CTRP1在急性缺血性腦卒中患者中的表達及其對晚期神經功能缺損嚴重程度的預測

李素萍 謝彥 許飛 梁益 何保明 孫紅斌

四川省醫院科學院·四川省人民醫院神經內科（成都 610073）

《中國心血管病報告2017》概要指出迄今我國心血管病患病人數達2.9億，其中腦卒中1 300萬人次，且每年約新增200萬人次［1］。一項關于我國卒中疾病負擔的橫斷面研究顯示2013年我國大陸腦卒中發病率、患病率、病死率分別為246.8/10萬、1 114.8/10萬、114.8/10萬，其中農村居民發病率（298.2/10萬）顯著高于城市居民（203.6/10萬）。而急性缺血性腦卒中（acute ischemic stroke，AIS）是卒中的主要類型，約占60%～80%，據統計本病再次出現卒中的風險是普通人的10倍［2-3］，5年累計復發率超過30%。研究證實炎癥反應參與腦卒中的發生發展過程，并且與疾病的嚴重程度和預后具有相關性。補體C1q腫瘤壞死因子相關蛋白（C1q tumor necrosis factor related protein，CTRP1）是近年來新發現的脂肪細胞因子，參與機體炎癥、血栓及氧化過程［4］。相關研究發現CTRP1可降低血糖、增加胰島素敏感性、調節血脂、對抗動脈粥樣硬化［5］。目前血清CTRP1在冠心病領域研究較多，尚缺乏CTRP1與AIS神經功能損傷嚴重程度和預后的相關性研究。本課題旨在探討CTRP1與AIS患者中的表達及其對晚期神經功能缺損嚴重程度的預測價值。為早期識別AIS患者潛在風險提供新的依據。

1 對象與方法

1.1 研究對象本研究連續性納入2014年2月至2017年2月由我院急診收入接受治療的首發AIS患者425例作為研究對象，進行前瞻性研究。選取同期在我院健康體檢成人403例作為對照組。納入標準：（1）參照《中國急性缺血性腦卒中診治指南2010》，明確診斷首次發生AIS患者［6］；（2）發病2周以內。排除標準：（1）已接受溶栓治療患者；（2）凝血功能障礙、嚴重肝腎功能障礙、腫瘤、血液病患者；（3）合并腦出血患者；（4）免疫系統疾病患者；（5）年齡≤35歲。

1.2 方法

1.2.1 一般資料及實驗室指標檢測完善所有對象的一般臨床資料，記錄包括性別、年齡、個人史、既往病史等。研究對象空腹采集靜脈血，采用全自動生化儀對超敏C反應蛋白（hypersensitivity C reactive protein，Hs-CRP）、總膽固醇（cholesterol，TC）、三酰甘油（triglyceride，TG）、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）進行檢測。

所有對象血液凝固后進行高速離心，溫度設置為4℃，轉速3 500 r/min離心10 min提取上清液置入EP管中，保存于-80℃冰箱內。采用雙抗體夾心酶聯免疫法（ELISA）對血清CTRP1水平進行檢測。試劑盒由AVISCERA BIOSCIENCE公司提供，所有步驟嚴格按說明書操作。

1.2.2 隨訪對研究對象出院后分別于1、3、6個月進行門診隨訪，如未按時就診，則采用電話隨訪。對出院后6個月患者采用美國國立衛生研究院卒中量表（National Institute of Health Stroke Scale，NIHSS）進行評估，根據分值進行分組。1～4分為輕微中風，5～20分為中度中風，＞20分為重度中風。

1.3 統計學方法采用SPSS 20.0統計軟件進行統計學分析。計量資料用均數±標準差表示，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗；3組及3組以上的比較采用方差分析（正態分布）和秩和檢驗（非正態分布）。計數資料用百分率表示，組間比較采用χ2檢驗；相關性采用Pearson相關分析法分析CTRP1的相關因素；采用多元線性回歸分析出院后6個月神經功能缺損程度獨立影響因素。以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 4組基線情況比較AIS患者糖尿病、頸動脈粥樣硬化、Hs-CRP、TC、TG、CTRP1水平均高于對照組，差異具有統計學意義（均P＜0.05）；對照組血清HDL-C水平高于AIS患者，差異具有統計學意義（P＜0.05）；其余指標差異無統計學意義。見表1。

表1 對照組和AIS組患者基線情況比較Tab.1 Comparison of baseline cases between the control group and the AIS group ±s

表1 對照組和AIS組患者基線情況比較Tab.1 Comparison of baseline cases between the control group and the AIS group ±s

項目χ2/t值P值男性［例（%）］年齡（歲）BMI（kg/m2）吸煙［例（%）］糖尿?。劾?）］高血壓?。劾?）］頸動脈粥樣硬化［例（%）］Hs-CRP（mg/L）TC（mmol/L）TG（mmol/L）LDL-C（mmol/L）HDL-C（mmol/L）CTRP1（ng/mL）對照組（n=403）211（52.4）64.78±12.93 23.5±3.1 123（30.5）125（31.0）142（35.2）114（28.3）0.45±0.21 3.97±0.62 1.81±0.52 2.92±0.87 1.45±0.42 149.29±20.96 AIS組（n=452）270（59.7）65.34±4.57 24.7±2.9 137（30.3）196（43.4）188（41.6）174（38.5）0.67±0.27 4.74±1.13 2.21±0.46 3.15±0.91 1.34±0.36 157.37±23.26 3.395 0.862 5.846 0.004 13.848 3.633 9.938 13.180 9.780 11.93 3.766 4.123 5.311 0.065 0.389 0.168 0.947＜0.001 0.057 0.002＜0.001＜0.001 0.011 4 0.355 8 0.001 5 0.032 6

2.2 不同亞型腦卒中患者CTRP1表達水平對照組［（119.53± 17.62）ng/mL，n=403］、不明原因及其他原因型腦卒中［（145.81±18.96）ng/mL，n=196］、大動脈粥樣硬化型腦卒中［（153.17±19.21）ng/mL，n=76］、心源型腦卒中［（156.56±20.96）ng/mL，n=43］和小動脈閉塞型腦卒中［（169.23± 22.34）ng/mL，n=137］的CTRP1表達水平逐漸升高，并且差異具有統計學意義（F=216.9，P＜0.001）。

2.3 不同神經功能缺損患者血清CTRP1水平比較對照組［（119.53±17.62）ng/mL］、神經功能缺損輕度組［（156.29±19.86）ng/mL］、中度組［（168.74±18.53）ng/mL］和重度組［（175.96±19.15）ng/mL］患者血清CTRP1水平逐漸上升，差異具有統計學意義（P＜0.001）。

2.4 CTRP1相關性分析患者血清CTRP1與Hs-CRP、LDL-C呈正相關，與NIHSS評分呈負相關關系，與BMI、TC、TG、HDL-C無明顯的相關性。見表2。

表2 血清CTRP1水平的相關性分析Tab.2 Correlation analysis of serum CTRP1 level in patients with AIS

2.5 AIS患者NIHSS評分的影響因素經多因素線性回歸分析顯示，CTRP1、年齡、糖尿病、Hs-CRP、LDL-C為NIHSS評分的獨立影響因素。見表3。

表3 多因素線性回歸分析AIS患者NIHSS評分的影響獨立因素Tab.3 Multiple factor linear regression analysis of the influence of independent factors on NIHSS score in patients with AIS

3 討論

AIS是神經內科急危重癥，具有較高的死亡率、復發率，且短期內常伴發多種并發癥［7］，據統計每年全球約600萬人死于腦卒中［8］，幸存者中約75%患者遺留有不同程度的肢體功能障礙。雖然診療技術不斷提高，但由于腦組織對缺血缺氧異常敏感，且其在缺血缺氧狀態下代償能力較其他組織弱，血供中斷5 min便會出現不可逆的損傷，因此盡早對疾病預后進行評估，對采用個體化治療的患者尤為重要。

研究發現，炎癥反應是缺血事件發生和發展過程中重要的病理生理過程［9-10］。脂肪細胞作為重要的內分泌器官，其分泌的脂聯素參與機體的物質代謝及炎癥反應［11］，具有抗炎、拮抗動脈粥樣硬化、降低血糖等作用。CTRP1是新近發現的細胞因子，其結構與脂聯素相似，但兩者缺乏高度同源的核苷酸和氨基酸序列。CTRP1 mRNA在心臟、肝臟、腎臟、卵巢中均有表達，其在脂肪組織中表達最高。研究發現代謝紊亂、慢性炎癥等均是動脈粥樣硬化的危險因素。動物實驗發現敲除脂聯素基因的小鼠血漿CTRP1水平明顯高于空白對照組，且其血糖水平低于對照組［12］，并且CTRP1的過度表達可以提高肥胖老鼠胰島素的敏感性，同時重注射CTRP1組加強腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）信號轉導從而增加脂肪酸氧化代謝［13］。CTRP1還通過P38分裂原激活蛋白激酶（MAPK）信號通路，誘導動脈粥樣硬化斑塊中黏附分子及巨噬細胞表達，在腫瘤壞死因子α的刺激下誘發更為嚴重的炎癥反應。LU等［14］研究發現，apoE基因小鼠通過腹腔注射CTRP1可促進動脈粥樣硬化的發生，而CTPR1/apoE小鼠其動脈粥樣硬化發生的范圍、嚴重程度及炎癥反應均降低。CTRP1還可旁分泌和自分泌途徑促進血管平滑肌增殖［11，15］以及 ERK1/2 通路的激活促進血管壁鈣化［12，16］。目前尚無研究對CTRP1在腦卒中患者中的表達和神經功能預后進行研究。本研究中首次檢測CTRP1在不同類型腦卒中患者血漿中的表達，發現和動脈粥樣硬化相關腦卒中的表達水平明顯低于其他類型腦卒中，說明CTRP1可能通過對動脈粥樣硬化的作用參與腦卒中的發生發展，抑制動脈粥樣硬化，抑制巨噬細胞炎癥反應，從而實現腦保護。本研究中患者CTRP1和炎癥標志物hs-CRP呈現負相關關系，說明該標志物可能在腦卒中患者中具有一定的抗炎作用，hs-CRP和腦卒中預后明顯相關［17］。患者病情越嚴重，可能消耗CTRP1越多，血漿中CTRP1含量越少。所以本研究中神經功能缺損和CTRP1呈現負相關關系。

本課題存在以下不足：（1）本研究為單中心小樣本研究，可能存在統計效能不足；（2）本研究患者隨訪時間較短，未對住院期間和出院后患者因為IS的不良事件進行具體統計；（3）本研究未對CTRP1時間動力曲線進行檢測，未探究CTRP1在腦卒中患者隨著病情進展患者血漿中表達的變化；（4）本研究未檢測神經功能缺損相關的特異性標志物，無法探究CTRP1和該類標志物間的相關性；（5）本研究對照組和AIS組的患者基線資料不匹配，AIS組患者具有更多的心腦血管危險因素，可能造成對照組和AIS組患者CTRP之間差異更加顯著。

綜上所述，CTRP1水平與AIS患者晚期神經功能缺損嚴重程度密切相關，患者血清CTRP1表達水平愈高，其神經功能缺損愈嚴重?；蛟SCTRP1可以作為生物標志物對AIS患者神經功能嚴重程度進行評估的有效指標，與其他危險因素共同參與評估AIS病變嚴重程度。并且有助于對疾病進行早期篩查，及時采用個性化治療。

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