程兆俊, 周文靜, 馮 穎, 王 沖
(杭州市婦產科醫院 杭州市婦幼保健院,浙江 杭州 310008)
生殖道感染和炎癥是男性不育的重要影響因素,流行病學研究結果顯示,約有15%的男性生育問題可以歸結于感染和炎癥[1]。 生殖道感染的準確診斷和治療對于男性生殖功能的改善有重要意義[2-3]。目前常用的生殖道感染檢測方法主要是通過直接計數或過氧化酶染色法檢測精液中的白細胞。但是白細胞的出現并不能確定疾病的進展程度[4],可能會造成一定的假陰性結果。近年來,國內外研究均提出精漿彈性蛋白酶(polymorphonuclear neutrophil elastase,PMNE)可作為男性生殖道隱性感染和炎癥的檢測指標[5-7],與精液白細胞水平有很好的相關性[8]。PMNE是由激活的中性粒細胞分泌的一種水解蛋白酶[9],其主要存在于中性粒細胞嗜苯胺藍顆粒中,可反映精液中被破壞和未被破壞的白細胞總量,被認為是更好的檢測指標,更能準確地反映男性生殖道感染程度。
有研究結果顯示,精漿PMNE和白細胞可影響精液酸堿度和精子活力,導致精子質量改變,且抗炎治療后精子活力好轉[10-11]。然而,目前對精漿PMNE是否能影響精液參數以及患者如何選擇復查時間尚無定論。我們通過對PMNE不同程度陽性患者精液參數進行分析,并對不同時間的PMNE復查結果進行比較,探討PMNE對男性生殖感染的影響和復查時機的選擇。
選取2015年1—12月來杭州市婦產科醫院生殖中心進行精液分析和PMNE檢測的763例患者,根據PMNE含量將患者分為3個組:含量≤290 ng/mL者為未感染組(208例);含量在290~1 000 ng/mL之間者為隱性感染組(319例,對其中312例進行復查);含量≥l 000 ng/mL者為確證感染組(236例,對其中213例進行復查)。確證感染及隱性感染患者均服用頭孢克洛或頭孢呋辛治療2周,復查期間不服用其他抗菌藥物。進一步根據用藥后復查時間將患者分為早期復查組(服藥結束后7 d內復查)、中期復查組(服藥結束后7~14 d內復查)和晚期復查組(服藥結束后>14 d復查)[12-13],并進行統計分析。
1.2.1 精液標本采集 患者禁欲2~7 d,用手淫法取精并收集于專用無菌取精杯內,置37 ℃恒溫水浴箱中并記錄液化時間。
1.2.2 精漿PMNE檢測 采用西班牙SCA-H-01型計算機輔助精液分析儀進行精液質量分析后,將完成常規檢查及形態學檢查的精液2 000×g離心20 min,留取上層精漿檢測。如不能及時檢測則存放于-20 ℃冰箱,待檢測時室溫復融。采用酶聯免疫吸附試驗(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)測定PMNE水平,嚴格按照試劑盒說明書進行操作。PMNE定量檢測試劑盒購于深圳華康生物醫學工程有限公司,所使用SUNRISE光吸收酶標儀購自帝肯(上海)貿易有限公司。
采用SPSS 18.0軟件進行統計分析,參數檢驗數據以表示。PMNE水平與精液參數的3個組間比較采用方差分析,2個組間比較采用t檢驗,不同時間PMNE陽性率的比較采用χ2檢驗。以p<0.05為差異有統計學意義。
未感染組、隱性感染組和確診感染組之間精子濃度和前向活動精子比例差異均無統計學意義(P>0.05);而在分組比較中,確證感染組與未感染組前向活動精子比例差異有統計學意義(p<0.05)。見表1。

表1 不同PMNE水平患者精液參數的比較
對312例PMNE隱性感染患者和213例確證感染患者進行了復查。在PMNE隱性感染的復查患者中,早期、中期、晚期復查組之間PMNE陽性率差異無統計學意義(χ2=3.434,P=0.180)。在PMNE確證感染的復查患者中,早期、中期、晚期復查組3個組間PMNE陽性率差異有統計學意義(χ2=22.951,p<0.001),其中早期復查組PMNE陽性率明顯高于中期復查組和晚期復查組(χ2值分別為7.601、18.530,P值分別為0.006、<0.001)。見表2。

表2 隱性感染組和確證感染組不同復查時間PMNE陽性率的比較
臨床上部分男性生殖道感染患者其臨床癥狀、體征并無特異性改變,隱性感染導致部分男性不育。精漿PMNE水平檢測是篩查生殖道隱性炎癥的有力手段,臨床上常以290和1 000 ng/ mL判定男性生殖道隱性感染及確證感染[14-15],本研究也依此分組。
有研究結果顯示,精漿PMNE可影響精液酸堿度和精子活力,導致精子質量改變[16-17]。也有研究證實,精漿PMNE水平下降后,約有67%的無癥狀性生殖道炎癥患者的精子質量有所改善[18]。本研究結果也表明,精漿PMNE水平與精液參數存在一定的相關性。本研究發現,確證感染組(精漿PMNE含量≥1 000 ng/mL)的精子活力較未感染組顯著降低(P=0.038),表明高水平的白細胞裂解和分泌物可對精子產生有害效應,精漿PMNE水平與炎癥程度顯著相關。由于精漿PMNE水平與炎癥程度有關,本研究推測精漿PMNE水平還能跟蹤抗菌藥物治療效果,抗炎治療后可通過檢測精漿PMNE水平,指導臨床治療方案的選擇。
在精漿PMNE的臨床應用中,醫生會因為用藥后PMNE復查時間的選擇對治療效果的判斷產生一定的偏差。我們通過對復查時間分組統計發現,對于確證感染患者,用抗菌藥物治療后,早期復查患者PMNE陽性率顯著高于中期復查患者和晚期復查患者(χ2值分別為7.601、18.530,P值分別為0.006、<0.001),而隱性感染患者中并未顯示這種時間差異,說明確證感染患者精漿中PMNE水平較高,抗菌藥物治療停止后,PMNE仍持續降低。停藥14 d后再復查可避免因PMNE尚未降解造成過度治療,不僅可減少患者抗菌藥物的攝入量,還可減少患者經濟及心理負擔。因此,正確選擇精漿PMNE復查時間能有效地評估男性生殖道感染狀態,并指導合理用藥,對男性生育力的挽救也具有重要的意義。
[1]WEIDNER W,COLPI G M,HARGREAVE T B,et al. EAU guidelines on male infertility[J]. Eur Urol,2002,42(4):313-322.
[2]SAKKAS D,ALVAREZ J G. Sperm DNA fragmentation:mechanisms of origin,impact on reproductive outcome,and analysis[J]. Fertil Steril,2010,93(4):1027-1036.
[3]EISENBERG M L,LIPSHULTZ L I. Varicoceleinduced infertility:newer insights into its pathophysiology[J]. Indian J Urol,2011,27(1):58-64.
[4]王晟,賀占舉,鄶艷榮,等. 精液中白細胞與精液質量的關系研究[J]. 中國性科學,2013,22(5):3-6.
[5]魏小斌,白志明,李春蕓,等. 不育癥患者精漿彈性蛋白酶檢測的臨床意義[J]. 中國實驗診斷學,2009,13(11):1563-1566.
[6]ZORN B,SESEK-BRISKI A,OSREDKAR J,et al. Semen polymorphonuclear neutrophil leukocyte elastase as a diagnostic and prognostic marker of genital tract inflammation-a review[J]. Clin Chem Lab Med,2003,41(1):2-12.
[7]KOPA Z,WENZEL J,PAPP G K,et al. Role of granulocyte elastase and interleukin-6 in the diagnosis of male genital tract inflammation[J]. Andrologia,2005,37(5): 188-194.
[8]聶尚丹,陳廷,李雷生,等. 精漿彈性蛋白酶水平、白細胞定量與男性不育的關系[J]. 中國醫藥導報,2010,7(14):16-18.
[9]石曉星,商學軍. 中性粒細胞彈性蛋白酶在男性生殖道感染診斷中的意義[J]. 中華男科學,2003,9(2):136-139.
[10]秦松林. 男性不育患者精漿中彈性蛋白酶水平和白細胞定量及其與精液質量的關系研究[J]. 航空航天醫學雜志,2014,25(1):19-21.
[11]張濤,陳斌,呂逸清,等. 抗炎治療對白細胞精液癥患者精漿瘦素與活性氧的影響分析[J]. 中國男科學雜志,2014,29(3):52-55.
[12]林楚懷,周輝譜. 男性泌尿生殖道性病感染的檢驗與療效分析[J]. 檢驗醫學與臨床,2014,11(2):171-172.
[13]江傳寧. 泌尿外科感染的原因與治療探討[J]. 醫學信息,2015,28(37):246-247.
[14]EGGERT-KRUSE W,ZIMMERMANN K,GEISSLER W,et al. Clinical relevance of polymorphonuclear (PMN-) elastase determination in semen and serum during infertility investigation[J].Int J Androl,2009,32(32):317-329.
[15]HENKEL R,MAASS G,JUNG A,et al. Agerelated changes in seminal polymorphonuclear elastase in men with asymptomatic inflammation of the genital tract[J]. Asian J Androl,2007,9(3):299-304.
[16]ALLAM J P,FRONHOFFS F,FATHY A,et al. High percentage of apoptotic spermatozoa in ejaculates from men with chronic genital tract inflammation[J].Andrologia,2008,40(5):329-334.
[17]毛金觀,彭忠英,楊戎威,等. 生殖道感染不育患者精漿生化指標與精液參數的相關分析[J]. 浙江醫學,2016,38(18):1519-1520.
[18]馮瑞祥,盧坤剛,張紅燁,等. 精液中性粒細胞彈性蛋白酶的研究進展[J]. 中華男科學雜志,2011,17(11):1023-1028.