不同基因型輕型β-地中海貧血患者血液學特征

裴元元 冉健 叢瀟怡 商璇 熊符 杜麗 魏鳳香

1廣東省深圳市龍崗區(qū)婦幼保健院遺傳實驗室（廣東深圳 518172）；2南方醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院醫(yī)學遺傳學教研室（廣州510515）；3廣東省婦幼保健院醫(yī)學遺傳中心（廣州 510010）

β-地中海貧血是由于β-珠蛋白基因突變，導致β-珠蛋白合成減少或功能完全喪失，多余的α-珠蛋白沉積在紅細胞膜上，從而造成紅細胞破壞的一種溶血性疾病。臨床上主要分為輕型、中間型、重型三個類型［1］。輕型β-地中海貧血患者臨床上一般無癥狀或僅有輕度貧血，實驗室檢查主要表現(xiàn)為小細胞低色素，紅細胞輕度形態(tài)改變且脆性試驗陽性。本文中，我們統(tǒng)計分析了輕型β-地中海貧血患者的血液學參數(shù)，并對比β0/βN和β+/βN型β-地貧患者間的參數(shù)差異，擬通過簡易分析快速鑒別輕型β-地貧的不同基因型，現(xiàn)報告如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象2013年10月至2017年5月我院收治的646例籍貫為廣東、廣西等，基因型為β0/βN或β+/βN且未合并α-三聯(lián)體或四聯(lián)體、異常血紅蛋白突變、HPFH或δβ-地中海貧血的輕型β-地中海貧血患者，年齡0～47歲，男162例，女484例。

1.2 方法

1.2.1 血液學參數(shù)分析取靜脈血2 mL，EDTAK2抗凝。東亞SYSMEX血細胞分析儀分析紅細胞參數(shù)：紅細胞計數(shù)（RBC）、血紅蛋白濃度（Hb）、平均紅細胞體積（MCV）、平均紅細胞血紅蛋白量（MCH）、平均紅細胞血紅蛋白濃度（MCHC）、紅細胞分布寬度變異系數(shù)（RDW-CV）。Sebia全自動毛細管電泳儀進行血紅蛋白電泳，分析HbA2百分比。

1.2.2 地貧基因檢測采用全血基因提取試劑盒提取外周血基因組DNA，基因診斷試劑盒診斷β-地貧的17種點突變（PCR/寡核苷酸探針反向印跡雜交法）。

1.2.3 統(tǒng)計學方法計數(shù)資料用構成比表示，計量資料用均數(shù) ±標準差表示，利用SPSS 16.0軟件對原始數(shù)據(jù)進行t檢驗。

2 結果

2.1 血液學參數(shù)統(tǒng)計646例β-地中海貧血患者主要表現(xiàn)為小細胞、低色素且HbA2明顯升高。平均RBC為（5.00±0.77）×1012/L、平均Hb為（101.83± 13.4）g/L、MCV 為（64.91 ± 7.83）fL、MCH 為（21.09± 11.07）pg、MCHC為（317.33± 15.27）g/L、平均 RDW-CV為（17.55±2.35）%、平均 HbA2為（5.39±0.72）%。

2.2 地貧基因檢測結果β0/βN型β-地貧患者346例，β+/βN型 β-地貧患者 300例，基因型分布見表1。

表1 646例β-地中海貧血患者的基因型分布Tab.1 Genotypic distribution of 646 patients with beta thalassemia

2.3 β0/βN與β+/βN型β-地貧患者參數(shù)對比分析β0/βN型β-地貧患者的MCV與MCH明顯低于β+/βN型β-地貧患者。組間比較 RBC、Hb、MCV、MCH、MCHC、RDW-CV、HbA2等血液學參數(shù)，結果顯示，除Hb及MCHC外，其余參數(shù)的組間差異均有統(tǒng)計學意義（表2）。

表2 β0/βN與β+/βN型β-地貧患者血液學參數(shù)對比分析Tab.2 Comparative analysis of hematological parameters in beta thalassemia β0/βNand β+/βN ±s

表2 β0/βN與β+/βN型β-地貧患者血液學參數(shù)對比分析Tab.2 Comparative analysis of hematological parameters in beta thalassemia β0/βNand β+/βN ±s

注：*P＜0.05

β0/βN β+/βN P值HbA2（%）5.51±0.67 5.26±0.74 0.002*RBC（× 1012/L）5.07±0.72 4.92±0.83 0.012*Hb（g/L）1.01±12.94 1.03±13.86 0.071 MCV（fl）63.28±6.82 66.64±8.95 0.000*MCH（pg）20.16±3.28 22.17±15.81 0.022*MCHC（g/L）316.50±15.25 316.54±26.47 0.982 RDW-CV（%）17.82±2.19 17.21±2.49 0.003*

3 討論

地中海貧血是由于珠蛋白基因缺失或突變導致珠蛋白鏈合成減少或缺如而引起的遺傳性溶血性疾病，臨床上根據(jù)合成障礙的肽鏈不同，主要分為α-地貧和β-地貧兩大類。該病輕者可無臨床表現(xiàn)，重者以進行性溶血性貧血為主要特征，中重型地貧屬于致死或致殘性疾病，目前尚無有效的治療方法。大規(guī)模篩查突變基因攜帶者，阻止中重型地貧患兒出生是最必要的有效措施［2-3］。

β-地中海貧血在廣西、廣東的發(fā)生率高達6.43%和2.54%［1］。β-地中海貧血主要是由于β-珠蛋白基因點突變所引起，也有少部分由于β-珠蛋白基因的缺失所致。β-珠蛋白基因突變主要通過轉錄突變、RNA加工突變、RNA翻譯突變、顯性突變等影響β-珠蛋白基因的功能，β-珠蛋白鏈合成減少即為β+-地中海貧血，β-珠蛋白鏈完全不能合成即為β0-地中海貧血，β-地中海貧血雜合子（β0/βN、β+/βN）通常表現(xiàn)為輕型β-地中海貧血。

目前，MCV、MCH、HbA2廣泛應用于地貧篩查［4-5］，尤其HbA2篩查β-地貧的靈敏度和特異度均很高［2，6-8］。本文研究了646例輕型β-地貧患者的紅細胞參數(shù)，主要表現(xiàn)為明顯的MCV、MCH降低和HbA2升高，Hb、RDW-CV可見輕微異常，RBC及MCHC未見明顯異常。646例患者中，β0/βN基因型占53.5%（346/646），β+/βN基因型占46.5%（300/646），以 β654/βN（33%）、β41-42/βN（32.5%）、β17/βN（14.4%）、β-28/βN（10%）為主，與深圳地區(qū)人群最常見突變類型基本一致［9］。對比分析β0/βN與β+/βN的紅細胞參數(shù)，我們發(fā)現(xiàn)，除Hb、MCHC外，組間RBC、MCV、MCH、RDW-CV、HbA2差異均有統(tǒng)計學意義。與β+/βN患者相比，β0/βN患者的MCV、MCH明顯降低，MCV在63 fL左右，MCH在20 pg左右；RDW-CV、HbA2明顯升高。提示實際臨床工作中可通過綜合分析紅細胞參數(shù)，尤其MCV、MCH降低幅度及HbA2升高幅度初步區(qū)分β0/βN與β+/βN型β-地貧，做好鑒別診斷。另外，本研究還發(fā)現(xiàn)2例 β0/βN及2例 β0/βN共4 例輕型β-地貧患者的血液學參數(shù)尤其MCV、MCH、HbA2未見任何異常，即僅通過血液學篩查極易造成漏診，有賴于DNA分子診斷。

綜上所述，鑒于不同基因型的輕型β-地中海貧血擁有各自獨特的血液學特征，因此，實際工作中應對各血液學參數(shù)聯(lián)合篩查對比分析，降低漏檢率，盡可能減少中重型β-地中海貧血患兒的出生，提高人口素質。

［1］徐湘民.地中海貧血預防控制操作指南［M］.北京：人民軍醫(yī)出版社，2011：20-25.

［2］裴元元，冉健，李高馳，等.單個或聯(lián)合血液學指標檢測在地中海貧血篩查中的應用價值研究［J］.中國優(yōu)生與遺傳雜志，2015，23（7）：24-25.

［3］裴元元，李高馳，冉健，等.深圳地區(qū)兩種類型的珠蛋白生成障礙性貧血的基因型及表型研究［J］.檢驗醫(yī)學與臨床，2015，12（14）：1981-1983.

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［9］袁暉，吳維青，吳曉霞，等.深圳地區(qū)育齡人群地中海貧血基因型分布調查［J］.中山大學學報（醫(yī)學科學版），2012，33（4）:553-557.