CFH)13例、非典型性纖維組織細胞瘤(atypical fibrous histiocytoma，AFH)12例及脂質化型纖維組織細胞瘤(lipidized fibrous histiocytoma, LFH)6例。另選取50例DFSP為對照。所有病例均由兩位高年資病理醫生審核。

1.2兩種組織中CD10、CD68、SMA及CD34蛋白表達檢測BFH和DFSP標本經體積分數3.7% 中性甲醛固定，常規取材，脫水處理，石蠟包埋，4 μm厚切片，常規HE染色，光鏡下觀察。免疫組織化學染色采用EnVision二步法， DAB顯色。所用一抗：CD10(56C6)和 CD34(QBEnd/10)按1100稀釋，CD68(PG-M)和SMA(1A4)按1150稀釋，所有抗體及試劑盒均購自上?；蚩萍忌镉邢薰?。以每種抗體說明書中推薦的已知陽性切片作為陽性對照，以PBS代替一抗作為空白對照。按試劑說明書進行操作。CD10、CD68及SMA陽性信號均定位于胞質，CD34陽性信號定位于胞膜。免疫組織化學染色判讀方法：陰性指無細胞著色或≤5%腫瘤細胞染成棕黃色；局灶陽性指6%～腫瘤細胞染成棕黃色；部分陽性指26%～50%腫瘤細胞染成棕黃色；彌漫陽性指>50%腫瘤細胞染成棕黃色。

1.3統計學處理采用SPSS 22.0處理數據，采用χ2檢驗比較兩種組織中CD10在CD68、SMA及CD34蛋白陽性表達率的差異， 檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1BFH與DFSP組織中CD10、CD68、SMA及CD34蛋白的表達CD10在BFH及DFSP中的表達見圖1，CD34、CD68、SMA蛋白在BFH與DFSP組織中的表達見圖2。CD10在DF、CFH、AFH及LFH中的陽性表達率分別為85.7%(42/49)、84.6%(11/13)、75.0%(9/12)和100%(6/6)，且多為彌漫強陽性表達；4種類型的BFH中CD10的表達差異無統計學意義(P=0.636)。CD10在DFSP中多呈局灶陽性或部分陽性表達。CD34在BFH中表現為部分或局灶陽性表達，而在DFSP中為彌漫強陽性表達。BFH與DFSP組織中CD68及SMA的陽性表達率差異無統計學意義；BFH組織中CD10陽性表達率高于DFSP，CD34陽性表達率低于DFSP。見表1。

2.2 4種蛋白診斷BFH的靈敏度與特異度CD10、CD68、SMA和CD34在BFH診斷中的靈敏度與特異度見表2，在BFH的診斷中，CD10的靈敏度與特異度明顯高于CD68、SMA和CD34。

A、B、C、D：分別為CD10在DF、AFH、CFH及LFH中呈彌漫陽性表達；E:CD10在DFSP中陰性表達圖1 BFH及DFSP組織中CD10蛋白的表達(EnVision法，×200)

A1、A2：分別為CD68在BFH和DFSP中陽性表達；B1：SMA在BFH中局灶性陽性表達；B2：SMA在BFH中陰性表達；C1：CD34在BFH中部分陰性表達；C2：CD34在DFSP中彌漫強陽性表達圖2 BFH與DFSP組織中CD68、SMA及CD34蛋白的表達(EnVision法，×200)

表1 BFH和DFSP中4種蛋白表達的比較例(%)

表2 CD10、CD68、SMA及CD34在BFH診斷中的靈敏度和特異度 %

3 討論

BFH好發于20～40歲成人，是最常見的皮膚良性腫瘤，形態學亞型包括DF、CFH、AFH、LFH、動脈瘤樣纖維組織細胞瘤等[3]。DFSP是一種好發于20～50歲中青年的皮膚交界性腫瘤，生物學行為呈低度惡性，此類腫瘤切除后容易復發，甚至發生遠處轉移[4]。組織學形態上BFH與DFSP均可表現為短梭形細胞，呈交織狀、席紋狀或束狀排列，單純從形態上有時較難準確區分，往往需借助免疫組織化學染色鑒別。

目前常用的免疫組織化學抗體有CD68、SMA、CD163等，但這些抗體的敏感性與特異性均較差，在鑒別診斷中有30%～50%的交叉反應。任曉冰等[5]對72例DFSP進行免疫組織化學染色發現，CD34在DFSP中陽性率為87%。CD34目前廣泛用于DFSP的診斷與鑒別診斷中，但其特異性不高，也可表達于部分BFH中。Kim等[6]發現ST3在DF與DFSP鑒別中有較高敏感性。Mori等[7]研究發現Nestin能表達于94%的DFSP，而在DF中只有13%的病例表達。Bandarchi等[8]建議使用D2-40鑒別DFSP與DF。金建強等[9]運用免疫組化及Western blot檢測發現MMP-11(stromelysin-3)可作為鑒別診斷DFSP和DF的新型標記物。近年來又有學者推薦使用Cathepsin K、Cthrc1及CD99等用于兩者的鑒別診斷[10-12]，但由于這些抗體在臨床使用過程中交叉反應過多、敏感性與特異性差等原因，仍不能廣泛應用于臨床。因此需要尋找一種更高靈敏度和特異度的標志物，用于BFH的診斷和鑒別診斷。

CD10是一種細胞表面中性肽鏈內切酶，又被稱為普通急性淋巴母細胞性白血病表面抗原[13]，是一個相對分子質量為90 000～110 000的細胞表面鋅依賴性金屬蛋白酶[14]。文獻[15]報道CD10表達于很多種類型的淋巴造血腫瘤細胞，也廣泛應用于非淋巴造血疾病的診斷與鑒別診斷。2006年Lee等[2]發現CD10能表達于真皮內的毛囊鞘細胞及特化的間質細胞，隨后Lee等[16]研究又發現CD10能表達于DF中，并有較高的靈敏度與特異度，迄今為止，目前國內外尚無其他文獻報道。

我們應用免疫組織化學方法檢測了CD10、CD68和SMA在80例BFH及50例DFSP組織中的表達情況，結果顯示CD10在BFH組織中的陽性表達率為85.0%，且多為彌漫陽性表達，在DFSP中陽性率為16.0%，且多為局灶陽性表達；CD10在BFH中的陽性表達率高于DFSP；CD10在BFH的診斷與鑒別診斷中有較高的靈敏度與特異度，高于BFH的傳統標記物CD68和SMA。此外，CD10在4種不同類型的BFH中的表達差異無統計學意義。

CD34被廣泛應用于DFSP的診斷與鑒別診斷，具有較高的靈敏度與特異度[17]。本組80例BFH中有28.8%(23/80)局灶或部分表達CD34，加之BFH與DFSP在形態上有一定重疊，容易誤診為DFSP。在CD34陽性的23例BFH中，有22例彌漫表達CD10，因此，聯合應用CD10與CD34在DFSP與BFH的鑒別診斷中有較大價值。

綜上所述，CD10在BFH的診斷與鑒別診斷中具有較高的靈敏度與特異度，可作為BFH的一個有用標志物。

[1] KANITAKIS J,BOURCHANY D,CLAUDY A.Expression of the CD10 antigen(neutral endopeptidase) by mesenchymal tumors of the skin[J].Anticancer Res,2000,20(5B):3539

[2] LEE KJ,KIM WS,LEE JH,et al.CD10, a marker for specialized mesenchymal cells(onychofibroblasts) in the nail unit[J].J Dermatol Sci,2006,42(1):65

[3] 王堅,朱雄增.軟組織腫瘤病理學[M].2版.北京:人民衛生出版社,2017:425

[4] ACOSTA AE,VéLEZ CS.Dermatofibrosarcoma protuberans[J].Curr Treat Options Oncol,2017,18(9):56

[5] 任曉冰,王堅,沈磊,等.隆突性皮膚纖維肉瘤72例臨床病理學觀察[J].臨床與實驗病理學雜志,2003,19(1):35

[6] KIM HJ,LEE JY,KIM SH,et al.Stromelysin-3 expression in the differential diagnosis of dermatofibroma and dermatofibrosarcoma protuberans: comparison with factora and CD34[J].Br J Dermatol,2007,157(2):319

[7] MORI T,MISAGO N,YAMAMOTO O,et al.Expression of nestin in dermatofibrosarcoma protuberans in comparison to dermatofibroma[J].J Dermatol,2008,35(7):419

[8] BANDARCHI B,MA L,MARGINEAN C,et al.D2-40, a novel immunohistochemical marker in differentiating dermatofibroma from dermatofibrosarcoma protuberans[J].Mod Pathol,2010,23(3):434

[9] 金建強,范欽和,鄭亮,等.隆突性皮膚纖維肉瘤和纖維組織細胞瘤中MMP-11的表達及意義[J].臨床與實驗病理學雜志,2009,25(3):278

[10]YAN X,TAKAHARA M,XIE L,et al.Cathepsin K expression: a useful marker for the differential diagnosis of dermatofibroma and dermatofibrosarcoma protuberans[J].Histopathology,2010,57(3):486

[11]WANG L,XIANG YN,ZHANG YH,et al.Collagen triple helix repeat containing-1 in the differential diagnosis of dermatofibrosarcoma protuberans and dermatofibroma[J].Br J Dermatol,2011,164(1):135

[12]KAZLOUSKAYA V,MALHOTRA S,KABIGTING FD,et al.CD99 expression in dermatofibrosarcoma protuberans and dermatofibroma[J].Am J Dermatopathol,2014,36(5):392

[13]LEBIEN TW,MCCORMACK RT.The common acute lymphoblastic leukemia antigen(CD10)--emancipation from a functional enigma[J].Blood,1989,73(3):625

[14]SHIPP MA,LOOK AT.Hematopoietic differentiation antigens that are membrane-associated enzymes: cutting is the key![J].Blood,1993,82(4):1052

[15]劉蕓,廖曉龍.CD10分子的研究進展及臨床應用[J].國際免疫學雜志,2014,37(5):363

[16]LEE KJ,YANG JM,LEE ES,et al.CD10 is expressed in dermatofibromas[J].Br J Dermatol,2006,155(3):632

[17]LLOMBART B,SERRA-GUILLéN C,RUBIO L,et al.Subcutaneous dermatofibrosarcoma protuberans, a rare subtype with predilection for the head:a retrospective series of 18 cases[J].J Am Acad Dermatol,2017,77(3):503